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Cell Meter 抗氧化活性检测试剂盒
| 货号 | 15900 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 200 Tests | 价格 | 3924 |
| Ex (nm) | 405 | Em (nm) | |
| 分子量 | 溶剂 | ||
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
Cell Meter 抗氧化活性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ROS的试剂盒，活性氧（ROS）在细胞信号传导和维持生理细胞代谢中是重要的。 过量的ROS损害细胞成分，这些成分与多种疾病相关，包括癌症，代谢紊乱，神经退行性疾病等。产生抗氧化剂，包括酶，大分子和小分子，以对抗ROS诱导的生物体内的损伤。 体液，组织和细胞中抗氧化活性的定量分析提供了重要的生物信息。 我们的Amplite™比色抗氧化检测试剂盒使用ABTS作为抗氧化活性的比色指示剂，基于观察到抗氧化剂能够阻止ABTS（2,2′-连氮基 – 双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）氧化的能力 ABTS +通过辣根过氧化物酶（HRP）和过氧化氢（H2O2）ABTS +，一种可溶性色原，可以在405nm处用分光光度法监测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 抗氧化活性检测试剂盒。
适用仪器
| 光吸收酶标仪 | |
| 吸收： | 405nm |
| 推荐孔板： | 透明底板 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.准备样品/ Trolox（10 µL）
2.添加HRP（20 µL）
3.添加ReadiUse ABTS底物溶液（150 µL）
4.在室温下孵育5分钟
5.监控405 nm处的吸光度
溶液配制
1.储存溶液配制
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 辣根过氧化物酶（HRP）储备溶液（2000X）：
向辣根过氧化物酶（组分A）的小瓶中加入1 mL分析缓冲液（组分B）。
1.2 Trolox标准溶液（100毫米）：
将100 µL DMSO加到Trolox瓶中（组分D）。
2.标准溶液配制
Trolox标准
通过使用稀释因子= 2和最高浓度= 1 mM在测定缓冲液（Componenet B）中稀释100 mM Trolox标准溶液来制备Trolox标准溶液。
3.工作溶液配制
将2.5 uL的2000X HRP储备溶液添加到5 mL的测定缓冲液（组分B）中，制成1X HRP工作溶液。
样品操作及实验分析
表1.在透明的96孔微孔板中的Trolox标准品和测试样品的布局。 SD = trolox标准品（SD1-SD7，0.0156至1 mM），BL =空白对照，TS =测试样品。
| BL | BL | TS | TS |
| SD1 | SD1 | … | … |
| SD2 | SD2 | … | … |
| SD3 | SD3 | ||
| SD4 | SD4 | ||
| SD5 | SD5 | ||
| SD6 | SD6 | ||
| SD7 | SD7 |
表2.每个孔的试剂组成
| 孔 | 容积 | 试剂 |
| SD1-SD7 | 50ul | 连续稀释（0.0156至1 mM） |
| BL | 50ul | 分析缓冲液（组分B） |
| TS | 50ul | 样品 |
1.根据表1和表1中的布局，准备trolox标准品（SD），空白对照（BL）和测试样品（TS）（如有必要，在测定缓冲液中稀释样品，使抗氧化剂水平与Trolox处于同一范围内），表2。
2.在Trolox标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入20 µL HRP工作溶液，使总体积为30 µL /孔。
3.向每个孔中加入150 µL ReadiUse ABTS底物溶液（组分C），总体积为180 µL /孔。 注意：避免光照，并在聚丙烯容器中使用。
4.在室温下孵育5分钟。 注意：这5分钟的保温时间是一个指导原则。 可以改变孵育时间以获得更合适的吸光度。
5.使用酶标仪读取405 nm处的吸光度。
参考文献
Fluorescent real-time quantitative measurements of intracellular peroxynitrite generation and inhibition
Authors: Zhen Luo, Qin Zhao, Jixiang Liu, Jinfang Liao, Ruogu Peng, Yunting Xi, Zhenjun Diwu
Journal: Analytical biochemistry (2017): 44–48
Gene silencing of endothelial von Willebrand Factor attenuates angiotensin II-induced endothelin-1 expression in porcine aortic endothelial cells
Authors: Anar Dushpanova, Silvia Agostini, Enrica Ciofini, Manuela Cabiati, Valentina Casieri, Marco Matteucci, Silvia Del Ry, Aldo Clerico, Sergio Berti, Vincenzo Lionetti
Journal: Scientific Reports (2016)
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| 产品名称 | 货号 |
| Cell Meter 比色法细胞毒性检测试剂盒 | Cat#22780 |