鹿genius®病原基因检测PCR配套元件(腹泻原性大肠菌用)|基因检测试剂|生化学试剂-基因工程|试剂|关东化学株式会社

鹿genius®病原基因检测PCR配套元件(腹泻原性大肠菌用)|基因检测试剂|生化学试剂-基因工程|试剂|关东化学株式会社腹泻原性大肠菌(Diarheageniccoli E .),人类腹痛、腹泻症引起大肠杆菌的总称,性质和症状的不同,7种被分类。本试剂盒,多路PCR遗传基因放大,其扩增产物进行确认,在日本主要被报告的5种的致病基因的保有状况确认。

特长

三种混合用底漆,肠管病原性大肠菌(EPEC),肠管出血性大肠菌(EHEC),肠道毒素性大肠菌(ETEC),肠管侵入性大肠菌(EIEC),肠管凝集性大肠菌(EAEC)的病原性有关的遗传基因可检测

检测结果数值化,从而容易判定可能

配套元件的构成

个别名称 容量 数量
试剂A AptaTaq DNA主人(5×Conc .)* 1.2毫升 一本书
试剂B PCR附录 1.1毫升 一本书
试剂C 引物混合1 0.4毫升 一本书
试剂D 引物混合2 0.4毫升 一本书
试剂E 引物混合3 0.4毫升 一本书
试剂F 积极控制 0.4毫升 一本书
试剂G 6×装入缓冲区(BPB·XC) 1.2毫升 一本书
* AptaTaq DNA主人(5×Conc设置Roche Diagnostics K . K .的商品。

操作步骤

增菌、分离培养 大肠菌分离的
DNA抽出 鹿genius®DNA抽出试剂使用DNA模板调制
PCR 3种多路PCR进行
电泳 3%琼脂糖凝胶电泳进行
检测 溴化乙锭溶液检测PCR检测,片段
判定 专用的计算表结果输入,病原型的进行判断

解析

鹿genius®病原基因检测PCR配套元件(腹泻原性大肠菌用)|基因检测试剂|生化学试剂-基因工程|试剂|关东化学株式会社

电泳模式

100 : 100个基点DNA梯形P:积极的控制1:ATCC®35150(EHEC)2:ATCC®43887(EPEC)3:ATCC®35401(ETEC)4:ATCC®43893(EIEC)5:ATCC®25922(非病原性大肠菌)6~10:临床分离股票 泳动条件,3%琼脂糖KANTO A的酒馆熊猫聚会(1×TBE缓冲液),Mupid – exU运用,100伏35分钟。13孔的梳子,用样品8μL电器了泳动了。 *使用了琼脂糖凝胶,一张凝胶13孔梳子3个刺制作着。

样品号码
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
系数的合计值 97 1 24 4 0 97 1 24 16 2
病原型的判定 EHEC EPEC ETEC EIEC 其他 EHEC EPEC ETEC ETEC EAEC

检测基因和其PCR扩增产物尺寸

系数 放大尺寸(bp) 目标领域
Reactionmixture 1 1 速率 eaeA
32 132 stx 1
64 93 stx 2
Reactionmixture 2 16 130 est
8 62 elt
Reactionmixture 3 2 575 aggR
4 可以 invE
内标控制 120 rDNA 16 s

* <em>InvE</em>基因,质粒上有侵入性基因的缘故,脱落的情况。

①3个多路PCR的电泳结果从乐队读取模式。 ②这电泳乐队的有无的结果用,分析用EXCEL表二进法输入,病原型的判定进行。 ③16 s rDNA阳性的情况,大肠杆菌的估计。

合计点和腹泻原性大肠菌的病原型

合计点 病原型
0 EHEC / STEC,EPEC,ETEC,EIEC,EAEC以外的大肠菌或必须是近亲的微生物
1 EPEC
2 EAEC
4~7 EIEC
8~11 ETEC(+)<em>elt</em>
16~19 ETEC(+)<em>est</em>
24~27 ETEC(<em>est</em> +、<em>elt</em> +)
32~35 EHEC / STEC(+)<em>stx 1</em>
64~67 EHEC / STEC(+)<em>stx 2</em>
96~99 EHEC / STEC(<em>stx 1</em> +、<em>stx 2</em> +)
上述以外 混合被怀疑感染

* EIEC和痢疾杆菌区别不能。合计点36的情况,志賀痢疾杆菌的可能性被怀疑。stx(*2志賀毒素2基因型地产生),根据变体检测不能的情况。例)stx 2f

产品信息

产品名 包装 产品编号
鹿genius®致病基因检测试剂盒(PCR腹泻原性大肠菌用) 一包(100次) 08087 – 96
鹿genius®DNA抽出试剂 一包(120次) 08178 – 96

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其他厂家的商品相关的许可证、专利方面,各厂商请确认。

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分离培养基

产品名 包装 产品编号
黑藻アガーSTEC生培养基 10张 72090

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产品名 包装 产品编号
琼脂糖KANTO A的酒馆熊猫聚会了 100克 01089 – 23
10×TBE缓冲液 一L 46510 : 79
溴化乙锭溶液(2毫克/毫升瓶装),眼药水 10毫升 14575 : 43
Quick‐Load 100个基点DNA Ladder gel lanes 125 49881 – 04
TriDye 100个基点DNA Ladder gel lanes 125 49881 – 60
6倍浓缩装入缓冲器 2 mL×6本 24080 – 96

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参考文献

1)公立大学法人大阪市立大学,KALS株式会社,株式会社二共刃型工業;“腹泻原性大肠杆菌检测方法”,专利公开2008 – 283895 2)Ruttler,M . E .el atBiocell30(2): 301 – 308,2006 3)Hiroe,Aet alAppl,Environ,Microbiol78(9):3177 – 3184,2012

宣传手册、说明书(PDF)

小册子鹿genius®病原基因检测PCR配套元件(腹泻原性大肠菌用)(436 KB)

小册子基因检测相关产品指南(2.3 MB)

取扱说明书(390 KB)

计算表(ZIP文件,Excel)

分析用EXCEL表

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信息查询

电话: 03 – 6214 – 1090

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