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Embgenix PGT-A Kit (RUO)
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	634760	Embgenix PGT-A Kit (RUO)	96 Rxns	￥69,733

胚胎植入前染色体非整倍体分析(科研用) Embgenix PGT-A Kit (RUO)

· 完整的PGT-A分析流程，包含全基因组扩增，文库构建以及染色体非整倍体分析 · 可用于滋养层胚胎(TE)活检样本进行PGT-A验证 · 单步WGA减少手动操作时间，文库构建包含片段化步骤 · 卓越的灵敏度和再现性可用于CNV检测分析 · 灵活的工作流程，可兼容多种样本起始数量 (24到96个样本) · 兼容Illumina的多款测序平台，比如Miseq®、 NextSeq® 500/550 · 整合UDI建库，在高通量型Illumina测序仪上有更好的样本拆析与测序可靠性   ■ 产品说明： Embgenix PGT-A Kit是一款仅供研究用途（RUO）的试剂盒。旨在识别具有正确数量染色体的胚胎，以便提高体外受精 (IVF)时的妊娠率。该试剂盒是在广泛的分析和临床验证研究的前提下开发而来的，可以正确识别24条染色体上的染色体非整倍体情况，包括21三体综合征。此外，还可以识别节段性非整倍体（segmental aneuploidy ）和嵌合体 。该试剂盒可兼容Illumina测序平台，用于提供PGT-A分析。 该试剂盒在包含核心的PicoPLEX专利技术（U.S. Patents 8,206,913）基础上，同时整合了Takara Bio Group专利性的文库构建技术（U.S. Patents 7,803,550, 8,399,199, 8,728,737, 9,598,727, 10,196,686, 10,208,337, and 11,072,823）及双端特殊index（UDI），简化了测序文库流程。PicoPLEX技术使用准线性扩增方法，可以对单细胞或微量DNA样本进行准确全基因组分析，用于高再现性的检测非整倍体异倍性和CNV。在建库阶段(DNA片段化、末端修复、接头添加、PCR扩增和index添加)可以在单管中进行，约2个小时即可完成，无需纯化或样品转移步骤，可以尽可能的减少样品损耗！ 测序后，可以使用我们专门的Embgenix Analysis Software (RUO) 进行数据分析。这个软件的算法是基于内部配置的参考基因组，采用bin counts计算CCNs（calculated copy numbers）来确定最终的CNV准确度。该软件允许用户自主选择自动还是手动设置来分析是整个染色体、还是节段非整倍体，或者是嵌合体。而且生成的数据可以在图表中可视化展示。另外， 数据分析结果支持下载为PDF报告，也可以根据每个实验室需求进行定制。   ■ 实验流程概要：

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Embgenix™ ESM Screen Kit
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	634782	Embgenix™ ESM Screen Kit	96 Rxns	￥74,192

Embgenix™ ESM Screen Kit

· 可以提供对体外受精（IVF）实验室收集的非侵入性样品，比如胚胎培养液 (embryo spent media，ESM)以及囊胚腔液（blastocoel fluid），进行拷贝数变异（CNV）评估的完整流程 · 使用PicoPLEX WGA技术可以对低起始量和片段化DNA进行成功扩增 · 操作更加简便：一步法的WGA方法可以减少手动操作时间，并且文库构建包含片段化步骤 · 兼容更大的起始量（30 μl的培养基样本） · 灵活的工作流程，可兼容多种样本起始数量 (24到96个样本) · 兼容Illumina的多款测序平台，比如Miseq®、 NextSeq® 500/550 · 整合UDI建库，在高通量型Illumina测序仪上有更好的样本拆析与测序可靠性 · 可以使用Embgenix Analysis Software (RUO)对非侵入性样品进行数据分析   ■ 产品说明： Embgenix ESM Screen Kit是一款仅供研究用途（RUO）的试剂盒。旨在对体外受精（IVF）周期内收集的非侵入性样品，比如胚胎培养液以及囊胚腔液，进行CNV评估。可以正确识别24条染色体上的染色体非整倍体、节段性非整倍体（segmental aneuploidy ）和嵌合体。 该试剂盒优化用于较高体积的起始量样本，包含的用于定量的模块可准确定量非侵入性样品中的cfDNA，并可兼容Illumina的多款测序平台。 该试剂盒在包含核心的PicoPLEX专利技术（U.S. Patents 8,206,913）基础上，同时整合了Takara Bio Group专利性的文库构建技术（U.S. Patents 7,803,550, 8,399,199, 8,728,737, 9,598,727, 10,196,686, 10,208,337, and 11,072,823）及双端特殊index（UDI），简化了测序文库流程。PicoPLEX技术使用准线性扩增方法，可以对单细胞或微量DNA样本进行高再现性的非整倍体异倍性和CNV分析。在建库阶段可以在单管中进行(包括DNA片段化、末端修复、接头添加、PCR扩增和index添加流程)，约2个小时即可完成，无需纯化或样品转移步骤，可以尽可能的减少样品损耗！ 测序后，可以使用我们专门的Embgenix Analysis Software (RUO) 对非侵入性样品进行数据分析。这个软件的算法是基于内部配置的参考基因组，采用bin counts计算CCNs（calculated copy numbers）来确定最终的CNV准确度。该软件允许用户自主选择自动或手动设置来分析是整个染色体、还是节段非整倍体，或者是嵌合体，而且生成的数据可以在图表中可视化展示。另外，数据分析结果支持下载为PDF报告，也可以根据每个实验室需求进行定制。   ■ 实验流程概要：

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SMART-Seq mRNA Single Cell LP & SMART-Seq mRNA Single Cell
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	634786	SMART-Seq mRNA Single Cell LP	24 Rxns	￥17,917
Clontech	634787	SMART-Seq mRNA Single Cell LP	96 Rxns	￥60,919
Clontech	634788	SMART-Seq mRNA Single Cell LP	4×96 Rxns	￥219,310
Clontech	634789	SMART-Seq mRNA Single Cell	24 Rxns	￥15,184
Clontech	634790	SMART-Seq mRNA Single Cell	96 Rxns	￥51,626
Clontech	634785	SMART-Seq mRNA Single Cell	4×96 Rxns	￥185,856

SMART-Seq mRNA Single Cell LP & SMART-Seq mRNA Single Cell

◆ 操作简便，基于Plate的工作流程 – 可直接以FACS或其他方法分选的单细胞起始 ◆ 单管操作流程 – SMART-Seq mRNA Single Cell LP包含完整的cDNA合成和文库构建流程，分别在单管中进行，减少样品损失与混淆，降低手动操作误差 ◆ 灵敏度高且一致性好 – 非常适用于单细胞（尤其是RNA含量非常低的细胞和细胞核）RNA-Seq的研究，可检测更多基因 ◆ 可靠的全长cDNA分析 – 性能优于许多现有的单细胞全长cDNA合成方法，例如Smart-seq2 ◆ 测序性能 – SMART-Seq mRNA Single Cell LP搭配Unique Dual Index kits（单独购买)，即便多个文库pool后用高通量型Illumina测序仪（如Novaseq）分析，也能得到正确结果 ◆ 更高的文库产量 – 更便于使用高通量型Illumina测序仪分析（如Novaseq），或保存剩余的文库用于多次测序 ◆ 高度灵活的工作流程 – 可与自动化设备兼容     ◇ SPT Labtech mosquito HV user guide     ◇ Formulatrix MANTIS Microfluidic Liquid Handler user guides         · Full-volume         · Quarter-volume   ■ 产品说明： SMART-Seq mRNA Single Cell Kit (SSmRNA Single Cell) 和SMART-Seq mRNA Single Cell LP Kit (SSmRNA Single Cell LP) 是两款具有高灵敏度和高可再现性、适用于单细胞和单个细胞核的RNA-Seq分析试剂盒。试剂盒采用oligo（dT）引物，可从一些RNA含量非常低的单细胞（如PBMC、T细胞、B细胞）直接起始，合成高品质的全长cDNA。使用SSmRNA Single Cell LP kit搭配 Unique Dual Index kits （单独购买)，最多可以制备384 Illumina测序文库。SSmRNA Single Cell LP kit提供完整的单细胞RNA-Seq分析流程，包含从样本制备cDNA、文库构建以及搭配使用的生物信息学分析软件进行数据分析的流程。 SSmRNA Single Cell是基于SMART技术(Switching Mechanism at 5′ End of RNA Template)，提供全长转录本信息，支持分析转录本异构体、融合基因、点突变等，具有更高的再现性和均一的gene body覆盖度，而且高GC含量转录本也能得到正确的分析。同时，Takara科学家对这一技术进行优化改良，使得这个试剂盒更适合单细胞分析，能得到更多有效reads、更高的基因检测数，对珍贵样本的分析更加深入！ SSmRNA Single Cell LP在包含核心的cDNA合成试剂基础上，同时整合了Takara Bio Group专利性的文库构建技术（U.S. Patents 7,803,550, 8,399,199, 8,728,737, 9,598,727, 10,196,686, 10,208,337, and 11,072,823）及单次使用的双端特殊index（UDI），提供完整的单细胞cDNA合成到文库构建的实验体验。建库试剂中包含片段化酶，以实现对合成cDNA的片段化，利用特别的茎环形接头构建高品质Illumina文库。在建库阶段，单管两步操作、过程中无需纯化、2 h即可建成文库！ 如果是以高品质的少量细胞(＜1,000)或者微量Total RNA起始时，推荐使用SMART-Seq mRNA LP Kit或SMART-Seq mRNA LP (with UMIs) Kit。 如果是以随机引物起始，对少量细胞或者降解的Total RNA样本进行RNA-Seq分析时，推荐使用SMART-Seq Stranded Kit。   ■ 实验流程概要：

图1. SMART-Seq mRNA Single Cell & SMART-Seq mRNA Single Cell LP的cDNA合成流程

图2. SMART-Seq mRNA Single Cell LP的文库制备工作流程

■ 数据展示：

注：以下展示来源于SMART-Seq Single Cell Kit (SSsc) 和 SMART-Seq Single Cell PLUS (SSsc PLUS)的数据。因为两者分别是SMART-Seq mRNA Single Cell 和SMART-Seq mRNA Single Cell LP等效替换品。

● 灵敏度更高的单细胞全长转录组分析

图3. 与Smart-seq2法的比较

Takara科学家以淋巴母细胞系GM12878单细胞为样本制备文库，分别采用SMART-Seq Single Cell Kit(SSsc，18个重复)和Smart-seq2法（Smart-seq2，20个重复）合成cDNA（均进行19个PCR循环扩增），所有样本都均一化至1.75M paired-end reads，然后制备RNA-Seq文库并进行测序分析。 Panel A 根据cDNA的制备方法不同，结果也不同。相比而言，Smart-seq2结果中比对到线粒体基因组的比率较高，而检测到基因鉴别的reads数相对较少。 Panel B SMART-Seq Single Cell Kit能检测到比Smart-seq2更多的基因。

● SMART-Seq mRNA Single Cell LP提供完整的单细胞RNA-Seq建库体验！

图4. 与其他同类产品比较数据

Panel A. 以10 pg小鼠脑total RNA起始，采用SMART-Seq Single Cell Kit完成cDNA合成。随后分别采用SSsc Plus Kit中的SMART-Seq Library Prep Kit模块与市面上较常用的A公司试剂盒构建文库，并比较性能差异。 Panel B. 从测试数据中可以看出，SSsc PLUS Kit所建文库的产量是A公司Kit产量的5倍，而更高的文库产量更适于高通量型Illumina测序仪，如Novaseq。 Panel C. 两种方法所建文库随后用Nextseq 500完成测序，并对TPM(Transcripts per million)≥0.1的基因数进行统计。相较于A公司文库，SSsc PLUS文库能检出更多的基因，从同样的cDNA起始能“捕获”更全的信息！

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microRNA定量（qRT-PCR）
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	638315	Mir-X miRNA First-Strand Synthesis Kit	60 Rxns	￥4,953
Clontech	638313	Mir-X miRNA First-Strand Synthesis Kit	20 Rxns	￥3,213
Clontech	638314	Mir-X miRNA qRT-PCR TB Green® Kit	20 Rxns RT；200 Rxns qPCR	￥5,007
Clontech	638316	Mir-X miRNA qRT-PCR TB Green® Kit	60 Rxns RT；600 Rxns qPCR	￥10,485

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[通知] Takara嵌合法Real Time PCR（qPCR）产品的名称从2017年12月下旬开始，将逐步变更为「TB Green系列」。产品Code、性能和原有产品相比没有变化，请继续放心使用。 产品名称将随新lot的产品逐步变更，产品网页或操作说明书可能会先于产品标签变更，望知悉！
	→详情请点击此处
microRNA是一类被广泛关注的非编码RNA，长度为22 nt左右，对植物和动物的基因表达有着非常重要的调控作用。Clontech提供用于microRNA定量检测的Mir-X™ 系列产品，性价比较高，能够满足大部分研究人员的实验需要。
产品特点
· 通用的加A尾反转录原理，一次反转样品中的不同microRNA · 简单的一步法cDNA合成系统，无需复杂的操作 · 可使用同一RNA模板进行不同microRNA的定量检测，节省样品用量 · 试剂盒附带通用的PCR下游引物，只需设计特异性的上游引物即可 · 可对低至50 copies的microRNA进行检测，灵敏度高 · 产品有独立的反转录试剂盒和反转定量二合一的试剂盒可供选择，灵活性高
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重组Cas9蛋白质（10 μg/μl）
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	632678	Guide-it™ Recombinant Cas9 (10 μg/μl)	200 μg	￥4,890
Clontech	632679	Guide-it™ Recombinant Cas9 (10 μg/μl)	500 μg	￥9,106

基因敲除               ↗ → → → →               基因敲入                   ↘

Guide-it Recombinant Cas9是一种重组野生型酿脓链球菌Cas9核酸酶，在C-端进行了核定位信号(NLS)修饰，可用于CRISPR/Cas9介导的基因编辑实验。通过电穿孔的方式将Cas9-sgRNA核糖核蛋白复合物导入至哺乳动物细胞，在使脱靶效应最小化的同时，更容易实现高效率的基因编辑实验。

Guide-it Recombinant Cas9 (10 μg/μl)甘油含量为50%，这款Cas9蛋白质溶液已被证实是无菌的，并且无论是和单向导RNA（sgRNA）形成核糖核蛋白复合物（RNP）通过电穿孔的方式导入用于基因敲除实验，还是作为RNP与供体修复模板一起导入用于基因敲入实验，都具有良好的哺乳动物细胞耐受性。

sgRNA制备推荐使用Guide-it sgRNA In VitroTranscription Kit（Code No. 632635）或者Guide-it Complete sgRNA Screening System（Code No. 632636）。

GMP级别的重组Cas9蛋白质Recombinant Cas9 Protein GMP grade（Code No. T230）请点击这里查看。

■ 概览

· 这款Cas9蛋白质溶液是无菌的，且哺乳动物细胞耐受性良好 · 与Guide-it Complete sgRNA Screening System配合使用可实现高效率编辑 · 优于质粒导入系统，脱靶效应更低 · 对难转染细胞系效果好

■ 实验例：

人诱导多能干细胞（hiPSC）CD81基因敲除效果。在本实验中，将Cas9-sgRNA RNP复合物通过电穿孔方式导入至hiPSC-18 和hiPSC-22两种诱导多能干细胞中敲除CD81基因。CD81抗体染色后流式细胞术检测结果显示，电穿孔10天后hiPSC-18的敲除效率为91％，hiPSC-22的敲除效率为85％，显示出非常高的基因编辑效率。

AAVS1和CXCR4基因同源定向修复。Panel A. 这些图表展示了CD34+造血干细胞的HDR实验是如何完成的。将含有Hind III酶切位点的ssDNA模板插入AAVS1基因中，将同时含有Hind III和Bam HI酶切位点的模板插入CXCR4基因中。每侧同源臂长度为90 bp。Panel B. 将修复模板和Cas9/sgRNA RNPs通过电穿孔导入后，用PCR扩增靶细胞中各目标基因，并进行酶切分析。编辑效率显示在凝胶上每个阳性孔上面。CXCR4基因经过BamH I酶切后显示出一条额外条带，原因是基因编辑前野生型基因中已经存在一个BamH I位点了。基因编辑5天后，我们证实98%的造血干细胞CD34+染色阳性。

数据来源于Takara Bio USA, Inc.

Cellartis hiPSC-18细胞系基因敲除。通过剪切后条带的强度可以对编辑细胞所占的百分比进行半定量估计。与其他品牌推荐的制备向导RNA的方法相比，Guide-it Recombinant Cas9与Guide-it In Vitro Transcription Kit制备的sgRNA结合使用，可以为许多靶点提供一致且有效的基因编辑。凝胶底部的每个数字代表所示RNP的基因编辑效率（以百分比表示）。

CD3+ Pan T细胞治疗相关基因的敲除。在本实验中，电穿孔导入Cas9/sgRNA RNPs至 CD3+Pan T细胞进行单基因敲除（B2M或PD-1）或双基因敲除（B2M+PD-1或TRAC+TRBC）。细胞解冻后，在LymphoONE培养基中生长，并用ImmunoCult人CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂激活处理3天。然后按照Guide-it Recombinant Cas9（10 μg/μl）操作指南，将RNP复合物通过电穿孔方式导入至细胞，设置3个平行实验组。对于双基因敲除，单独制备靶向各目标基因的RNP复合物，然后与细胞混合进行电穿孔。电穿孔7天后，使用流式细胞仪检测基因敲除频率。

CD3+ Pan T细胞中B2M基因的敲除。在本实验中，将Cas9/sgRNA RNPs通过电穿孔导入至CD3+ Pan T细胞中，以敲除B2M基因。细胞解冻后，在LymphoONE培养基中生长，并用ImmunoCult人CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂激活处理3天。然后按照Guide-it Recombinant Cas9（10 μg/μl）操作指南，将RNP复合物通过电穿孔导入至细胞，设置3个平行实验组。电穿孔7天后，用流式细胞仪检测基因敲除频率和细胞活力。

Technical Notes

Improved CRISPR/Cas9 genome editing in hard-to-transfect mammalian cells using AAV

Guide-it™ Recombinant Cas9（10 μg/μl）

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基因编辑后突变检测
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	631443	Guide-it Mutation Detection Kit	100 Rxns	￥5,935
Clontech	631448	Guide-it Mutation Detection Kit	25 Rxns	￥2,684

基因敲除               ↗ → → → →               基因敲入                   ↘
Guide-it™突变检测试剂盒可以用于确认由CRISPR/Cas9、锌指核酸酶(ZFNs)、转录激活因子样效应物核酸酶(TALENs)等工程核酸酶所导入的基因突变。本试剂盒采用简单的PCR方法即可简便快速地检测出基因突变。性能卓越的 Terra™ PCR Direct Polymerase Mix可直接以细胞为起始进行扩增，无需提取基因组DNA。扩增产物经过变性及退火处理后形成不完全匹配DNA，Guide-it解离酶会剪切错配DNA部分，之后通过琼脂糖凝胶电泳确认剪切产物。
■ 特点
· 识别哺乳动物细胞中插入或者缺失突变的简便方法 · 可直接以细胞为起始进行PCR扩增，与同类产品相比较更为快速有效 · 完整试剂盒: 包含Guide-it Resolvase、Terra PCR Direct Polymerase和所有缓冲液 · 规格: 可提供100次和25次反应规格，25次反应规格可用于小规模基因编辑实验 · 可用于CRISPR/Cas9、ZFNs、TALENs下游研究突变序列确认
■ 操作流程
■ 实验例
图1. 比较Guide-it和Surveyor方法。转染表达Cas9核酸酶的质粒和特异作用于AAVS1位点的sgRNA至293T细胞，转染48 hr 后收集细胞，将其与未经转染的细胞按照不同比例*进行混合，分别进行突变导入检测。采用Terra PCR Direct Polymerase Mix扩增含有AAVS1位点的目的片段并纯化其产物，之后分别采用Guide-it解离酶和Cel1酶（Surveyor assay）进行剪切。采用Guide-it解离酶剪切后条带清新易于识别，而Surveyor assay剪切后则显示明显的弥散，这样使得不容易测定突变效率并且低水平突变导入很难检测得到。*泳道1-6 : 100％, 80％, 60％, 40％, 20％, 0％（转染细胞的比例）
■ 产品组份
100 次（产品编号 631443） 25 次（产品编号 631448）  Extraction Buffer 1 5 ml × 4    5 ml  Extraction Buffer 2      2 ml 500 μl  Guide-it Resolvase   100 μl  25 μl  Terra PCR Direct Polymerase Mix (1.25 U/μl)   100 μl  25 μl  2 × Terra PCR Direct Buffer (with Mg2+, dNTP) 1 ml × 3 750 μl   PCR-Grade Water 1 ml × 5    1 ml
■ 保存
－20℃
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■ 关联资料
Guide-it™ 突变检测试剂盒宣传页： 点击图片下载

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慢病毒滴度测定 p24 ELISA
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	632200	Lenti-X p24 Rapid Titer Kit	96 Rxns	￥7,268

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p24 ELISA法测定慢病毒滴度

· ELISA法快速简便测定病毒滴度 · 收集上清、裂解、结合、洗涤、测定 · p24衣壳蛋白质含量关联病毒滴度

■ Lenti-X p24 Rapid Titer Kit通过ELISA法检测p24蛋白质快速测定慢病毒滴度。

目前用于研究的重组慢病毒均包含主要的结构蛋白质，包括包膜蛋白质、基质蛋白质、病毒核心蛋白质。Gag基因编码病毒衣壳蛋白质（p24）、核衣壳蛋白质（p6和p7）和基质蛋白质（p17）。Clontech Lenti-X p24 Rapid Titer Kit特异性检测p24衣壳蛋白质，p24蛋白质含量与病毒滴度相关联。

Lenti-X p24 Rapid Titer Kit的操作流程是首先裂解培养基上清液中的慢病毒粒子释放p24蛋白质，然后将裂解样品添加至预包被鼠源p24抗体的检测平板中，洗涤移除未结合的裂解液，采用生物素标记的二抗、辣根过氧化物酶标记链霉亲和素及显色剂检测特异结合的p24蛋白质。本试剂盒包含p24对照用于制定标准曲线。

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慢病毒浓缩
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	631231	Lenti-X Concentrator	100 ml	￥3,064
Clontech	631232	Lenti-X Concentrator	500 ml	￥10,482

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提高100倍病毒滴度，无需超速离心
· 操作简便，只需与慢病毒上清液混合后离心即可 · 无需繁琐的超速离心操作 · 浓缩倍数可高达100倍，回收率可达到90%
Lenti-X浓缩试剂是一款无需超速离心，可简单、快速且高效地浓缩慢病毒上清液的试剂。其操作流程非常简单，只需要将慢病毒上清液与Lenti-X浓缩试剂相混合，孵育一段时间后，采用标准离心机进行离心，离心后去除上清，以1/10 - 1/100原体积液体重悬沉淀。通过以上操作可将病毒滴度最高提高约100倍。Lenti-X浓缩试剂可用于浓缩包含Clontech Lenti-X慢病毒系统制备的慢病毒在内的大多数慢病毒上清液，浓缩规模可按照需求扩大或者缩小。
■ Lenti-XTM Concentrator操作流程
■ Lenti-X Concentrator与超速离心方法比较
特征 Lenti-X Concentrator 超速离心 易于扩展 是 否 特殊仪器 不需要 需要超速离心机 所需时间 ~1 hr 4 hr至过夜 易用性 ＋＋＋＋ ＋ 回收率 >90% >90%
■ 简便的慢病毒浓缩方法（操作方法请观看视频）
■ 关联资料
Lenti-X Concentrator资料： 点击图片下载
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Capturem™ Pepsin
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	635728	Capturem™ Pepsin	20 Rxns	￥3,298

■ 产品简介

蛋白质质谱分析前的样品消化步骤，通常需要4个小时甚至过夜，如果使用Capturem™ Trypsin 或 Capturem™ Pepsin，可在室温下快速，高效和完全的消化蛋白质，从而使蛋白质组学分析流程更加连贯。这两款产品是一次性小型离心柱的形式，应用新型膜技术，膜上固定有胰蛋白酶（Trypsin）或胃蛋白酶（Pepsin），在短短几分钟内即可高效、完全地酶解蛋白质样品，与传统的溶液法过夜处理相比，时间更短、效率更高、重复性更好、胰蛋白酶自溶片段更少，避免发生过度消化。

■ 快速、简单的操作流程

Capturem™ Trypsin 和 Capturem™ Pepsin包含小型离心柱和活化buffer，操作流程简单、快速，只需要加入200 μl活化buffer离心1 min，然后加入蛋白质样品再离心1 min，即可洗脱获得可用于下游分析的肽段。

■ 产品特点

·操作快速，2 min-3 min内即可酶解蛋白质样品，无需过夜处理 ·比溶液法效率更高，酶解更彻底 ·样品中自溶片段更少，蛋白质非特异性修饰几率更低 ·可以使整个蛋白质组学分析流程更加连贯，实现更有效的肽和蛋白质的质谱鉴定

■ 应用

·蛋白质鉴定 ·蛋白质组学分析 ·质谱样品制备 ·抗体鉴定

■ 实验例

使用Capturem™ Trypsin对BT474全细胞裂解液进行酶解消化并做蛋白质组学分析。通过RP-HPLC将裂解液分成19个独立的组分（图A），然后再使用Capturem™ Trypsin对每个组分单独酶解，并使用LC/MS-MS分析，每个组分中带有2个或以上的特异性肽段的蛋白质总数被鉴定并绘制出，如B图所示。

使用Capturem™ Trypsin可以实现快速完全的Apomyoglobin（Apo）酶解。上图为使用RP-HPLC分析Capturem™ Trypsin和常规溶液法酶解蛋白质的结果，图A为未酶解的完整蛋白质，图B为溶液法室温酶解16 h的蛋白质，图C为使用Capturem™ Trypsin酶解1 min的蛋白质，结果显示使用Capturem™ Trypsin酶解的非常彻底。

使用Capturem™ Trypsin可以酶解紧密折叠的蛋白质Myoglobin (Myo)。使用RP-HPLC对Capturem™ Trypsin和常规溶液法酶解的产物进行分析，图A为未酶解的完整蛋白质，图B为溶液法室温酶解16 h的蛋白质，图C为使用Capturem™ Trypsin酶解1 min的蛋白质，结果显示使用Capturem™ Trypsin可以快速有效地酶解紧密折叠的蛋白质。

Capturem™ Pepsin的操作流程。在酶消化之前，抗体样品被变性和还原。使用附带的活化buffer初次活化柱子后，将还原处理后的抗体样品溶液（50-800 μl）加入离心柱中，离心1分钟。 在这个过程中，柱上发生胃蛋白酶消化，随后再一次离心洗脱即可获得肽片段，加入NaOH中和洗脱的肽片段，即可用于下游分析。

使用Capturem™ Pepsin消化不同的小鼠抗体同种型。小鼠的IgG1, IgG2a, IgG2b, 和 IgG3各取 100 μg，使用TCEP和醋酸于75℃处理15 min进行变性操作，然后用5%甲酸buffer稀释。使用Capturem™ Pepsin对稀释的样品进行消化，通过SDS-PAGE对消化和未消化的样品（各取4 μg）进行检测，如上图所示。

不同批次的Capturem™ Pepsin消化产物HPLC图谱比较。使用5%的甲酸稀释50 μg的Apo，选择3个不同批次的Capturem™ Pepsin对其进行消化，HPLC结果显示三组消化产物具有相同的片段，说明Capturem™ Pepsin具有良好的重复性。

Capturem™ Pepsin与pepsin溶液法消化结果比较。对50 μg 的anti-HER2单克隆抗体使用3种方法进行消化，分别是Capturem™ Pepsin，pepsin溶液法孵育4小时，pepsin溶液法孵育过夜。然后进行质谱分析。由上图可以看出，使用溶液法的消化产物峰左移并且总体峰的数量较多，说明产生了过度消化，而使用Capturem™ Pepsin则没有这个问题。

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