Cell Meter 线粒体膜电位近红外检测试剂盒 适合流式细胞检测 货号22802-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 线粒体膜电位近红外检测试剂盒 适合流式细胞检测

Cell Meter 线粒体膜电位近红外检测试剂盒 适合流式细胞检测

Cell Meter 线粒体膜电位近红外检测试剂盒 适合流式细胞检测     货号22802 货号 22802 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量线粒体膜电位的丧失来检测细胞凋亡。线粒体膜电位的崩溃与线粒体通透性过渡孔的开放相吻合,导致细胞色素C释放到细胞质中,进而触发凋亡级联反应中的其他下游事件。我们的Cell Meter NIR膜电位检测试剂盒为所有必需成分提供了优化的测定方法,可检测细胞凋亡的线粒体膜电位。该荧光测定法是基于我们专有的阳离子MitoLite NIR 染料对细胞中线粒体膜电位的检测。在正常细胞中,MitoLite NIR 主要在线粒体中积累,但是在凋亡细胞中,MitoLite NIR 染色强度降低。通过MitoLite NIR 染色的细胞可以通过流式细胞术观察到红色激发和远红色发射(FL4通道)。该试剂盒可与其他试剂配对,例如蓝激发碘化丙啶和Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒(#22803),用于多参数研究细胞活力和凋亡。该试剂盒经过优化,可通过流式细胞仪筛选凋亡激活剂和抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 线粒体膜电位近红外检测试剂盒。

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 640nm激光
发射: 660/20nm滤波片
通道: APC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用5×105至1×106细胞/ mL的密度制备含测试化合物的细胞
  2. 将5 µL 200X MitoLite NIR加入1 mL细胞溶液中
  3. 在37°C,5%CO2的培养箱中孵育细胞15-30分钟
  4. 沉淀细胞,并将细胞重悬于1 mL生长培养基中
  5. 使用带有FL4通道的流式细胞仪分析细胞

 

操作步骤

1.对于每个样品,在1 mL温暖的培养基或您选择的缓冲液中以5×105至1×106细胞/ mL的密度制备细胞。 注意:应单独评估每种细胞系,以确定诱导凋亡的最佳细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞一段时间,以诱导细胞凋亡,并建立平行对照实验。

阴性对照:仅用载体处理细胞。

阳性对照:在37℃,5%CO2培养箱中,以5-50 µM的浓度用FCCP或CCCP处理细胞15至30分钟。 注意:CCCP或FCCP可以与MitoLite NIR同时添加。 为了获得最佳结果,可能需要为每个单独的细胞系滴定CCCP或FCCP。

3.向处理过的细胞中加入5 µL 200X MitoLite NIR(组分A)。

4.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育15至30分钟。 注意:对于贴壁细胞,在用MitoLite NIR染料上样溶液孵育之前,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并用含血清的培养基洗涤一次。

5.以1000 rpm离心细胞4分钟,然后将细胞重悬于1 mL分析缓冲液(组分B)或您选择的缓冲液中。

6.使用带有FL4通道的流式细胞仪(Ex / Em = 635/660 nm)检测荧光强度。

 

参考文献

Safranine O as a fluorescent probe for mitochondrial membrane potential studied on the single particle level and in suspension
Authors: Perevoshchikova IV, Sorochkina AI, Zorov DB, Antonenko YN.
Journal: Biochemistry (Mosc) (2009): 663

Computer-assisted live cell analysis of mitochondrial membrane potential, morphology and calcium handling
Authors: Koopman WJ, Distelmaier F, Esseling JJ, Smeitink JA, Willems PH.
Journal: Methods (2008): 304

Determination of high mitochondrial membrane potential in spermatozoa loaded with the mitochondrial probe 5,5′,6,6′-tetrachloro-1,1′,3,3′-tetraethylbenzimidazolyl-carbocyanine iodide (JC-1) by using fluorescence-activated flow cytometry
Authors: Guthrie HD, Welch GR.
Journal: Methods Mol Biol (2008): 89

Effects of eprosartan on mitochondrial membrane potential and H2O2 levels in leucocytes in hypertension
Authors: Labios M, Martinez M, Gabriel F, Guiral V, Ruiz-Aja S, Beltran B, Munoz A.
Journal: J Hum Hypertens (2008): 493

Evaluation of sperm mitochondrial membrane potential by JC-1 fluorescent staining and flow cytometry
Authors: Xia XY, Wu YM, Hou BS, Yang B, Pan LJ, Shi YC, Jin BF, Shao Y, Cui YX, Huang YF.
Journal: Zhonghua Nan Ke Xue (2008): 135

How DASPMI reveals mitochondrial membrane potential: fluorescence decay kinetics and steady-state anisotropy in living cells
Authors: Ramadass R, Bereiter-Hahn J.
Journal: Biophys J (2008): 4068

Life cell quantification of mitochondrial membrane potential at the single organelle level
Authors: Distelmaier F, Koopman WJ, Testa ER, de Jong AS, Swarts HG, Mayatepek E, Smeitink JA, Willems PH.
Journal: Cytometry A (2008): 129

Mitochondrial membrane potential in axons increases with local nerve growth factor or semaphorin signaling
Authors: Verburg J, Hollenbeck PJ.
Journal: J Neurosci (2008): 8306

The mitochondrial membrane potential and Ca2+ oscillations in smooth muscle
Authors: Chalmers S, McCarron JG.
Journal: J Cell Sci (2008): 75

Cyclosporin A-induced oxidative stress is not the consequence of an increase in mitochondrial membrane potential
Authors: van der Toorn M, Kauffman HF, van der Deen M, Slebos DJ, Koeter GH, Gans RO, Bakker SJ.
Journal: Febs J (2007): 3003

说明书
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Cell Meter 细胞内谷胱甘肽GSH检测试剂盒 适合流式细胞检测 货号22810-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 细胞内谷胱甘肽GSH检测试剂盒 适合流式细胞检测

Cell Meter 细胞内谷胱甘肽GSH检测试剂盒 适合流式细胞检测

Cell Meter 细胞内谷胱甘肽GSH检测试剂盒 适合流式细胞检测     货号22810 货号 22810 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 510 Em (nm) 525
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量耗尽的抗氧化剂还原型谷胱甘肽(GSH)来检测细胞凋亡。 GSH参与许多细胞过程,包括清除自由基,药物解毒,细胞信号传导和细胞增殖。细胞中GSH浓度的降低是许多细胞类型中对不同凋亡刺激物响应的细胞死亡进程的早期标志。我们的Cell Meter 细胞内GSH检测试剂盒为所有必需成分提供了优化的检测方法,用于检测GSH降低的细胞凋亡。该荧光测定法是基于使用我们专有的非荧光Thiolite Green染料检测细胞中GSH的结果,该染料与硫醇反应后会发出强烈的荧光。在正常细胞中,Thiolite Green主要在细胞质中积累,但在凋亡细胞中它会部分转移到线粒体中,而Thiolite Green的染色强度会降低。 Thiolite Green染色的细胞可以通过流式细胞仪观察。该试剂盒可与其他试剂配对,例如7-AAD(Cat#17501),碘化丙啶(Cat#17517),用于多参数研究细胞生存力和凋亡。该试剂盒经过优化,可通过流式细胞仪筛选凋亡激活剂和抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 细胞内谷胱甘肽GSH检测试剂盒。

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 610nm
发射: 650nm
cutoff: 630nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用5×105至1×106细胞/ mL的密度制备含测试化合物的细胞
  2. 将5 µL 200X Thiolite Green加入1 mL细胞溶液中
  3. 将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育15至30分钟
  4. 沉淀细胞并将细胞重悬于1 mL生长培养基中
  5. 使用带有FL1通道的流式细胞仪分析细胞

 

溶液配制

储存溶液配制

1. Thiolite 绿色原液(200X):将500µL DMSO(组分C)加入小瓶Thiolite Green(组分A)中并充分混合,制成200X Thiolite Green储备液,避光。

 

实验步骤

1.对于每个样品,在1 mL温热培养基或自备缓冲液中以5×105至1×106细胞/ mL的密度制备细胞。注意:应单独评估每种细胞系,以确定诱导凋亡的最佳细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞所需的时间以诱导凋亡。

3.向处理过的细胞中加入5µL 200X Thiolite Green储备溶液。

4.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育15至30分钟。注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在与Thiolite Green染料上样溶液孵育之前,用含血清的培养基清洗细胞一次。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。

5.可选:将细胞以1000 rpm离心4分钟,然后将细胞重悬于1 mL的测定缓冲液(组分B)或自备缓冲液中。

6.使用带有FL1通道的流式细胞仪(Ex / Em = 490/525 nm)检测荧光强度。

 

参考文献

The Combination of Astragalus membranaceus and Angelica sinensis Inhibits Lung Cancer and Cachexia through Its Immunomodulatory Function
Authors: Wu, Tsung-Han and Yeh, Kun-Yun and Wang, Chen-Hsu and Wang, Hang and Li, Tsung-Lin and Chan, Yi-Lin and Wu, Chang-Jer
Journal: Journal of oncology (2019)

ROS production and glutathione response in keratinocytes after application of β-carotene and VIS/NIR irradiation
Authors: Lohan, Silke B and Vitt, Kristina and Scholz, Patrik and Keck, Cornelia M and Meinke, Martina C
Journal: Chemico-biological interactions (2017)

Osmotic stress is accompanied by protein glycation in Arabidopsis thaliana
Authors: Paudel, Gagan and Bilova, Tatiana and Schmidt, Rico and Greifenhagen, Uta and Berger, Robert and Tarakhovskaya, Elena and Stöckhardt, Stefanie and Balcke, Gerd Ulrich and Humbeck, Klaus and Br and t, Wolfgang and others
Journal: Journal of Experimental Botany (2016): 6283–6295

Systemic Induction of NO-, Redox-, and cGMP Signaling in the Pumpkin Extrafascicular Phloem upon Local Leaf Wounding
Authors: Gaupels, Frank and Furch, Alex and ra CU and Zimmermann, Matthias R and Chen, Faxing and Kaever, Volkhard and Buhtz, Anja and Kehr, Julia and Sarioglu, Hakan and Kogel, Karl-Heinz and Durner, Jörg
Journal: Frontiers in plant science (2016)

Molecular mechanisms of hyperthermia-induced apoptosis enhanced by withaferin A
Authors: Cui, Zheng-Guo and Piao, Jin-Lan and Rehman, Mati UR and Ogawa, Ryohei and Li, Peng and Zhao, Qing-Li and Kondo, Takashi and Inadera, Hidekuni
Journal: European journal of pharmacology (2014): 99–107

Cancer & Metabolism
Authors: LaMonte, Gregory and Tang, Xiaohu and Chen, Julia Ling-Yu and Wu, Jianli and Ding, Chien-Kuang Cornelia and Keenan, Melissa M and Sangokoya, Carolyn and Kung, Hsiu-Ni and Ilkayeva, Olga and Boros, László G and others
Journal: (2013)

说明书
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NCO-PEG-FITC 3.4k 异氰酸聚乙二醇荧光素 分子量MW 3400

上海金畔生物科技有限公司提供NCO-PEG-FITC 3.4k 异氰酸聚乙二醇荧光素 分子量MW 3400

品牌:
货号:JPB-05723
中文名:异氰酸聚乙二醇荧光素 分子量MW 3400
英文名:NCO-PEG-FITC 3.4k
端基取代率:》95%
纯度:》95%
分子量:3.4k/3400
分散度:《1.05
包装:1克/5克/10克

更多产品,更多优惠,请联系我们!
订货热线:15221999938
qq号:2743691513
金畔博客:www.jinpanbio.cn
Email:sales@jinpanbio.com

Cell Meter 核细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 货号22811-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 核细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter 核细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter 核细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光     货号22811 货号 22811 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 503 Em (nm) 527
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量凋亡染色质浓缩来监测细胞凋亡。与健康细胞相比,凋亡细胞的染色质紧密结合更多数量的核染料。我们的Cell Meter 核细胞凋亡测定试剂盒为所有必需成分提供了优化的测定方法,可用于检测核浓缩细胞的凋亡。这种荧光测定法是基于使用我们专有的非荧光染料对细胞中DNA含量的检测,该染料在与DNA结合后会发出强烈的荧光。在正常细胞中,Nuclear Green 不具有细胞渗透性,但是在凋亡细胞中,质膜受损或细胞代谢受损/没有细胞代谢的细胞无法阻止染料进入细胞。染料一旦进入细胞,便会与细胞内DNA结合,产生高度荧光的复合物,从而将细胞鉴定为无活力的细胞。核绿色染色;可以使用流式细胞仪(FL1通道)或荧光显微镜(FITC滤波片组)测量DCS1。该试剂盒可与我们的其他凋亡试剂一起使用,例如我们的Cell Meter NIR线粒体膜电位检测试剂盒(Cat#22802),用于细胞存活率和凋亡的多参数研究。该试剂盒经过优化,可筛选凋亡激活剂和抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 核细胞凋亡检测试剂盒。

点击查看光谱

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 480nm激光
发射: 530/30nm滤波片
通道: FITC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用5×105至1×106cell/ mL的密度制备含测试化合物的细胞
  2. 将5µL 200X Nuclear Green DCS1加入1 mL细胞溶液中
  3. 将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育30至60分钟
  4. 沉淀细胞并将细胞重悬于1 mL生长培养基中
  5. 使用带有FL1通道的流式细胞仪分析荧光强度

 

实验步骤

1.对于每个样品,在1 mL温暖的培养基或您选择的缓冲液中以5×105至1×106细胞/ mL的密度制备细胞。注意:应单独评估每种细胞系,以确定诱导凋亡的最佳细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞以诱导凋亡。

3.向处理过的细胞中加入5 µL 200X Nuclear Green DCS1(组分A)。

4.将细胞溶液在37°C,5%CO2培养箱中孵育30至60分钟。注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞贴壁,并在用Nuclear Green DCS1染料上样溶液孵育之前,用含血清的培养基洗涤细胞一次。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。

5.可选:以1000 rpm离心细胞4分钟,然后将细胞重悬于1 mL的测定缓冲液(组分B)或自备缓冲液中。

6.使用带有FL1通道的流式细胞仪(Ex / Em = 490/525 nm)检测荧光强度。

 

参考文献

Curcumin induces cell cycle arrest and apoptosis in human osteosarcoma (HOS) cells
Authors: Lee DS, Lee MK, Kim JH.
Journal: Anticancer Res (2009): 5039

Real-time in vivo imaging of retinal cell apoptosis after laser exposure
Authors: Schmitz-Valckenberg S, Guo L, Maass A, Cheung W, Vugler A, Moss SE, Munro PM, Fitzke FW, Cordeiro MF.
Journal: Invest Ophthalmol Vis Sci (2008): 2773

Effects of Chinese herbal recipe Weichang’an in inducing apoptosis and related gene expression in human gastric cancer grafted onto nude mice
Authors: Zhao AG, Yang JK, You SF, Li T, Zhao HL, Gu Y, Tang LD, Qiu JX.
Journal: Zhong Xi Yi Jie He Xue Bao (2007): 287

Effects of neuraminidase on apoptosis of blood lymphocytes in rats with implanted Morris tumor
Authors: Grata-Borkowska U, Steciwko A, Pokorski M, Drobnik J, Gasiorowski K, Pirogowicz I, Cieslar-Marczak E.
Journal: J Physiol Pharmacol (2007): 253

Growth arrest and apoptosis induced by quercetin is not linked to adipogenic conversion of human preadipocytes
Authors: Morikawa K, Ikeda C, Nonaka M, Suzuki I.
Journal: Metabolism (2007): 1656

Morphological study on apoptosis Hela cells induced by soyasaponins
Authors: Xiao JX, Huang GQ, Zhu CP, Ren DD, Zhang SH.
Journal: Toxicol In Vitro (2007): 820

Apoptosis induction and mitochondria alteration in human HeLa tumour cells by photoproducts of Rose Bengal acetate
Authors: Panzarini E, Tenuzzo B, Palazzo F, Chionna A, Dini L.
Journal: J Photochem Photobiol B (2006): 39

Cell-free plasma DNA: a marker for apoptosis during hemodialysis
Authors: Atamaniuk J, Ruzicka K, Stuhlmeier KM, Karimi A, Eigner M, Mueller MM.
Journal: Clin Chem (2006): 523

Cytoplasmic Ca2+ signals and cellular death by apoptosis in myocardiac H9c2 cells
Authors: Lax A, Soler F, Fern and ez-Belda F.
Journal: Biochim Biophys Acta (2006): 937

Growth inhibition and apoptosis inducing mechanisms of curcumin on human ovarian cancer cell line A2780
Authors: Zheng LD, Tong QS, Wu CH.
Journal: Chin J Integr Med (2006): 126

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SC-PEG-SG 10k 琥珀酰亚胺碳酸酯聚乙二醇琥珀酰亚胺戊二酸酯 分子量MW 10000

上海金畔生物科技有限公司提供SC-PEG-SG 10k 琥珀酰亚胺碳酸酯聚乙二醇琥珀酰亚胺戊二酸酯 分子量MW 10000

品牌:
货号:JPB-02351
中文名:琥珀酰亚胺碳酸酯聚乙二醇琥珀酰亚胺戊二酸酯 分子量MW 10000
英文名:SC-PEG-SG 10k
端基取代率:》95%
纯度:》95%
分子量:10k/10000
分散度:《1.05
包装:1克/5克/10克

更多产品,更多优惠,请联系我们!
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qq号:2743691513
金畔博客:www.jinpanbio.cn
Email:sales@jinpanbio.com

whatman GF/B玻璃微纤维滤纸圆型 1821-047 4.7CM 100/PK

whatman GF/B玻璃微纤维滤纸圆型 1821-047  4.7CM 100/PK

whatman 滤膜滤纸滤器 1821-021 GF/B 2.1CM 100/PK GF/B玻璃微纤维滤纸圆型21mm/100
whatman 滤膜滤纸滤器 1821-024 GF/B 2.4CM 100/PK GF/B玻璃微纤维滤纸圆型24mm/100
whatman 滤膜滤纸滤器 1821-025 GF/B 2.5CM 100/PK GF/B玻璃微纤维滤纸圆型25mm/100
whatman 滤膜滤纸滤器 1821-037 GF/B 3.7CM 100/PK GF/B玻璃微纤维滤纸圆型37mm/100
whatman 滤膜滤纸滤器 1821-042 GF/B 4.25CM 100/PK GF/B玻璃微纤维滤纸圆型42.5mm/100
whatman 滤膜滤纸滤器 1821-047 GF/B 4.7CM 100/PK GF/B玻璃微纤维滤纸圆型47mm/100
whatman 滤膜滤纸滤器 1821-055 GF/B 5.5CM 100/PK GF/B玻璃微纤维滤纸圆型55mm/100
whatman 滤膜滤纸滤器 1821-060 GF/B 6.0CM 100/PK
whatman 滤膜滤纸滤器 1821-070 GF/B 7.0CM 100/PK GF/B玻璃微纤维滤纸圆型70mm/100
whatman 滤膜滤纸滤器 1821-090 GF/B 9.0CM 25/PK GF/B玻璃微纤维滤纸圆型90mm/25
whatman 滤膜滤纸滤器 1821-110 GF/B 11.0CM 25/PK GF/B玻璃微纤维滤纸圆型110mm/25
whatman 滤膜滤纸滤器 1821-125 GF/B 12.5CM 25/PK GF/B玻璃微纤维滤纸圆型125mm/25
whatman 滤膜滤纸滤器 1821-150 GF/B 15CM 25/PK GF/B玻璃微纤维滤纸圆型150mm/25
whatman 滤膜滤纸滤器 1821-185 GF/B 18.5CM 25/PK GF/B玻璃微纤维滤纸圆型185mm/25
whatman 滤膜滤纸滤器 1821-271 GF/B 2.25×12.25IN 100/PK GF/B玻璃微纤维滤纸方形2.25×12.25inch/100
whatman 滤膜滤纸滤器 1821-6906 GF/B 600MMx540M REEL 1/PK
whatman 滤膜滤纸滤器 1821-8265 GF/B 1.5IN x 100M REEL
whatman 滤膜滤纸滤器 1821-914 GF/B 46x57CM 5/PK GF/B玻璃微纤维滤纸方形460x570mm/5

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 货号22812-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光     货号22812 货号 22812 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 tests 价格 2604
Ex (nm) 341 Em (nm) 441
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡检测的试剂盒,Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 *蓝色荧光* 是通过测量Caspase 8的活性而用于细胞凋亡检测的。Caspase 8 是一种Caspase蛋白,CASP8基因所编码。在神经元变性疾病中,例如亨廷顿综合症,caspase 8扮演着重要角色。Caspase 8已被证明具有底物选择性,其肽基序为Ile-Glu-Thr-Asp (IETD)。该试剂盒使用(Ac-IETD)2-AMC作为荧光指示器来检测caspas-8的活性。通过caspas-8的切割AMC肽产生强蓝色荧光(eX/eM = 350/450 NM)。这种特性使得试剂盒能适合于DAPI滤光器。本试剂盒提供所有必需组分和最佳操作流程。该实验结果稳定,快速且适应高通量筛选。它不仅能够定量凋亡细胞中caspas-8的活性还能筛选caspas-8的抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 370nm
发射: 450nm
cutoff: 420nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 顶或底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)制备细胞
2.加入等体积的Caspase 8工作溶液(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)
3.在室温下孵育30-60分钟
4.监测Ex / Em = 370/450 nm处的荧光增加(截止= 420 nm)

 

工作溶液配制

将50μLCaspase8底物(组分A)加入10mL测定缓冲液(组分B)中并充分混合以制备Caspase 8工作溶液。 避光。 注意:Caspase 8工作液不稳定,请及时使用。有关细胞样品制备的指南,请点击查看

 

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物(96孔板)或5μL/孔的5X测试化合物(384孔板)加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在5%CO 2,37℃培养箱中孵育所需的一段时间(对于用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时)以诱导细胞凋亡。

3.加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的Caspase 8工作溶液。

4.将Caspase 8工作溶液板在室温下孵育30至60分钟,避光。注意:如果需要,在室温下加入Caspase 8工作溶液10分钟前,向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-IETD-CHO caspase 8抑制剂,以确认对caspase 8样活性的抑制作用。

5.以800rpm离心细胞板(特别是对于非贴壁细胞)2分钟(制动关闭)。

6.用荧光酶标仪在Ex / Em = 370 / 450nm(截止= 420nm)下监测荧光增加。

 

数据分析

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光     货号22812

图1.使用Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒检测Jurkat细胞中的caspase 8活性*蓝色荧光*。 在Costar黑壁/透明底96孔板中以相同的一天以200,000个细胞/90μL/孔接种Jurkat细胞。 用或不用1μM星形孢菌素处理细胞5小时。 加入半胱天冬酶8工作溶液(100μL/孔)并在室温下温育30分钟。 使用FlexStation 酶标仪(Molecular Devices)在Ex / Em = 370 / 450nm(截止值= 420nm)下测量荧光强度。

 

参考文献

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t-BHQ Provides Protection against Lead Neurotoxicity via Nrf2/HO-1 Pathway
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