Amplite 比色法醛类定量试剂盒 蓝色

	货号	10053	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	620	Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法醛类定量试剂盒 蓝色是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。近年来对细胞膜脂类过氧化成醛的成因，活性以及毒性研究受到广泛的关注。快速精确地检测醛类在生物学研究、食品工业、化学研究和环境污染监督中都是一项非常重要的任务。有许多试剂和试剂盒都可以用来定量分析总醛含量。现存的醛类检测法大都基于分离法，如HPLC-MS 或者GC-MS，这种方案成本昂贵、操作繁杂，不适合高通量及经济型的检测要求。Amplite比色法醛类定量检测试剂盒 *蓝色* 利用独有的荧光染料与醛反应产生高亮的蓝色荧光产物。该比色试剂盒提供灵敏的即用即读模式，能检测到低至0-4uM的醛类。试剂盒可以用于96或384微孔板分析，并且无需任何分步骤，就可以轻易地实现自动化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法醛类定量试剂盒 蓝色。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备醛标准品和/或测试样品（50μL）
2.添加2X AldeView 蓝色工作溶液（50μL）
3.在室温下孵育20分钟
4.添加AldeView 蓝色增强剂（50μL）
5.在室温下孵育20分钟
6.监测620nm处的吸光度增加

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C,避免反复冻融循环。
1.1醛标准溶液（10 mM）：
将1mL测定缓冲液（组分B）加入到醛标准品（组分D）的小瓶中以制备10mM醛标准溶液。

2.标准溶液

2.1醛标准溶液

取10mM醛标准溶液，在测定缓冲液（组分B）中以1：100的比例制备100μM醛标准溶液（AS7）。 取100μM醛标准溶液（AS7）并进行1：2连续稀释，得到连续稀释的醛标准品（AS6-AS1）和分析缓冲液（组分B）。

3.工作溶液

将5 mL测定缓冲液（组分B）加入一瓶AldeView Blue（组分A）中，制成2X AldeView Blue工作溶液。 注意：对于一个板，5 mL 2X AldeView Blue工作溶液就足够了。 2X AldeView 蓝色工作溶液不稳定，最好在2小时内使用。

样品分析

表1.在具有透明底部的白色96孔微孔板中的醛标准品和测试样品的布局。 AS =醛标准品（AS1-AS7,1.56至100μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和2中提供的布局制备醛标准品（AS），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用12.5μL试剂代替50μL。

2.在醛标准品，空白对照品和测试样品的每个孔中加入50μLAldeView Blue工作溶液，使总醛测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入12.5μLAldeView Blue工作溶液，总体积为25μL/孔。

3.在室温下孵育反应20-30分钟，避光。

4.每孔加入50μLAldeView Blue Enhancer（组分C）。 对于384孔板，每孔加入25μLAldeView Blue Enhancer。

5.在室温下孵育反应20分钟，避光。

6.使用吸光度读板仪在620至660 nm（最大620 nm）下监测吸光度的增加。

参考文献

Aldehyde-mediated protein degradation is responsible for the inhibition of nucleotide excision repair by cigarette sidestream smoke
Authors: Guang Yang, Yukako Komaki, Yuko Ibuki
Journal: Mutation Research/Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis (2018)

Biological Activity of Peptide-conjugated Polyion Complex Matrices Consisting of Alginate and Chitosan
Authors: Chikara Fujimori, Jun Kumai, Kyotaro Nakamura, Yingzi Gu, Fumihiko Katagiri, Kentaro Hozumi, Yamato Kikkawa, Motoyoshi Nomizu
Journal: Peptide Science (2016)

Hepatic Deficiency of Augmenter of Liver Regeneration Exacerbates Alcohol-Induced Liver Injury and Promotes Fibrosis in Mice
Authors: Sudhir Kumar, Jiang Wang, Richa Rani, Chandrashekhar R Gandhi
Journal: PloS one (2016): e0147864

Integrated self-assembling drug delivery system possessing dual responsive and active targeting for orthotopic ovarian cancer theranostics
Authors: Chun-Jui Lin, Chen-Hsiang Kuan, Li-Wen Wang, Hsi-Chin Wu, Yunching Chen, Chien-Wen Chang, Rih-Yang Huang, Tzu-Wei Wang
Journal: Biomaterials (2016): 12–26

Fiber-optic protease sensor based on the degradation of thin gelatin films
Authors: Bastien Schyrr, Stéphanie Boder-Pasche, Réal Ischer, Rita Smajda, Guy Voirin
Journal: Sensing and Bio-Sensing Research (2015): 65–73

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Amplite 比色法Caspase 3/7活性检测试剂盒 黄色荧光

	货号	13507	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	2604
	Ex (nm)	500	Em (nm)	522
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法Caspase 3/7活性检测试剂盒 黄色荧光是AAT Bioquest研发的用于检测半胱天冬酶活性的试剂盒。半胱天冬酶在细胞凋亡和细胞信号传导中起重要作用。胱天蛋白酶-3（CPP32 / apopain）的激活对于细胞凋亡的起始是重要的。 Caspase 3也被确定为药物筛选目标。胱天蛋白酶3对肽序列Asp-Glu-Val-Asp（DEVD）具有底物选择性。该Amplite™Caspase-3检测试剂盒使用（Z-DEVD）2R110作为荧光指示剂来测定caspase-3活性。半胱天冬酶对R110肽的切割产生强荧光的R110，可在510-530 nm荧光检测，激发488 nm荧光仪器中最常用的激发光源。R110衍生的半胱天冬酶底物可能是用于荧光检测各种半胱天冬酶活性的最敏感指标。Amplite 荧光法Caspase 3/7活性检测试剂盒 黄色荧光可以用于荧光酶标仪或荧光计连续测量细胞提取物和纯化酶制剂中半胱天冬酶-3的活性。它还可以与流式细胞术一起用于分析细胞凋亡和半胱天冬酶3和7的活性。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的Caspase 检测试剂/试剂盒。

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产品说明书

操作方法

1.用10μL10X测试化合物（对于96孔板）或5μL5X测试化合物（对于384孔板）处理细胞到PBS或所需缓冲液中。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相应量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在培养箱中孵育所需的一段时间以诱导细胞凋亡。

注意：我们用星形孢菌素（SS）在37℃处理Jurkat细胞4小时以诱导细胞凋亡，详细信息请参见图1。

3.加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Caspase 3/7工作溶液。

4.将板在室温下孵育至少1小时，避光。

5.在制动器关闭的情况下以800rpm离心细胞板2分钟。

6.用OD = 490nm的吸光度板读数器监测吸光度的增加。

数据分析

图1.检测Jurkat细胞中caspase 3/7活性。将细胞用浓度为0-1μM的星形孢菌素（SS）在37℃下处理4小时。处理后，将细胞与半胱天冬酶3/7测定溶液一起温育2小时。使用SpectraMax读数器（Molecular Devices）在490nm处测量吸光度。

参考文献

High STMN1 level is associated with chemo-resistance and poor prognosis in gastric cancer patients
Authors: Tuya Bai, Takehiko Yokobori, Bolag Altan, Munenori Ide, Erito Mochiki, Mitsuhiro Yanai, Akiharu Kimura, Norimichi Kogure, Toru Yanoma, Masaki Suzuki
Journal: British Journal of Cancer (2017)

The trivalent cerium-induced cell death and alteration of ion flux in sweetpotato [Ipomoea batatas (L.) Lam]
Authors: Jiaojiao Jiang, Jianzhong Hu, Zeyi Xie, Qinghe Cao, Daifu Ma, Yonghua Han, Zongyun Li
Journal: Journal of Rare Earths (2017)

Uncarboxylated Osteocalcin Induces Antitumor Immunity against Mouse Melanoma Cell Growth
Authors: Yoshikazu Hayashi, Tomoyo Kawakubo-Yasukochi, Akiko Mizokami, Mai Hazekawa, Tomiko Yakura, Munekazu Naito, Hiroshi Takeuchi, Seiji Nakamura, Masato Hirata
Journal: Journal of Cancer (2017): 2478–2486

Docetaxel induces Bcl-2-and pro-apoptotic caspase-independent death of human prostate cancer DU145 cells
Authors: Takeharu Ogura, Yoshiyuki Tanaka, Hiroki Tamaki, Mamoru Harada
Journal: International journal of oncology (2016): 2330–2338

NT1014, a novel biguanide, inhibits ovarian cancer growth in vitro and in vivo
Authors: Lu Zhang, Jianjun Han, Amanda L Jackson, Leslie N Clark, Joshua Kilgore, Hui Guo, Nick Livingston, Kenneth Batchelor, Yajie Yin, Timothy P Gilliam
Journal: Journal of Hematology & Oncology (2016): 91

Identification of an allosteric small-molecule inhibitor selective for the inducible form of heat shock protein 70
Authors: Matthew K Howe, Khaldon Bodoor, David A Carlson, Philip F Hughes, Yazan Alwarawrah, David R Loiselle, Alex M Jaeger, David B Darr, Jamie L Jordan, Lucas M Hunter
Journal: Chemistry & biology (2014): 1648–1659

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Amplite 比色法D-乳酸检测试剂盒

	货号	13811	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	575	Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法D-乳酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测乳酸的试剂盒，乳酸是手性的并且具有两种光学异构体：L-乳酸和D-乳酸。 在代谢和运动过程中，乳酸盐通过乳酸脱氢酶（LDH）不断从丙酮酸产生。 监测乳酸水平是评估组织需氧量和利用率之间平衡的好方法，在研究细胞和动物生理学时非常有用。 D-乳酸不被哺乳动物代谢，其从体内消除主要取决于肾脏排泄。 D-和L-乳酸存在于许多发酵乳制品中，例如酸奶和奶酪，以及腌制蔬菜，腌制肉类和鱼类。 D-和L-乳酸含量是食品的质量指标，如鸡蛋，牛奶，果汁和葡萄酒。 血液中异常高浓度的D-乳酸通常是胃肠道中细菌过度生长的反映。

AAT Bioquest的Amplite 乳酸盐检测试剂盒（L＃乳酸检测Cat＃13814和13815，D-lactate检测Cat＃13810和13811）提供荧光和吸光度检测方法，用于检测L-乳酸盐或D-乳酸盐。 生物样品，如血清，血浆，尿液，以及细胞培养样品。 在酶偶联测定中，乳酸与NADH成比例相关，其通过生色NADH传感器特异性监测。 通过吸光度酶标仪在~575nm或~A605nm的吸光度比下可以容易地读取信号，以提高测定灵敏度。 使用这种Amplite 比色法D-乳酸检测试剂盒，我们能够在100μL反应体积中检测到低至4μM的D-乳酸。 它应用广泛，可以很容易地适用于需要测量D-乳酸的各种应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法D-乳酸检测试剂盒。 

产品说明书

96孔板测定示例

概述

制备D-乳酸测定混合物（50μL）

加入D-乳酸标准品或测试样品（50μL）

在室温下孵育30分钟~2小时

监测吸光度比率在A575nm / A605nm处增加

注意：在开始实验之前，在室温下解冻每个试剂盒组分的一个小瓶。

操作方法

1.准备NAD储备溶液（100X）：

向NAD小瓶（组分C）中加入100μLH2O，制成100X NAD储备溶液。

2.准备D-乳酸储备液：

将200μLH2 O或1×PBS缓冲液加入到D-乳酸盐标准品（组分D）的小瓶中以制备100mM D-乳酸盐标准溶液。

注意：未使用的D-lacate标准储备溶液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

3.准备D-乳酸标准品（0至1 mM）的连续稀释液：

3.1将10μLD-乳酸储备溶液（来自步骤2）加入990L 1x PBS缓冲液中以产生1mM D-乳酸盐标准溶液。

注意：稀释的D-乳酸标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

3.2取200μL的1mM D-乳酸标准溶液进行1：3连续稀释，得到300,100,30,10,3,1和0μM的D-乳酸标准品系列稀释液。

3.3如说明书中的表1和2中所述，将含有D-乳酸盐标准品和含D-乳酸盐的测试样品的系列稀释液加入白色透明底96孔微量培养板中。

4.准备D-乳酸测定混合物：

4.1将5 mL测定缓冲液（组分B）加入一瓶酶混合物（组分A）中。

4.2将50μLNAD储备液（100X，来自步骤1）加入组分A（来自步骤4.1）的瓶中，并且混合均匀。

注意：这种D-乳酸测定混合物足以用于一个96孔板。 未使用的D-乳酸测定混合物应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

5.运行D-乳酸测定：

5.1将50μLD-乳酸测定混合物（来自步骤4.2）添加到D-乳酸标准品，空白对照和测试样品（参见步骤3.3）的每个孔中，以使总D-乳酸测定体积为100μL/孔。

注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μLD-乳酸测定混合物。

5.2在室温下孵育反应30分钟至2小时，避光。

5.3用A575nm / A605nm的吸光度读板仪检测吸光度比率的增加。

参考文献

Dendrobium huoshanense polysaccharide regionally regulates intestinal mucosal barriers function and intestinal microbiota in mice
Authors: Song-Zi Xie, Bing Liu, Hui-Yu Ye, Qiang-Ming Li, Li-Hua Pan, Xue-Qiang Zha, Jian Liu, Jun Duan, Jian-Ping Luo
Journal: Carbohydrate Polymers (2018)

Exploring the Probiotic and Compound Feed Fermentative Applications of Lactobacillus plantarum SK1305 Isolated from Korean Green Chili Pickled Pepper
Authors: Kai-Min Niu, Damini Kothari, Sang-Buem Cho, Sung-Gu Han, In-Geun Song, Sam-Churl Kim, Soo-Ki Kim
Journal: Probiotics and Antimicrobial Proteins (2018): 1–12

Arenobufagin inhibits prostate cancer epithelial-mesenchymal transition and metastasis by down-regulating β-catenin
Authors: Liping Chen, Weiqian Mai, Minfeng Chen, Jianyang Hu, Zhenjian Zhuo, Xueping Lei, Lijuan Deng, Junshan Liu, Nan Yao, Maohua Huang
Journal: Pharmacological Research (2017)

Fibroblast Activation Protein Alpha-Activated Tripeptide Bufadienolide Anti-tumor Prodrug with Reduced Cardiotoxicity
Authors: Li-Juan Deng, Long-Hai Wang, Cheng-Kang Peng, Yi-Bin Li, Mao-Hua Huang, Min-Feng Chen, Xue-Ping Lei, Ming Qi, Yun Cen, Wen-Cai Ye
Journal: Journal of Medicinal Chemistry (2017)

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Journal: Frontiers in Molecular Neuroscience (2017): 305

The use of KnockOut serum replacement (KSR) in three dimentional rat testicular cells co-culture model: An improved male reproductive toxicity testing system
Authors: Xiaofang Zhang, Lei Wang, Xiaodong Zhang, Lijun Ren, Wenjing Shi, Yijun Tian, Jiangbo Zhu, Tianbao Zhang
Journal: Food and Chemical Toxicology (2017)

High glucose and interleukin 1β-induced apoptosis in human umbilical vein endothelial cells involves in down-regulation of monocarboxylate transporter 4
Authors: Dong Wang, Qingjie Wang, Gaoliang Yan, Yong Qiao, Ling Sun, Boqian Zhu, Chengchun Tang, Yuchun Gu
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2015): 607–614

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Authors: Johji Nomura, Alexander So, Mizuho Tamura, Nathalie Busso
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	货号	13815	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
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	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法L-乳酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测乳酸的试剂盒，乳酸是手性的并且具有两种光学异构体：L-乳酸和D-乳酸。在代谢和运动过程中，乳酸盐通过乳酸脱氢酶（LDH）不断从丙酮酸产生。 监测乳酸水平是评估组织需氧量和利用率之间平衡的好方法，在研究细胞和动物生理学时非常有用。D-乳酸不被哺乳动物代谢，其从体内消除主要取决于肾脏排泄。D-和L-乳酸存在于许多发酵乳制品中，例如酸奶和奶酪，以及腌制蔬菜，腌制肉类和鱼类。D-和L-乳酸含量是食品的质量指标，如鸡蛋，牛奶，果汁和葡萄酒。血液中异常高浓度的D-乳酸通常是胃肠道中细菌过度生长的反映。

AAT Bioquest的Amplite 乳酸盐检测试剂盒（L＃乳酸检测Cat＃13814和13815，D-lactate检测Cat＃13810和13811）提供荧光和吸光度检测方法，用于检测L-乳酸盐或D-乳酸盐。生物样品，如血清，血浆，尿液，以及细胞培养样品。在酶偶联测定中，乳酸与NADH成比例相关，其通过生色NADH传感器特异性监测。通过吸光度酶标仪在~575nm或~55075nm / A605nm的吸光度比下可以容易地读取信号，以提高测定灵敏度。使用此Colorimetric Amplite L-乳酸测定试剂盒，我们能够在100μL反应体积中检测到低至4μM的L-乳酸。它应用广泛，可以很容易地适用于需要测量L-乳酸的各种应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法L-乳酸检测试剂盒。

产品说明书

96孔板测定示例

概述

制备L-乳酸测定混合物（50μL）

加入L-乳酸标准品或测试样品（50μL）

在室温下孵育30分钟~2小时

监测吸光度比率在A575nm / A605nm处增加

注意：在开始实验之前，在室温下解冻每个试剂盒组分中的一个。

操作方法

1.准备NAD储备溶液（100X）：

向NAD小瓶（组分C）中加入100μLH2O，制成100×NAD储备溶液。

2.准备L-乳酸盐储备液：

将200μLH2 O或1×PBS缓冲液加入L-乳酸盐标准品（组分D）的小瓶中以制备100mM D-乳酸盐标准溶液。

注意：未使用的L-lacate标准储备溶液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

3.准备L-乳酸标准品（0至1 mM）的连续稀释液：

3.1将10μLL-乳酸盐储备液（来自步骤2）加入990L PBS缓冲液中，以产生1mM L-乳酸盐标准溶液。

注意：稀释的L-乳酸标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

3.2取200μL的1mM L-乳酸标准溶液进行1：3连续稀释，得到L-Lactate标准品的300,100,30,10,3,1和0μM连续稀释液。

3.3如表1和2中所述，将L-乳酸盐标准品和含L-乳酸盐的测试样品的系列稀释液加入白色透明底96孔微孔板中。

4.制备L-乳酸测定混合物：

4.1将5 mL测定缓冲液（组分B）加入一瓶酶探针（组分A）中。

4.2将50μLNAD储备溶液（100X，来自步骤1）加入到组分A的瓶子中（来自步骤4.1），并充分混合。

注意：这种L-乳酸盐测定混合物足以用于一个96孔板。 未使用的L-乳酸盐测定混合物应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

5.运行L-乳酸测定：

5.1将50μLL-乳酸盐测定混合物（来自步骤4.2）添加至L-乳酸盐标准品，空白对照和测试样品（参见步骤3.3）的每个孔中以使得总L-乳酸盐测定体积为100μL/孔。

注意：对于384孔板，在每个孔中加入25μL样品和25μLL-乳酸盐测定混合物。

5.2在室温下孵育反应30分钟至2小时，避光。

5.3用A575nm / A605nm的吸光度读板仪检测吸光度比率的增加。

参考文献

Exploring the Probiotic and Compound Feed Fermentative Applications of Lactobacillus plantarum SK1305 Isolated from Korean Green Chili Pickled Pepper
Authors: Kai-Min Niu, Damini Kothari, Sang-Buem Cho, Sung-Gu Han, In-Geun Song, Sam-Churl Kim, Soo-Ki Kim
Journal: Probiotics and Antimicrobial Proteins (2018): 1–12

Hypoxia induces lactate secretion and glycolytic efflux by downregulating mitochondrial pyruvate carrier levels in human umbilical vein endothelial cells
Authors: Dong Wang, Qingjie Wang, Gaoliang Yan, Yong Qiao, Boqian Zhu, Bo Liu, Chengchun Tang
Journal: Molecular medicine reports (2018)

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Journal: Pharmacological Research (2017)

Fibroblast Activation Protein Alpha-Activated Tripeptide Bufadienolide Anti-tumor Prodrug with Reduced Cardiotoxicity
Authors: Li-Juan Deng, Long-Hai Wang, Cheng-Kang Peng, Yi-Bin Li, Mao-Hua Huang, Min-Feng Chen, Xue-Ping Lei, Ming Qi, Yun Cen, Wen-Cai Ye
Journal: Journal of Medicinal Chemistry (2017)

Neuronal Culture Microenvironments Determine Preferences in Bioenergetic Pathway Use
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Journal: Frontiers in Molecular Neuroscience (2017): 305

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Authors: Xiaofang Zhang, Lei Wang, Xiaodong Zhang, Lijun Ren, Wenjing Shi, Yijun Tian, Jiangbo Zhu, Tianbao Zhang
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High glucose and interleukin 1β-induced apoptosis in human umbilical vein endothelial cells involves in down-regulation of monocarboxylate transporter 4
Authors: Dong Wang, Qingjie Wang, Gaoliang Yan, Yong Qiao, Ling Sun, Boqian Zhu, Chengchun Tang, Yuchun Gu
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2015): 607–614

Intracellular ATP decrease mediates NLRP3 inflammasome activation upon nigericin and crystal stimulation
Authors: Johji Nomura, Alexander So, Mizuho Tamura, Nathalie Busso
Journal: The Journal of Immunology (2015): 5718–5724

相关产品

Amplite 比色法丙酮酸检测试剂盒

	货号	13821	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	575	Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法丙酮酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测丙酮酸的试剂盒，丙酮酸是细胞内代谢途径中的重要化合物。它来源于称为糖酵解的葡萄糖代谢。一分子葡萄糖分解成两个丙酮酸分子，通过两种方式之一提供活细胞能量。当氧气存在时（有氧呼吸），丙酮酸被丙酮酸脱氢酶转化为乙酰-CoA，丙酮酸脱氢酶进入柠檬酸循环（也称为三羧酸循环）产生ATP。当氧气不足时，丙酮酸盐会厌氧分解，在动物体内产生乳酸盐，在植物和微生物体内产生乙醇。丙酮酸盐的异常水平或乳酸盐与丙酮酸盐的浓度比可能与肝脏疾病或代谢紊乱有关，并且是患者临床和其他实验室研究中的一种诊断测量。 AAT Bioquest的Amplite 荧光丙酮酸盐检测试剂盒提供了一种灵敏的荧光检测方法，用于量化生物样品中的丙酮酸盐。它利用释放过氧化氢的酶偶联反应，可以在Ex / Em = 540 / 590nm处通过荧光酶标仪中的丙酮酸盐传感器检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法丙酮酸检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备样品以及连续稀释的丙酮酸标准溶液（50 µL）
2.加入等体积的工作溶液（50 µL）
3.在室温下孵育30分钟至1小时
4.监测575 nm处的吸光度

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1. Quest Fluor 丙酮酸传感器储备溶液（200X）：
将55 µL DMSO（组分E）添加到Quest Fluor 丙酮酸传感器（组分A）中，制成200X Quest Fluor 丙酮酸传感器储备溶液。

2.标准溶液

丙酮酸标准
将2μL100 mM丙酮酸盐（组分D）添加到998μLPBS（pH 7.0）中，得到200μM丙酮酸盐标准溶液（PS7）。 然后执行1：2的系列稀释，以得到剩余的系列稀释的丙酮酸标准品（PS6-PS1）。

3.工作溶液

将5 mL测定缓冲液（组分C）添加到一个Enzyme Mix1瓶（组分B1）中，并充分混合。 将100μLddH2O加入一个Enzyme Mix2小瓶（组分B2）中并充分混合。 将整个小瓶的Enzyme Mix2（100μL）和25 uL的200X丙酮酸传感器储备溶液转移到Enzyme Mix1瓶中并充分混合。 注意：立即使用，避免直接暴露在光线下。

样品操作及实验分析

表1.白色透明96孔微孔板中丙酮酸标准溶液和测试样品的布局。 PS =丙酮酸标准溶液（PS1- PS7，3.125至200 µM），BL =空白对照（PBS），TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和2中提供的布局，准备丙酮酸标准品（PS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂，而不是50 µL。

2.在丙酮酸标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50 µL工作溶液，使丙酮酸测定总体积为100 µL /孔。 对于384孔板，请向每个孔中添加25 µL工作溶液，总体积为50 µL /孔。 注意：在pH 6.5至7.0下进行丙酮酸测定。

3.将反应混合物在室温下孵育30分钟至1小时。

4.使用酶标仪在575 nm处监测吸光度的增加。

参考文献

A replaceable dual-enzyme capillary microreactor using magnetic beads and its application for simultaneous detection of acetaldehyde and pyruvate
Authors: Shi J, Zhao W, Chen Y, Guo L, Yang L.
Journal: Electrophoresis (2012): 2145

Detection of inflammatory arthritis by using hyperpolarized 13C-pyruvate with MR imaging and spectroscopy
Authors: MacKenzie JD, Yen YF, Mayer D, Tropp JS, Hurd RE, Spielman DM.
Journal: Radiology (2011): 414

Amplex UltraRed enhances the sensitivity of fluorimetric pyruvate detection
Authors: Zhu A, Romero R, Petty HR.
Journal: Anal Biochem (2010): 123

Comparison of high-performance liquid chromatography with fluorescence detection versus enzymatic assay to measure blood pyruvate in clinical practice
Authors: Wolff F, El Khattabi C, Bourdon F, Willems D.
Journal: Clin Biochem (2009): 1099

Faecal tumour pyruvate kinase M2: not a good marker for the detection of colorectal adenomas
Authors: Shastri YM, Stein JM.
Journal: Br J Cancer (2008): 1366; author reply 1367

Hyperpolarized 13C lactate, pyruvate, and alanine: noninvasive biomarkers for prostate cancer detection and grading
Authors: Albers MJ, Bok R, Chen AP, Cunningham CH, Zierhut ML, Zhang VY, Kohler SJ, Tropp J, Hurd RE, Yen YF, Nelson SJ, Vigneron DB, Kurhanewicz J.
Journal: Cancer Res (2008): 8607

Sensitivity and specificity of faecal tumour M2 pyruvate kinase for detection of colorectal adenomas in a large screening study
Authors: Haug U, Hundt S, Brenner H.
Journal: Br J Cancer (2008): 133

Detection of pyruvate dehydrogenase E1 alpha-subunit deficiencies in females by immunohistochemical demonstration of mosaicism in cultured fibroblasts
Authors: Lib MY, Brown RM, Brown GK, Marusich MF, Capaldi RA.
Journal: J Histochem Cytochem (2002): 877

Tumor M2-pyruvate kinase in lung cancer patients: immunohistochemical detection and disease monitoring
Authors: Schneider J, Neu K, Grimm H, Velcovsky HG, Weisse G, Eigenbrodt E.
Journal: Anticancer Res (2002): 311

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Authors: Wulkan RW, Verwers R, Neele M, Mantel MJ.
Journal: Ann Clin Biochem (2001): 554

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Amplite 比色法L-丙氨酸检测试剂盒

	货号	13826	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	575	Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法L-丙氨酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测丙氨酸的试剂盒，L-丙氨酸（L-Ala）作为重要蛋白质的构建块起着至关重要的作用。 L-丙氨酸主要由来自乳酸的肌肉细胞合成并通过肝脏吸收到血液中。 它被谷氨酸丙酮酸转氨酶转化为丙酮酸，进入代谢主流。 L-Ala对葡萄糖的产生和血糖管理至关重要，并且对免疫系统和肾结石的预防起着重要作用。 L-丙氨酸缺乏通常表示营养不良，低蛋白饮食和压力。 AAT Bioquest的Amplite 比色法L-丙氨酸测定试剂盒提供了一种灵敏的比色测定方法，用于量化生物样品中的L-丙氨酸。 它利用释放过氧化氢的酶偶联反应，可在575 nm的吸光度酶标仪上通过Quest Fluor L-丙氨酸传感器检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法L-丙氨酸检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备L-丙氨酸工作溶液（50 µL）
2.添加L-丙氨酸标准品或测试样品（50 µL）
3.在37°C下孵育30分钟至1小时
4.检测575 nm处的吸光度

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Quest Fluor L-丙氨酸探针储备溶液（200X）：
将55 µL DMSO（组分E）添加到Quest Fluor L-丙氨酸探针（组分A）中，制成200X Quest Fluor L-丙氨酸探针储备溶液。

1.2 L-丙氨酸标准溶液（1 mM）：
将10 µL 100 mM L-丙氨酸标准溶液（组分D）加到990 µL PBS（pH 7.0）中，得到1 mM L-丙氨酸标准溶液。

2.标准溶液

L-丙氨酸标准
向900 µL PBS中加入100 µL 1 mM L-丙氨酸标准溶液，制成100 µM L-丙氨酸标准溶液（AS7）。取100 µM L-丙氨酸标准溶液（AS7），并在PBS中进行1：2连续稀释，以得到连续稀释的L-丙氨酸标准溶液（AS6-AS1）。

3.工作溶液

3.1 将5 mL测定缓冲液（组分C）添加到一个Enzyme Mix1瓶（组分B1）中，并充分混合。

3.2 将100μLddH2O加入一个Enzyme Mix2小瓶（组分B2）中并充分混合。

3.3 将整个小瓶（100μL）的Enzyme Mix2和25 uL的200X L-丙氨酸探针储备溶液转移到Enzyme Mix1瓶中，并充分混合以制成L-丙氨酸工作溶液。 注意：L-丙氨酸工作溶液不稳定-请立即使用，并避免直接暴露在光线下。

样品操作及实验分析

表1.白色透明96孔微孔板中L-丙氨酸标准品和测试样品的布局。 AS = L-丙氨酸标准品（AS1-AS7，1.563至100 µM），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和表2提供的布局，准备L-丙氨酸标准品（AS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.将50 µL L-丙氨酸工作溶液添加到L-Alanine标准品，空白对照和测试样品的每个孔中，以使L-Alanine测定的总体积为100 µL /孔。 对于384孔板，将25 µL L-丙氨酸工作溶液添加到每个孔中，总体积为50 µL /孔。 注意：在pH 6.5至7.0下运行L-丙氨酸测定。

3.将反应液在37°C孵育30分钟至1小时。

4.使用酶标仪在575 nm处监测吸光度的增加。

参考文献

Reactivity of beta-methylamino-L-alanine in complex sample matrixes complicating detection and quantification by mass spectrometry
Authors: Glover WB, Liberto CM, McNeil WS, Banack SA, Shipley PR, Murch SJ.
Journal: Anal Chem (2012): 7946

Synthesis and characterization of silver/alanine nanocomposites for radiation detection in medical applications: the influence of particle size on the detection properties
Authors: Guidelli EJ, Ramos AP, Zaniquelli ME, Nicolucci P, Baffa O.
Journal: Nanoscale (2012): 2884

Detection of farnesyltransferase interface hot spots through computational alanine scanning mutagenesis
Authors: Perez MA, Sousa SF, Oliveira EF, Fernandes PA, Ramos MJ.
Journal: J Phys Chem B (2011): 15339

Molecular beacon based bioassay for highly sensitive and selective detection of nicotinamide adenine dinucleotide and the activity of alanine aminotransferase
Authors: Tang Z, Liu P, Ma C, Yang X, Wang K, Tan W, Lv X.
Journal: Anal Chem (2011): 2505

Highly specific substrates of proteinase 3 containing 3-(2-benzoxazol-5-yl)-l-alanine and their application for detection of this enzyme in human serum
Authors: Wysocka M, Lesner A, Guzow K, Kulczycka J, Legowska A, Wiczk W, Rolka K.
Journal: Anal Chem (2010): 3883

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Authors: Su YS, Lin YP, Cheng FC, Jen JF.
Journal: J Agric Food Chem (2010): 120

SAFETY study: alanine aminotransferase cutoff values are set too high for reliable detection of pediatric chronic liver disease
Authors: Schwimmer JB, Dunn W, Norman GJ, Pardee PE, Middleton MS, Kerkar N, Sirlin CB.
Journal: Gastroenterology (2010): 1357

[Rapid detection of alanine aminotransferase with near-infrared spectroscopy]
Authors: Huang FR, Zhang J, Luo YH, Li SP, Zheng SF, Chen XD.
Journal: Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi (2010): 2620

An electrochemical biosensor array for rapid detection of alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase
Authors: Song MJ, Yun DH, Hong SI.
Journal: Biosci Biotechnol Biochem (2009): 474

Detection of the mitochondrial and catalytically active alanine aminotransferase in human tissues and plasma
Authors: Glinghammar B, Rafter I, Lindstrom AK, Hedberg JJ, Andersson HB, Lindblom P, Berg AL, Cotgreave I.
Journal: Int J Mol Med (2009): 621

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Amplite 比色法丙三醇检测试剂盒

	货号	13832	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照, 避免受潮
	规格	200 Tests	价格	4584
	Ex (nm)	575	Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法丙三醇检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测丙三醇的试剂盒，甘油是肝脏和脂肪组织中合成甘油三酯和磷脂的前体。 禁食时，储存在这些脂滴中的甘油三酯可被水解以产生游离甘油和脂肪酸。 释放到血流中的游离甘油的量与甘油三酯/脂肪酸循环速率成正比，甘油三酯/脂肪酸循环速率在代谢调节和热量产生中是重要的。 Amplite 比色甘油测定试剂盒为测量生物样品中的甘油水平提供了一种灵敏的测定方法。 该测定基于甘油的酶偶联反应，其中在HRP偶联反应中使用我们的Amplite Red HRP底物可以检测产物过氧化氢。 信号可以使用OD575nm的吸光度酶标仪进行测量。 使用这种比色甘油测定试剂盒，我们能够在100μL反应体积中检测到低至0.15μg/ mL（〜1.6μM）的甘油。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法丙三醇检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备甘油工作溶液（50 µL）
2.加入甘油标准品或测试样品（50 µL）
3.在室温下孵育30分钟至1小时
4.监测575 nm的OD

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Amplite HRP底物储备液（200X）：
将50 µL DMSO（组分E）添加到Amplite HRP底物（组分A）的小瓶中，制成200X储备溶液。

1.2 甘油标准溶液：
将1 mL ddH2O或1X PBS缓冲液添加到小瓶甘油标准品（组分D）中，制成1 mg / mL甘油标准液。

2.标准溶液

甘油标准
将10 µL甘油标准储备溶液（1 mg / mL）加入990 µL 1X PBS缓冲液中，以生成10 µg / mL标准溶液（G7）。 然后进行1：2的系列稀释，以获得系列稀释的甘油标准品（G6-G1）。

3.工作溶液

3.1 将5 mL测定缓冲液（组分C）添加到一瓶酶混合物（组分B）中，并充分混合。

3.2 将25 µL Amplite HRP底物原液添加到组分B + C的瓶子中，并充分混合以制成甘油工作溶液（组分A + B + C）。 注意：此甘油工作溶液足以用于一个96孔板。 它不稳定，请及时使用。 注意：可以将未使用的B + C组分分成一次性使用的等分试样，并保存在-20°C下。

样品操作及实验分析

表1.透明底部96孔微孔板中甘油标准品和测试样品的布局。 G =甘油标准品（G1-G7，0.156至10 µg / mL），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和2中提供的布局，准备甘油标准品（G），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.在甘油标准品，空白对照和测试样品的每个孔中添加50 µL甘油工作溶液，以使总甘油测定体积为100 µL /孔。 对于384孔板，应在每个孔中添加25 µL甘油工作溶液，总体积为50 µL /孔。

3.避光保存，室温下孵育反应30分钟至1小时。

4.用吸光度板读数器监测吸光度的增加，并在575 nm的OD处进行路径检查。

参考文献

An alcohol oxidase of Phanerochaete chrysosporium with a distinct glycerol oxidase activity
Authors: Linke D, Lehnert N, Nimtz M, Berger RG.
Journal: Enzyme Microb Technol (2014): 7

Bioelectrocatalytic sensor for triglycerides in human skin sebum based on enzymatic cascade reaction of lipase, glycerol kinase and glycerophosphate oxidase
Authors: Jeong CY, Han YD, Yoon JH, Yoon HC.
Journal: J Biotechnol (2014): 7

Epigallocatechin-3-gallate (EGCG) inhibits 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase in the presence of glycerol
Authors: Wu Q, Li JZ, Zhao TY, Li TB, Wang JX, Sui Y.
Journal: Pak J Pharm Sci (2014): 1905

Functional characterization of Yersinia pestis aerobic glycerol metabolism
Authors: Willias SP, Chauhan S, Motin VL.
Journal: Microb Pathog (2014): 33

Identification and glycerol-induced correction of misfolding mutations in the X-linked mental retardation gene CASK
Authors: LaConte LE, Chavan V, Mukherjee K.
Journal: PLoS One (2014): e88276

Isolation of peripheral blood mononuclear cells using glycerol density gradient
Authors: Aimola IA, Inuwa HM, Nok AJ, Mamman AI, Habila N, Muhammad A, Ndidi US, Ignatius B, Jande PL, Oghor R, Isaac LC, Afolabi-Balogun NB.
Journal: Cell Biochem Biophys (2014): 583

Quantitative analysis of glycerol levels in human urine by liquid chromatography-tandem mass spectrometry
Authors: Dong Y, Ma Y, Yan K, Shen L, Wang X, Xu Y, He G, Wu Y, Lu J, Yang Z, Feng F.
Journal: J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci (2014): 30

Rapid monitoring of glycerol in fermentation growth media: Facilitating crude glycerol bioprocess development
Authors: Abad S, Perez X, Planas A, Turon X.
Journal: Talanta (2014): 210

Synthesis of substituted 1,3-diesters of glycerol using wittig chemistry
Authors: Lowe HI, Toyang NJ, Watson CT, Bryant J.
Journal: Nat Prod Commun (2014): 687

The glycoglycerolipid 1,2-dipalmitoyl-3-(N-palmitoyl-6′-amino-6′-deoxy-alpha-d-glucosyl)-sn-glycerol is no inhibitor of the human Myt1 kinase
Authors: Rohe A, Gollner C, Erdmann F, Sippl W, Schmidt M.
Journal: J Enzyme Inhib Med Chem (2014): 514

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Amplite 比色法甘油-3-磷酸检测试剂盒

	货号	13838	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	4584
	Ex (nm)	575	Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法甘油-3-磷酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测甘油的试剂盒，甘油3-磷酸（G3P）是糖酵解代谢途径中的重要中间体。动物，真菌和植物使用G3P产生ATP。 它用于再生脑和骨骼肌细胞中的NAD +。 G3P与肥胖等脂质失衡疾病有关。 Amplite G3P分析试剂盒提供了量化G3P最灵敏的方法之一。 该试剂盒使用Amplite Red底物来量化G3P的浓度，其与酶偶联反应循环中形成的过氧化氢的浓度成比例。 该试剂盒是与HTS应用兼容的优化“混合和读取”格式。 如图1所示，它可在100μL检测体积内检测到12.5μMG3P。检测方法可以使用方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且易于适应自动化而无需分离步骤。 使用吸光度酶标仪可以在〜576 +/- 5 nm处轻松读取信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法甘油-3-磷酸检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.制备3-磷酸甘油工作溶液（50 µL）
2.加入3-磷酸甘油标准液或测试样品（50 µL）
3.在室温下孵育30分钟至1小时
4.监测575 nm OD处的吸光度增加

溶液配制

1.储存溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Amplite Red底物储备液（200X）：
将50 µL DMSO（组分E）添加到Amplite Red底物（组分A）的小瓶中，制成200X储备液。 避免暴露在光线下。

1.2 G3P标准溶液（10 mM）：
将250 µL ddH₂O加到G3P标准品（组分D）的小瓶中，制成10 mM G3P标准品溶液。

2.标准溶液配制

G3P标准
将100 µL 10 mM G3P标准储备液添加到900 µL 1X PBS缓冲液中，以生成1000 µM G3P标准溶液。 将200 µL的1000 µM G3P标准溶液加入800 µL的1X PBS缓冲液中，以生成200 µM的G3P标准溶液（CS7），然后进行1：2的系列稀释，以得到其余的G3P标准液（CS6-CS1）。 注意：稀释的G3P标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

3.工作溶液配制

3.1 将5 mL测定缓冲液（组分C）添加到瓶酶混合液（组分B）中，并充分混合。

3.2 将25 µL Amplite Red底物储备液（200X）加入同一瓶酶混合液（组分B）中，制成G3P工作溶液（最终瓶应包含组分A，B和C）。 注意：应立即使用G3P工作溶液，并远离光线。

样品操作及实验分析

表1.在透明的底部96孔微孔板中的G3P标准品和测试样品的布局。 CS = G3P标准（CS1-CS7，6.25至200 µM）； BL =空白对照； TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和表2提供的布局，将G3P标准品（CS），空白对照（BL）和测试样品（TS）制备到96孔透明底部/黑色壁微孔板中。对于384孔板，请使用 每孔25 µL试剂，而不是50 µL。 注意：根据需要处理细胞或组织。

2.在G3P标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50 µL G3P工作溶液，以使G3P测定总体积为100 µL /孔。 对于384孔板，将25 µL G3P工作溶液添加到每个孔中，总体积为50 µL /孔。

3.在避光的条件下，将反应在室温下孵育30分钟至1小时。

4.使用酶标仪在575 nm（或570 nm / 610 nm的比率）处监控吸光度的增加。

参考文献

CCAAT/enhancer binding protein-beta negatively regulates the expression of glycerol-3-phosphate dehydrogenase 1 in pig PK-15 cells
Authors: Gao Y, Pan Y.
Journal: J Appl Genet (2011): 451

Interaction of fosfomycin with the glycerol 3-phosphate transporter of Escherichia coli
Authors: Santoro A, Cappello AR, Madeo M, Martello E, Iacopetta D, Dolce V.
Journal: Biochim Biophys Acta (2011): 1323

Rickettsia prowazekii uses an sn-glycerol-3-phosphate dehydrogenase and a novel dihydroxyacetone phosphate transport system to supply triose phosphate for phospholipid biosynthesis
Authors: Frohlich KM, Roberts RA, Housley NA, Audia JP.
Journal: J Bacteriol (2010): 4281

Design and synthesis of small molecule glycerol 3-phosphate acyltransferase inhibitors
Authors: Wydysh EA, Medghalchi SM, Vadlamudi A, Townsend CA.
Journal: J Med Chem (2009): 3317

Effects of salinity changes on the growth of Dunaliella salina and its isozyme activities of glycerol-3-phosphate dehydrogenase
Authors: Chen H, Jiang JG, Wu GH.
Journal: J Agric Food Chem (2009): 6178

The presence of distal and proximal promoters for rat mitochondrial glycerol-3-phosphate acyltransferase
Authors: Aneja KK, Guha P, Shilpi RY, Chakraborty S, Schramm LM, Haldar D.
Journal: Arch Biochem Biophys (2008): 35

Aging and acyl-CoA binding protein alter mitochondrial glycerol-3-phosphate acyltransferase activity
Authors: Kannan L, Knudsen J, Jolly CA.
Journal: Biochim Biophys Acta (2003): 12

CTP:glycerol 3-phosphate cytidylyltransferase (TarD) from Staphylococcus aureus catalyzes the cytidylyl transfer via an ordered Bi-Bi reaction mechanism with micromolar K(m) values
Authors: Badurina DS, Zolli-Juran M, Brown ED.
Journal: Biochim Biophys Acta (2003): 196

Stimulation of rat liver mitochondrial sn-glycerol-3-phosphate acyltransferase by polymyxin B via enhanced extraction of lysophosphatidic acid
Authors: Roy A, Guha N, Veras ID, Chakraborty S, Haldar D.
Journal: Lipids (2003): 965

Purification and characterization of cytosolic glycerol-3-phosphate dehydrogenase from skeletal muscle of jerboa (Jaculus orientalis)
Authors: Berrada W, Naya A, Iddar A, Bourhim N.
Journal: Mol Cell Biochem (2002): 117

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Amplite 比色法草酰乙酸检测试剂盒

	货号	13840	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	4584
	Ex (nm)	575	Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法草酰乙酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测草酰乙酸的试剂盒，草酰乙酸是柠檬酸循环的重要组成部分，它与乙酰辅酶A反应生成柠檬酸盐。它还涉及糖异生，尿素循环，乙醛酸循环，氨基酸合成和脂肪酸合成。草酰乙酸的缺乏限制了糖原异生和尿素循环功能，并且可以导致能量产生减少。草酰乙酸也可用作血液谷氨酸清除剂，在创伤性脑损伤后提供神经保护，表现为海马神经元损失减少和神经功能改善。Amplite 比色草酰乙酸检测试剂盒提供了一种灵敏的检测方法，用于定量生物样品中的草酰乙酸。草酰乙酸转化为丙酮酸，通过酶偶联反应产生过氧化氢。用吸光度酶标仪在575nm处用Amplite Red监测过氧化氢的产生。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法草酰乙酸检测试剂盒。 

产品说明书

96孔板测定示例

概述

准备测试样品（50μL）和连续稀释的草酰乙酸标准品（50μL）

加入等体积的测定混合物（50μL）

在室温下孵育30分钟至1小时

监测575nm处的吸光度强度

注意：在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒组分。

操作方法

1.准备连续稀释的草酰乙酸标准品和测试样品：

1.1将100μLDdH₂O加入到草酰乙酸盐标准小瓶（组分E）中以制备100mM草酰乙酸标准溶液。

1.2制备草酰乙酸标准稀释液：将10μL100mM草酰乙酸盐（来自步骤1.1）加入990μL测定缓冲液（组分C）中，得到1mM草酰乙酸溶液。 将320μL的1mM草酰乙酸标准溶液加入680μL测定缓冲液中以制备320μM草酰乙酸溶液。 进行1：2连续稀释，得到160,80,40,20,10,5μM连续稀释的草酰乙酸标准品。

1.3根据说明书中的表1，将50μL含草酰乙酸的样品和连续稀释的草酰乙酸标准品加入透明底96孔微量培养板中。

2.准备草酰乙酸测定混合物：

2.1Make Amplite 红色底物原液（200X）：将50μLDMSO（组分F）加入Amplite Red底物（组分A）中，制成200X Amplite Red底物原液。

2.2制备草酰乙酸脱羧酶（OAC）储备溶液（100X）：将50μLddH₂O加入草酰乙酸脱羧酶（组分D）中以制备100×草酰乙酸脱羧酶原液。

2.3制备测定混合物：将5mL测定缓冲液（组分C）加入一个酶混合瓶（组分B）中充分混合。 将50μLOAC储备溶液（来自步骤2.2）和25μL200XAmplite Red储备溶液（来自步骤2.1）转移到瓶中并充分混合。

注意1：分析混合物不稳定，及时使用，避免直接暴露在光线下。

注意2：将未使用的200X Amplite Red原液储存在-20℃，避免光照和反复冻融循环。

3.运行草酰乙酸测定：

3.1将50μL测定混合物（来自步骤2.3）添加到草酰乙酸标准品，空白对照和测试样品的每个孔中（参见步骤1.3），以使总草酰乙酸测定体积为100μL/孔。

注意1：对于384孔板，每孔加入25μL样品，25μLAssay混合液。

注意2：在pH 6.5至7.0下进行草酰乙酸测定。

3.2在室温下孵育反应混合物30分钟至1小时。

3.3使用575 nm的吸光度读板仪检测吸光度的增加。

参考文献

Enzymatic assay for D-aspartic acid using D-aspartate oxidase and oxaloacetate decarboxylase
Authors: Kato S, Ikuta T, Hemmi H, Takahashi S, Kera Y, Yoshimura T.
Journal: Biosci Biotechnol Biochem (2012): 2150

Assay of blood and tissue oxaloacetate and alpha-ketoglutarate by isotope dilution gas chromatography-mass spectrometry
Authors: Laplante A, Comte B, Des Rosiers C.
Journal: Anal Biochem (1995): 580

Effect of oxaloacetate and phosphorylation on ATP-citrate lyase activity
Authors: Pentyala SN, Benjamin WB.
Journal: Biochemistry (1995): 10961

Novel oxaloacetate effect on mitochondrial Ca2+ movement
Authors: Leikin YN, Zharova TV, Tjulina OV.
Journal: FEBS Lett (1993): 35

A sensitive multienzymatic assay for the measurement of pyruvate, dihydroxyacetone phosphate, oxaloacetate, and acetoacetate in clear extracts from biological samples
Authors: Arias-Mendoza F, Pina E.
Journal: Prep Biochem (1991): 211

Flow-injection analysis of amino acids and their metabolites by immobilized vitamin B6-dependent enzymes. Sensitive determination of L-aspartate, L-glutamate, 2-oxoglutarate, and oxaloacetate
Authors: Kurkijarvi K, Vierijoki T, Korpela T.
Journal: Ann N Y Acad Sci (1990): 394

Pyruvate dehydrogenase activity in osmotically shocked rat brain mitochondria: stimulation by oxaloacetate
Authors: Haas RH, Thompson G, Morris B, Conright K, Andrews T.
Journal: J Neurochem (1988): 673

Activity of maize leaf phosphoenolpyruvate carboxylase in relation to tautomerization and nonenzymatic decarboxylation of oxaloacetate
Authors: Walker GH, Ku MS, Edwards GE.
Journal: Arch Biochem Biophys (1986): 489

Kinetic mechanism of Escherichia coli isocitrate dehydrogenase and its inhibition by glyoxylate and oxaloacetate
Authors: Nimmo HG.
Journal: Biochem J (1986): 317

The interaction of dithiothreitol and acetyl coenzyme A in a radiochemical assay for rat brain ATP:citrate oxaloacetate lyase
Authors: Simpson J.
Journal: J Neurochem (1981): 100

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