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Takara 9753Q RNAiso for Small RNA 25 ml酶试剂盒

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RNAiso for Small RNA
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9753Q RNAiso for Small RNA 25 ml ￥261 Takara 9753Q RNAiso for Small RNA 25 ml Takara 9753Q RNAiso for Small RNA 25 ml Takara 9753Q RNAiso for Small RNA 25 ml
Takara 9753A RNAiso for Small RNA 100 ml ￥801 Takara 9753Q RNAiso for Small RNA 25 ml Takara 9753Q RNAiso for Small RNA 25 ml Takara 9753Q RNAiso for Small RNA 25 ml
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■ 制品内容 (Code No.: 9753A)Takara 9753Q RNAiso for Small RNA 25 ml
RNAiso for Small RNA* 100 ml
* 含有强变性剂，应避免与皮肤、衣物等接触。若不小心接触到眼睛或皮肤时，请立即到医院进行处理。
 
■ 制品说明
RNAiso for Small RNA是广谱型Small RNA提取试剂。实验操作快速方便，颜色鲜明，便于分层。
本制品可以从动物组织、植物材料、各种微生物、培养细胞等中直接提取Small RNA (20-200 nt)：包括tRNA、5S rRNA、5.8S rRNA、microRNA (miRNA) 和 siRNA。样品在RNAiso for Small RNA中能够被充分裂解，在加入氯仿离心后，溶液会形成上清层、中间层和有机层(下层)，只有Small RNA分布在上清层中，收集上清层后，经异丙醇沉淀便可以回收得到 Small RNA。
RNAiso for Small RNA具有以下特性：
1. 广谱性强。可以从动物组织、植物材料、各种微生物、培养细胞等中提取Small RNA。
2. 纯度佳。经本制品提取的Small RNA纯度高，基本可以除去28S和18S大片段RNA、蛋白质及基因组DNA。提取的Small RNA适用于Northern blot analysis、Quantitative、Real Time RT-PCR、Microarray analysis等分子生物学实验。
3. 快速简便。实验操作快速方便，整个操作在一小时内便可完成。
4. 颜色鲜明。加入氯仿离心后，会形成无色的上清层和鲜红色的下层 (有机层)。
 
■ 保存
1. 可以在室温下保存，建议在2-8℃下避光保存，效果更佳。
2. 可以在常温下运输。
 
■ Small RNA提取操作流程简图
Takara 9753Q RNAiso for Small RNA 25 ml
 
 

Takara RR065 Small RNA Cloning Kit 10 Rxns酶试剂盒

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Small RNA Cloning Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara RR065 Small RNA Cloning Kit 10 Rxns ￥3,655 Takara RR065 Small RNA Cloning Kit 10 Rxns Takara RR065 Small RNA Cloning Kit 10 Rxns Takara RR065 Small RNA Cloning Kit 10 Rxns
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Takara RR065 Small RNA Cloning Kit 10 Rxns  
 
 
■ 制品内容 (10 次量)
□ Package1 (-20℃保存)  
RNase Inhibitor (40 U/μl) 50 μl
10X BAP Buffer 200 μl
Alkaline Phosphatase (BAP) (0.4 U/μl) 20 μl
0.1%BSA 60 μl
3’Adaptor*1*2 10 μl
T4 RNA Ligation Buffer 600 μl
T4 RNA Ligase (40 U/μl) 20 μl
5X T4 PNK Buffer 100 μl
T4 Polynucleotide Kinase (T4 PNK) (10 U/μl) 10 μl
5’Adaptor*1 10 μl
5X RT Buffer 40 μl
dNTP Mixture (2.5 mM each) 90 μl
PCR-R & RT-Primer (50 pmol/μl)*1*3 20 μl
RTase (RNaseH free) (200 U/μl) 10 μl
2X PCR Buffer 250 μl
PCR Primer F (50 pmol/μl)*1 10 μl
TaKaRa Ex Taq HS (5 U/μl) 10 μl
Control RNA (5 pmol/μl)*4 10 μl
□ Package2 (4℃保存)  
3M Sodium Acetate (pH 5.2) 200 μl
Dr.GenTLE Precipitation Carrier*5 80 μl
2X B/W Buffer 2.7 ml
Magnosphere™ MS300/Streptavidin 100 μl
RNase free dH2O 10 ml
 
*1 3’Adaptor、5’Adaptor、PCR Primer F及PCR-R、RT-Primer上都带有Sse8387Ⅰ酶切位点，使用Sse8387Ⅰ酶切后的PCR产物可以与Pst I酶切的载体进行连接克隆。本试剂盒中不备有限制酶和克隆用载体，请另外准备。
*2 3’Adaptor已用生物素标记。
*3 PCR用的Reverse Primer，也可以作为反转录引物使用。
*4 Control RNA是一条21mer、5’端磷酸化的RNA。
*5 Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094)。
 
 
■ 制品说明
近几年的研究表明，在细胞内发现的RNA中有许多是非编码RNA，它们有着重要的功能，这些RNA被称为功能性RNA，其中倍受关注的是18-26 个碱基的低分子RNA，这些低分子RNA的功能有：
① mRNA水平抑制基因表达。
② 翻译水平抑制基因表达。
克隆是分析小RNA的有效方法之一。由于小RNA与mRNA不同，它不具有PolyA tail，因此，在克隆时，需在小RNA的5’端和3’端分别加上RNA接头或者RNA/DNA杂合形式的接头，经RT-PCR后进行PCR。
本试剂盒主要用于cDNA的合成和小RNA的克隆。
试剂盒通过简单的磁珠吸附操作即可纯化小RNA反转录得到的cDNA，省去了在接头连接之后切胶回收等复杂操作步骤。扩增得到的cDNA可以直接用于TA克隆，或者利用接头中带有的酶切位点进行克隆。
使用本试剂盒对小RNA (Small RNA) 进行克隆时的操作流程见图1。起始的Small RNA是由总RNA 经过电泳及切胶回收得到的。详细步骤如下：
1. 将Small RNA进行BAP处理，5’端去磷酸化。
2. 将带有生物素标记的RNA/DNA杂合形式的接头与BAP处理后的Small RNA的3’端进行连接。
3. 用标记Streptoavidin的磁珠，回收带有生物素标记接头的Small RNA，然后进行5’端磷酸化反应。
4. 将5’端连接上RNA/DNA嵌合的接头后，使用RT Primer和反转录酶进行反转录反应。
5. 从磁珠上回收合成的cDNA后，进行PCR反应。
6. PCR片段克隆。
 
■ 各种引物及Control RNA的碱基序列
名 称 切 点 酶 例
PCR-R & RT-Primer
    5’-GTCTCTAG CCTGCAGG ATCGATG-3’
反转录反应及PCR反应的Reverse引物，含有Sse8387Ⅰ的识别序列 (阴影部分)。
PCR-Primer F
5’-AAAGAT CCTGCAGG TGCGTCA-3’
PCR反应的Forward引物，含有Sse8387Ⅰ的识别序列 (阴影部分)。
Control RNA     5’p-AGAUGACGGCAACUACAAGAC-3’ 用于Control反应。
    
■ small RNA克隆流程图
Takara RR065 Small RNA Cloning Kit 10 Rxns
 
 

NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 1 货 号 #E7300L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 用于二代测序的 NEBNext® 试剂 – 适用于 Illumina 测序平台/Small RNA

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#E7300L
96 次反应
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NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 2

NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 (检索引物 1-48)
NEBNext Small RNA 单样本文库制备试剂盒（与多样本兼容）

概述

Small RNA 建库流程经过创新性优化，在保证制备高产量和多样性的文库的同时，能够最大限度的减少
接头二聚体的形成。接头和引物都包含在试剂盒中，并且可以实现多样本的建库。多样本建库试剂盒
包含检索引物，且兼容自备检索引物。
 
除了每种组份都经过严格的质量监控以外，NEBNext Small RNA 试剂盒还都经过构建 Small RNA 文库，再在 Illumina 测序平台测序进行验证。NEBNext 试剂盒里面，各个组份的批号也都被保留下来。大多数的组份都以预混液的形式提供，从而减少了试剂盒里面的管数，也减少了移液操作的步骤。
 
NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 1 货 号 #E7300L

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NEBNext Small RNA 单样本文库制备试剂盒（与多样本兼容） 货 号 #E7330L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#E7330L
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NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 1

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概述

Small RNA 建库流程经过创新性优化，在保证制备高产量和多样性的文库的同时，能够最大限度的减少
接头二聚体的形成。接头和引物都包含在试剂盒中，并且可以实现多样本的建库。多样本建库试剂盒
包含检索引物，且兼容自备检索引物。
 
除了每种组份都经过严格的质量监控以外，NEBNext Small RNA 试剂盒还都经过构建 Small RNA 文库，再在 Illumina 测序平台测序进行验证。NEBNext 试剂盒里面，各个组份的批号也都被保留下来。大多数的组份都以预混液的形式提供，从而减少了试剂盒里面的管数，也减少了移液操作的步骤。
 
NEBNext Small RNA 单样本文库制备试剂盒（与多样本兼容） 货 号 #E7330L
 

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多样本文库制备试剂盒 1
#E7300S 24 次反应 . . ￥17,649
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多样本文库制备试剂盒 2
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#E7330L 96 次反应 . . ￥48,969

概述

试剂盒中不提供的试剂及材料 :

3 M 乙酸钠, pH 5.5
100% 乙醇
80%乙醇
Corning®, Costar®, Spin-X® Centrifuge Tube Filters (Cellulose Acetate Filters) (Sigma Aldrich #CLS8162)
  
NEBNext® Small RNA 多样本文库制备试剂盒 – Illumina® (检索引物 1-48) 中包含接头，引物，酶及缓冲液，可将 small RNAs 转化为可用于 Illumina 测序平台的包含 index 序列的二代测序文库。新颖的工作流程经过优化，能够最大程度上减少接头二聚体的形成，所制备的文库产量高，多样性好。
每个建库试剂盒的组分必须通过严格的质控标准，每组试剂都通过构建含 index 的 small RNA 文库并在 Illumina 平台测序进行功能验证。
NEBNext® Small RNA 多样本文库制备试剂盒 – Illumina® (检索引物1-48)

 

性能及使用

片段筛选所需试剂及材料:
 
通过切胶进行片段筛选：
6% Novex® TBE PAGE gel 1.0 mM
10-well (Life Technologies, Inc. #EC6265BOX)
SYBR® Gold Nucleic Acid Gel Stain (Life Technologies, Inc. #S-11494)
RNase-free Disposable Pellet Pestles® (Kimble Kontes Asset Management, Inc. #749521-1590)
干冰/甲醇冰浴或 –80°C 冰箱
 
通过磁珠进行片段筛选：
Agencourt® AMPure® XP Beads (Beckman Coulter, Inc. #A63881)
通过 Pippin Prep™进行片段筛选：
3% Agarose Dye Free Gel (Sage Science #CDF 3010)
QIAquick® PCR Purification Kit (Qiagen® #28104)
Bioanalyzer® (Agilent® Technologies, Inc

NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 2 货 号 #E7580L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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接头二聚体的形成。接头和引物都包含在试剂盒中，并且可以实现多样本的建库。多样本建库试剂盒
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除了每种组份都经过严格的质量监控以外，NEBNext Small RNA 试剂盒还都经过构建 Small RNA 文库，再在 Illumina 测序平台测序进行验证。NEBNext 试剂盒里面，各个组份的批号也都被保留下来。大多数的组份都以预混液的形式提供，从而减少了试剂盒里面的管数，也减少了移液操作的步骤。
 
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本制品可以从动物组织、植物材料、各种微生物、培养细胞等中直接提取Small RNA (20-200 nt)：包括tRNA、5S rRNA、5.8S rRNA、microRNA (miRNA) 和 siRNA。样品在RNAiso for Small RNA中能够被充分裂解，在加入氯仿离心后，溶液会形成上清层、中间层和有机层(下层)，只有Small RNA分布在上清层中，收集上清层后，经异丙醇沉淀便可以回收得到 Small RNA。
RNAiso for Small RNA具有以下特性：
1. 广谱性强。可以从动物组织、植物材料、各种微生物、培养细胞等中提取Small RNA。
2. 纯度佳。经本制品提取的Small RNA纯度高，基本可以除去28S和18S大片段RNA、蛋白质及基因组DNA。提取的Small RNA适用于Northern blot analysis、Quantitative、Real Time RT-PCR、Microarray analysis等分子生物学实验。
3. 快速简便。实验操作快速方便，整个操作在一小时内便可完成。
4. 颜色鲜明。加入氯仿离心后，会形成无色的上清层和鲜红色的下层 (有机层)。
 
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