Amplite 比色法D-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒 货号13809-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 比色法D-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒

Amplite 比色法D-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒

Amplite 比色法D-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒    货号13809 货号 13809 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 3924
Ex (nm) 575 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法D-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测LDH的试剂盒,乳酸脱氢酶(LDH )是一种氧化还原酶,其催化丙酮酸和乳酸的相互转换。 LDH存在于各种各样的生物体,包括动物和植物的细胞质中。细胞组织的损伤或红细胞溶血后释放的LDH进入血液。因为LDH是相当稳定的酶,它已被广泛地用于评价损伤组织和细胞毒性的存在。乳酸脱氢酶的定量具有广阔的应用范围。 Amplite 乳酸脱氢酶测定试剂盒提供用于生物样品,如血清,血浆,以及细胞培养物的样品中检测到D-乳酸脱氢酶(D- LDH)基于荧光的方法。在酶偶联法中 LDH与NADH是专门由NADH的荧光传感器监测比例浓度。这个实验是具体的D-乳酸脱氢酶。荧光信号可以通过荧光酶标仪在575 nm处读出。有了这个Amplite D-乳酸脱氢酶测定试剂盒,我们能够探测到低至 3 mU/mL的D-乳酸脱氢酶在100 μL的反应体积。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 比色法D-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 575/605nm
推荐孔板: 透明底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备D-乳酸脱氢酶工作溶液(50 µL)
2.加入D-乳酸脱氢酶标准品或测试样品(50 µL)
3.在室温下孵育30分钟-2小时
4.监测在A575nm / A605nm处的吸光度比增加

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 NAD储备溶液(100X):
将100 µL H2O加入NAD小瓶(组分C)中,制成100X NAD储备溶液。

1.2 D-LDH标准溶液(100 U / mL):
将100 µL H2O或1x PBS缓冲液加到D-LDH标准溶液(组分D)的小瓶中,制成100 U / mL D-LDH标准溶液。

 

2.标准溶液

D-LDH标准
将10 µL 100X D-LDH标准溶液加到990 µL 1x PBS缓冲液中,以生成1000 mU / mL D-LDH标准溶液。 取1000 mU / mL D-LDH标准溶液,并在PBS中进行1:3的系列稀释,以得到D-LDH标准品(SD7-SD1)的系列稀释液。 注意:稀释的D-LDH标准溶液不稳定,应在4小时内使用。

 

3.工作溶液

3.1 将10 mL测定缓冲液(组分B)添加到瓶中的酶探针(组分A)中,制成酶探针混合物。 注意:此酶探针混合物足以容纳两个96孔板。 它在室温下不稳定,应在2小时内及时使用,并避免暴露在光线下。 或者,可以通过将200 µL H2O加入组分A的瓶子中制成50倍的D-LDH酶混合储备液,然后通过将储备液与测定缓冲液(组分B)混合并制备D-LDH工作溶液。 按比例的100倍NAD解决方案。

3.2 将50 µL 100X NAD储备溶液添加到5 mL酶探针混合物中,并充分混合以制成D-LDH工作溶液。 注意:此D-LDH工作溶液足以用于一个96孔板。 它不稳定-足以进行一个实验并立即使用。

 

样品操作及实验分析

表1.白色/透明底部96孔微孔板中D-LDH标准品和测试样品的布局。 SD = D-LDH标准品(SD1-SDH7,0.3至300 mU / mL),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
SD1 SD1
SD2 SD2
SD3 SD3    
SD4 SD4    
SD5 SD5    
SD6 SD6    
SD7 SD7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
SD1-SD7 50ul 连续稀释液(0.3至300 mU / mL)
BL 50ul 稀释缓冲液
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和表2提供的布局,准备D-LDH标准品(SD),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.将50 µL D-LDH工作溶液添加到D-LDH标准品,空白对照和测试样品的每个孔中,以使D-LDH测定总体积为100 µL /孔。 对于384孔板,将25 µL D-LDH工作溶液添加到每个孔中,总体积为50 µL /孔。

3.避光保存,室温下孵育反应30分钟至2小时。

4.使用酶标仪在A575nm / A605nm处监测吸光度的增加。

 

参考文献

Arenobufagin inhibits prostate cancer epithelial-mesenchymal transition and metastasis by down-regulating β-catenin
Authors: Liping Chen, Weiqian Mai, Minfeng Chen, Jianyang Hu, Zhenjian Zhuo, Xueping Lei, Lijuan Deng, Junshan Liu, Nan Yao, Maohua Huang
Journal: Pharmacological Research (2017)

Fibroblast Activation Protein Alpha-Activated Tripeptide Bufadienolide Anti-tumor Prodrug with Reduced Cardiotoxicity
Authors: Li-Juan Deng, Long-Hai Wang, Cheng-Kang Peng, Yi-Bin Li, Mao-Hua Huang, Min-Feng Chen, Xue-Ping Lei, Ming Qi, Yun Cen, Wen-Cai Ye
Journal: Journal of Medicinal Chemistry (2017)

Neuronal Culture Microenvironments Determine Preferences in Bioenergetic Pathway Use
Authors: Juliane Sünwoldt, Bert Bosche, Andreas Meisel, Philipp Mergenthaler
Journal: Frontiers in Molecular Neuroscience (2017): 305

The use of KnockOut serum replacement (KSR) in three dimentional rat testicular cells co-culture model: An improved male reproductive toxicity testing system
Authors: Xiaofang Zhang, Lei Wang, Xiaodong Zhang, Lijun Ren, Wenjing Shi, Yijun Tian, Jiangbo Zhu, Tianbao Zhang
Journal: Food and Chemical Toxicology (2017)

High glucose and interleukin 1β-induced apoptosis in human umbilical vein endothelial cells involves in down-regulation of monocarboxylate transporter 4
Authors: Dong Wang, Qingjie Wang, Gaoliang Yan, Yong Qiao, Ling Sun, Boqian Zhu, Chengchun Tang, Yuchun Gu
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2015): 607–614

Intracellular ATP decrease mediates NLRP3 inflammasome activation upon nigericin and crystal stimulation
Authors: Johji Nomura, Alexander So, Mizuho Tamura, Nathalie Busso
Journal: The Journal of Immunology (2015): 5718–5724

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite 荧光法D-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒 Cat#13808
Amplite 比色法L-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒 Cat#13813
Amplite 荧光法L-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒 Cat#13812

说明书
Amplite 比色法D-乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒.pdf