胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物(Ac-IETD)2-R110 绿 货号13431-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物(Ac-IETD)2-R110 绿

胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物(Ac-IETD)2-R110 绿

胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物(Ac-IETD)2-R110 绿    货号13431 货号 13431 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1272
Ex (nm) 500 Em (nm) 522
分子量 1331.34 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物(Ac-IETD)2-R110 绿是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,(Z-DEVD)2-R110是Caspase 9的荧光底物。因为高纯的罗丹明110(R110)衍生底物被置于内酯的构型内,因此是无色的,也不发出荧光。在Caspase蛋白酶(天冬氨酸蛋白水解酶或胱冬肽酶)的作用下,切割R110上的多肽而获得具有强烈荧光的R110产物,该产物可在480nm(最常见的荧光检测仪上都具有这种激发光源)处被激发后,在510nm-530 nm处用荧光法检测。R110衍生的Caspase底物可能是被广泛用于检测多种Caspase酶活性的底物中最灵敏的荧光底物。我们的R110衍生底物是高纯度的,并保证经HPLC检测不出R110,因这些残留的R11可能会产生显著的本底干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物(Ac-IETD)2-R110 绿。

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产品说明书

样品实验方案

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 L基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

pH-Assisted surface functionalization of selenium nanoparticles with curcumin to achieve enhanced cancer chemopreventive activity
Authors: Shaoxuan Yu, Yanru Wang, Wentao Zhang, Yuhuan Zhang, Wenxin Zhu, Yingnan Liu, Daohong Zhang, Jianlong Wang
Journal: RSC Advances (2016): 72213–72223

 

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产品名称 货号
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说明书
胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物(Ac-IETD)2-R110 绿.pdf