Amplite 比色法L-丙氨酸检测试剂盒 货号13826-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 比色法L-丙氨酸检测试剂盒

Amplite 比色法L-丙氨酸检测试剂盒

Amplite 比色法L-丙氨酸检测试剂盒    货号13826 货号 13826 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 3924
Ex (nm) 575 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法L-丙氨酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测丙氨酸的试剂盒,L-丙氨酸(L-Ala)作为重要蛋白质的构建块起着至关重要的作用。 L-丙氨酸主要由来自乳酸的肌肉细胞合成并通过肝脏吸收到血液中。 它被谷氨酸丙酮酸转氨酶转化为丙酮酸,进入代谢主流。 L-Ala对葡萄糖的产生和血糖管理至关重要,并且对免疫系统和肾结石的预防起着重要作用。 L-丙氨酸缺乏通常表示营养不良,低蛋白饮食和压力。 AAT Bioquest的Amplite 比色法L-丙氨酸测定试剂盒提供了一种灵敏的比色测定方法,用于量化生物样品中的L-丙氨酸。 它利用释放过氧化氢的酶偶联反应,可在575 nm的吸光度酶标仪上通过Quest Fluor L-丙氨酸传感器检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 比色法L-丙氨酸检测试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 575nm
推荐孔板: 透明底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备L-丙氨酸工作溶液(50 µL)
2.添加L-丙氨酸标准品或测试样品(50 µL)
3.在37°C下孵育30分钟至1小时
4.检测575 nm处的吸光度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Quest Fluor L-丙氨酸探针储备溶液(200X):
将55 µL DMSO(组分E)添加到Quest Fluor L-丙氨酸探针(组分A)中,制成200X Quest Fluor L-丙氨酸探针储备溶液。

1.2 L-丙氨酸标准溶液(1 mM):
将10 µL 100 mM L-丙氨酸标准溶液(组分D)加到990 µL PBS(pH 7.0)中,得到1 mM L-丙氨酸标准溶液。

 

2.标准溶液

L-丙氨酸标准
向900 µL PBS中加入100 µL 1 mM L-丙氨酸标准溶液,制成100 µM L-丙氨酸标准溶液(AS7)。取100 µM L-丙氨酸标准溶液(AS7),并在PBS中进行1:2连续稀释,以得到连续稀释的L-丙氨酸标准溶液(AS6-AS1)。

 

3.工作溶液

3.1 将5 mL测定缓冲液(组分C)添加到一个Enzyme Mix1瓶(组分B1)中,并充分混合。

3.2 将100μLddH2O加入一个Enzyme Mix2小瓶(组分B2)中并充分混合。

3.3 将整个小瓶(100μL)的Enzyme Mix2和25 uL的200X L-丙氨酸探针储备溶液转移到Enzyme Mix1瓶中,并充分混合以制成L-丙氨酸工作溶液。 注意:L-丙氨酸工作溶液不稳定-请立即使用,并避免直接暴露在光线下。

 

样品操作及实验分析

表1.白色透明96孔微孔板中L-丙氨酸标准品和测试样品的布局。 AS = L-丙氨酸标准品(AS1-AS7,1.563至100 µM),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
AS1 AS1
AS2 AS2
AS3 AS3    
AS4 AS4    
AS5 AS5    
AS6 AS6    
AS7 AS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释液(1.563至100 µM)
BL 50ul PBS
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和表2提供的布局,准备L-丙氨酸标准品(AS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.将50 µL L-丙氨酸工作溶液添加到L-Alanine标准品,空白对照和测试样品的每个孔中,以使L-Alanine测定的总体积为100 µL /孔。 对于384孔板,将25 µL L-丙氨酸工作溶液添加到每个孔中,总体积为50 µL /孔。 注意:在pH 6.5至7.0下运行L-丙氨酸测定。

3.将反应液在37°C孵育30分钟至1小时。

4.使用酶标仪在575 nm处监测吸光度的增加。

 

参考文献

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说明书
Amplite 比色法L-丙氨酸检测试剂盒.pdf