TF3-DEVD-FMK 货号13474-AAT Bioquest荧光染料

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TF3-DEVD-FMK

TF3-DEVD-FMK

TF3-DEVD-FMK    货号13474 货号 13474 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 25 Tests 价格 1272
Ex (nm) 554 Em (nm) 578
分子量 975.04 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

TF3-DEVD-FMK是美国AAT Bioquest生产的用于Caspase的试剂,TF3-DEVD-FMK是5-TAMRA-DEVD-FMK(即5-羧基四甲基罗丹明-Asp-Glu-Val-Asp-氟甲基酮)的优良替代品,因为它可以在555 nm处更好地激发。 TF3染料具有与Cy3相同的光谱特性,并具有显著增强的光稳定性。TF3-DEVD-FMK在刺激的细胞中不可逆地与活性胱天蛋白酶3/7结合。 TF3-DEVD-FMK信号的荧光强度与活性半胱天冬酶3/7的数量成正比,可以通过荧光显微镜,流式细胞仪或荧光酶标仪轻松检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的TF3-DEVD-FMK。 

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产品说明书

样品操作及分析

以下说明书仅提供指导,实际实验请根据您的特定需求进行修改。

使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的常规胱天蛋白酶测定方案

1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。

2.准备2X半胱天冬酶底物(50 µM)分析溶液:50 µL底物原液,100 µL DTT(1M),400 µL EDTA(100 mM),10 mL Tris Buffer(20 mM),pH = 7.4。

3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合,并在室温下孵育至少1小时。

4.使用荧光酶标仪检测荧光或使用酶标仪检测吸光度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞Caspase测定

1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。

2.根据需要处理细胞。

3.通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)在Hanks中稀释DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X渗透性半胱天冬酶底物(20 µM)分析溶液。

4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合(来自步骤2.3),并在37°C,5%CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。

5.用HHBS清洗细胞至少一次。

6.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪检测荧光强度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定(仅适用于#13470-13476)

1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。

2.根据需要处理细胞。

3.以1:250的比例将250X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中(例如2 µL至500 µL细胞),并将细胞在37°C,5%CO2的培养箱中孵育1小时。

4.用HHBS清洗细胞至少一次。

5.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪检测荧光强度。

 

参考文献

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Inhibition of Caspase-Like Activities Prevents the Appearance of Reactive Oxygen Species and Dark-Induced Apoptosis in the Unicellular Chlorophyte Dunaliella Tertiolecta(1)
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Selective caspase activation may contribute to neurological dysfunction after experimental spinal cord trauma
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说明书
TF3-DEVD-FMK.pdf