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TaqI-v2 货 号 #R0149L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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TaqI-v2 货 号 #R0149L TaqI-v2 货 号 #R0149L TaqI-v2 货 号 #R0149L TaqI-v2 货 号 #R0149L TaqI-v2 货 号 #R0149L TaqI-v2 货 号 #R0149L TaqI-v2 货 号 #R0149L TaqI-v2 货 号 #R0149L

货 号
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#R0149L
20,000 units
2,899.00
有
无
无
无
无

#R0149M
（高浓度5X）20,000 units
2,899.00
无
无
无
无
无

#R0149S
4,000 units
699.00
有
有
有
有
有

#R0149T
（高浓度5X）4,000 units
699.00
无
无
无
无
无

#R0149V
2,000 units
369.00
有
有
无
无
无

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TaqI-v2 货 号 #R0149L

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 50%
NEBuffer 2.1: 75%
NEBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、省时酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，65℃。
热失活：80℃ 20 分钟。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

37℃ 时活性

10%。

甲基化敏感性

对 dam 甲基化敏感。

BtsI-v2 货 号 #R0667L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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BtsI-v2 货 号 #R0667L BtsI-v2 货 号 #R0667L BtsI-v2 货 号 #R0667L BtsI-v2 货 号 #R0667L BtsI-v2 货 号 #R0667L BtsI-v2 货 号 #R0667L BtsI-v2 货 号 #R0667L BtsI-v2 货 号 #R0667L

货 号
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#R0667L
2,500 units
3,389.00
有
无
无
无
无

#R0667S
500 units
839.00
无
有
有
无
无

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BtsI-v2 货 号 #R0667L

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 100%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、省时酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，55℃。

浓度

10,000 units/ml。

37℃ 时活性

75%。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项

如下条件可能出现星号活性：延时酶切、高酶浓度或甘油浓度 ＞ 5%。

AleI-v2 货 号 #R0685L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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AleI-v2 货 号 #R0685L AleI-v2 货 号 #R0685L AleI-v2 货 号 #R0685L AleI-v2 货 号 #R0685L AleI-v2 货 号 #R0685L AleI-v2 货 号 #R0685L AleI-v2 货 号 #R0685L AleI-v2 货 号 #R0685L

货 号
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#R0685L
2500 units
3,499.00
无
无
无
无
无

#R0685S
500 units
869.00
有
无
无
无
有

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AleI-v2 货 号 #R0685L

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反应条件

 CutSmart 缓冲液，37℃。

热失活：65℃ 20 分钟。
 

浓度

 10,000 units/ml

甲基化敏感性

 CpG 重叠后部分阻断

BsmBI-v2 货 号 #R0739L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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BsmBI-v2 货 号 #R0739L BsmBI-v2 货 号 #R0739L BsmBI-v2 货 号 #R0739L BsmBI-v2 货 号 #R0739L BsmBI-v2 货 号 #R0739L BsmBI-v2 货 号 #R0739L BsmBI-v2 货 号 #R0739L BsmBI-v2 货 号 #R0739L BsmBI-v2 货 号 #R0739L

货 号
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#R0739L
1,000 units
3,629.00
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无
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#R0739S
200 units
839.00
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无
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有
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BsmBI-v2 货 号 #R0739L

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通知

 请注意：该酶是BsmBI（R0580）的升级替代产品。

描述

 BsmBI-v2（R0739） 是一款 IIS 型限制性内切酶，其为 Esp3I 的同裂酶。BsmBI-v2 为 BsmBI（R0580）的升级替代产品，该酶被改造以在Golden Gate组装（无缝克隆）实验中具有更佳性能。NEB 使用 “v2”或“HF”来命名人工改造过的酶。

特性

省时酶，5-15分钟完成酶切

应用于 Golden Gate 组装
IIS 型内切酶，识别非对称序列，在识别序列之外切割 DNA
随酶提供紫色凝胶上样染料（NEB #B7024）
 

浓度

 10,000 units/ml。

在不同反应液中的活性

CutSmart® Buffer: 25%

NEBuffer™ 1.1: <10%
NEBuffer™ 2.1: 50%
NEBuffer™ 3.1: 100%
 

反应条件

1X  NEBuffer™ 3.1 缓冲液，55°C。

热失活：80°C，20 分钟。
 

单位定义

 1 单位指在 50 µl 反应体系中，55℃ 温育 1 小时，消化 1 µg λDNA 所需的酶量。

甲基化敏感性

 对哺乳动物 CpG 甲基化敏感。

注意事项

 37℃ 时活性：10%

PsiI-v2 货 号 #R0744L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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PsiI-v2 货 号 #R0744L PsiI-v2 货 号 #R0744L PsiI-v2 货 号 #R0744L PsiI-v2 货 号 #R0744L PsiI-v2 货 号 #R0744L PsiI-v2 货 号 #R0744L PsiI-v2 货 号 #R0744L PsiI-v2 货 号 #R0744L

货 号
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#R0744L
2,000 units
5,839.00
有
无
无
无
无

#R0744S
400 units
1,459.00
有
无
有
无
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PsiI-v2 货 号 #R0744L

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描述

 PsiI-v2 为 PsiI 的升级替代产品

在不同反应液中的活性

CutSmart Buffer: 100%

NEBuffer 1.1: 25%

NEBuffer 2.1: 50%

NEBuffer 3.1: 10%

特性

 CutSmart、重组酶。

反应条件

 1X  CutSmart 缓冲液，37℃。

热失活：65℃ 20 分钟。

浓度

 10000 units/ml。

甲基化敏感性

 对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项

 甘油浓度 ＞ 5% 条件下可能出现星号活性。

Takara R161A 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 50 Rxns酶试剂盒

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16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara R161A 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 50 Rxns ￥6,508 Takara R161A 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 50 Rxns Takara R161A 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 50 Rxns Takara R161A 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 50 Rxns
Takara R161B (A × 2) 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 50 Rxns × 2 ￥12,517 Takara R161A 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 50 Rxns Takara R161A 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 50 Rxns Takara R161A 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 50 Rxns
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■ 制品内容 (Code No.: R161A)(50次量)
2×Gflex PCR Buffer (Mg2+, dNTP plus) 1.25 ml
Tks Gflex DNA Polymerase（1.25 units/μl) 62.5 U（50μl）
16S V3-V4 Primer Mix（10×） 125 μl
H2O 1 ml
 
 
 
■ 制品说明
本制品是使用Illumina公司MiSeq对细菌丛16S rRNA进行解析时使用的PCR扩增试剂盒。以细菌16S rRNA基因的V3-V4区域为对象，使用对多样序列能有效扩增的PCR酶Tks Gflex™ DNA Polymerase进行扩增。
引物是采用设计在常用的高效扩增区域（V3-V4）上的341F、806R（见图1），在引物的5’端连有Illumina MiSeq用的overhang序列。使用本试剂盒扩增得到PCR产物后，利用Nextera XT Index Kit (Illumina公司)制备MiSeq用文库。Nextera XT Index Kit中的引物能够在待测文库的两端接入测序用adaptor和用于区分各个被检测样品的Index序列（见图2）。
Takara R161A 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 50 Rxns
 
Takara R161A 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 50 Rxns
 
■ 保存
-20℃
 
■ 试剂盒以外需要准备的其他试剂、仪器等（主要用品）
· 核酸提取Kit
【粪便样品】
NucleoSpin DNA Stool (Code No. 740472.10/.50)等
【土壤样品】
NucleoSpin Soil (Code No. 740780.10/.50/.250)等
· PCR产物的纯化
Agencourt AMPure XP（Beckman Coulter公司，Code No. A63880/A63881/A63882）
0.2 ml磁力架：Magnetic Separator-PCR Strip（Code No. 635011）等
新配的80% 乙醇
溶出液（10 mM Tris-HCl, pH8.5）
· 测序adaptor与Index序列的添加
Nextera XT Index Kit（Illumina Code No. FC-131-1001/FC-131-1002）
Nextera XT Index Kit v2 set A-D（Illumina Code No. FC-131-2001～2004)
· PCR仪
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice™ Touch（Code No. TP350）
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice™ Gradient（Code No. TP600）等
· 凝胶电泳装置
Mupid-2plus（Code No. M-2P）
Mupid-exU（Code No. EXU-1）等
· 凝胶
Agarose L03「TAKARA」（Code No. 5003/5003B）
PrimeGel™ Agarose PCR-Sieve（Code No. 5810A）等
· 微量高速离心机
· 微量移液器及Tip
 
 
 

Clontech 632666 Guide-it™ Long ssDNA Production System v2 50 Rxns酶试剂盒

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基因敲入用长单链DNA制备 v2
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 632666 Guide-it™ Long ssDNA Production System v2 50 Rxns ￥6,647 Clontech 632666 Guide-it&trade; Long ssDNA Production System v2 50 Rxns Clontech 632666 Guide-it&trade; Long ssDNA Production System v2 50 Rxns Clontech 632666 Guide-it&trade; Long ssDNA Production System v2 50 Rxns
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Guide-it Long ssDNA Production System v2可以让您根据需求，制备长至5,000 nt的长单链DNA（ssDNA），作为修复模板用于多种基因组编辑技术的基因敲入实验。该试剂盒提供了一种简单且快速的方法，通过选择性消化正义链（sense strand）或者反义链（antisense strand），可以将任何序列的dsDNA PCR产物转化成为ssDNA。每个试剂盒可制备50条ssDNA模板。
尽管在利用同源定向修复（HDR）进行准确基因组编辑的应用中，单链DNA（ssDNA）修复模板展示出了优于双链DNA（dsDNA）模板的众多优势（Roth et al., 2018）。但由于制备难度和制备成本的原因，长单链DNA（long ssDNA）的应用受到了限制。Guide-it Long ssDNA Production System v2提供了一种高效经济的方法，可以根据自己的实验需求制备ssDNA，让所有研究人员都可以体验ssDNA模板的优势。
 
与dsDNA相比，使用ssDNA作为模板的优势：
· 显著减少了随机整合和脱靶整合，从而提高了基因编辑效率，降低了出现实验伪像的可能性
· 细胞毒性更低，让您收获到更多的编辑细胞
· 由于来自非整合模板的转基因表达微乎其微，因此更容易识别出正确编辑克隆
 
与原版本产品Guide-it Long ssDNA Production System（Code No. 632644）相比，优化了反应体系，进一步提高了链消化酶（Strandase）处理效率，即便是以往制备困难具有挑战性的dsDNA模板，也可以高效制备ssDNA。
 
■ 产品特点
· 根据需求制备500–5,000 nt ssDNA供体模板，用于基因敲入实验
· 操作流程简单快速，只需几个小时即可完成
· 与dsDNA模板相比，脱靶整合显著降低
· 细胞毒性更低，编辑后的细胞群细胞活力更高
 
■ 实验操作流程图
Clontech 632666 Guide-it&trade; Long ssDNA Production System v2 50 Rxns
图1. 用于基因敲入实验的长单链DNA（long ssDNA）供体模板制备流程。首先，使用克隆、融合PCR或者其它方法制备dsDNA模板，dsDNA模板除了包含目的基因之外，还需要包含长度为300-600 bp的同源臂，该同源臂与目的插入位点左右两侧的相邻序列相同源。接着，只在一端使用磷酸化引物进行PCR扩增，制备两种不同的dsDNA PCR产物（分别作为正义链ssDNA和反义链ssDNA制备模板）。添加链消化酶A（Strandase Mix A），开始消化降解正义链或反义链。由于链消化酶A只消化降解5’端被磷酸化的DNA链，所以可以有选择性地降解正义链或反义链。然后，添加链消化酶B（Strandase Mix B）完成消化反应获得ssDNA。最后，纯化反应液，准备适用于后续基因敲入实验的ssDNA供体。请注意，如果正向引物被磷酸化，则生成的ssDNA将是反义链；反之，如果反向引物被磷酸化，最终产物将是正义链。建议制备正义链和反义链两种ssDNA，分别进行基因敲入实验。
 
■ 实验例
Clontech 632666 Guide-it&trade; Long ssDNA Production System v2 50 Rxns
图2. Guide-it Long ssDNA Production System v2提升了挑战性模板的处理能力和长至5,000 nt单链DNA的制备能力。Guide-it Long ssDNA Production System v2可成功制备长度为500 nt至5,000 nt的ssDNA。凝胶图显示了不同长度的dsDNA底物（泳道1），经过酶消化和纯化后相对应的正义（SS）和反义（AS）ssDNA产物（泳道2）。每个ssDNA HDR模板均设计为靶向CCR5基因。
 
Clontech 632666 Guide-it&trade; Long ssDNA Production System v2 50 Rxns
图3. Guide-it Long ssDNA Production System v2优化了ssDNA制备效率，可更有效处理具有挑战性的dsDNA模板。凝胶图显示了几种HDR模板的dsDNA起始材料（Lane 1）和正义（SS）或反义（AS）ssDNA产物，这些ssDNA分别使用了Guide-it Long ssDNA Production System原版本产品（v1）或升级版本产品（v2）进行制备（ Lane 2和Lane 3）。对于v1 Guide-it试剂盒，本实验例所包含的dsDNA模板，已被鉴定为具有挑战性的ssDNA制备底物，很难制备出高纯度ssDNA。以溴化乙锭为染色剂，采用琼脂糖凝胶电泳法分析dsDNA和ssDNA。ssDNA产物的分子量要比相应dsDNA底物的分子量小。在所有情况下，Guide-it Long ssDNA Production System v2制备的ssDNA条带比v1版本更清晰，表明消化更完全、更均匀。
 
■ 产品组份
Guide-it Long ssDNA Production System v2（Code No. 632666）
· Guide-it Long ssDNA Strandase Kit v2（Code No. 632667）*
  PrimeSTAR Max Premix (2X) 625 μl × 4
  Strandase Mix A 250 μl
  Strandase A/B Buffer (10X) 250 μl
  Strandase Mix B 50 μl
  Digestion Enhancer (5X) 500 μl
  RNase Free Water 1 ml × 5
  2-kb Control Template (2 ng/μl) 50 μl
  Control Primer Mix (16 μM) 50 μl
· NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up kit (Code No. 740609.50) 50次 × 2
· Buffer NTC（Code No. 740654.100） 125 ml
 
* 本产品不单独出售。
 
■ 保存条件
Guide-it Long ssDNA Strandase Kit v2 (Code No. 632667) －20℃
NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up (Code No. 740690.50) 室温
Buffer NTC（Code No. 740654.100） 室温
 
■ 关联资料
相关资料：
点击图片下载		 Clontech 632666 Guide-it&trade; Long ssDNA Production System v2 50 Rxns
 
 
 
产品详情请点击：Clontech 632666 Guide-it&trade; Long ssDNA Production System v2 50 Rxns
 
 

Clontech 635040 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 96 Rxns酶试剂盒

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SMART-Seq v4 3’DE Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 635040 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 96 Rxns ￥48,565 Clontech 635040 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 96 Rxns Clontech 635040 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 96 Rxns Clontech 635040 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 96 Rxns
Clontech 635041 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 192 Rxns ￥90,089 Clontech 635040 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 96 Rxns Clontech 635040 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 96 Rxns Clontech 635040 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 96 Rxns
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V – 修饰性PEG

SMART-Seq v4 3’DE Kit—简便的高性能单细胞差异表达分析
· 升级的SMART技术—带有LNA修饰的SMART-Seq v4 oligo 加升级的配方带来更好的性能
   (灵敏度高，更好重复性，更多的GC-rich基因)
· 末端捕获流程—大部分reads集中于3’端，同时维持出色的灵敏度，缩减了差异表达分析需要
   的reads数
· 高达12个样品pool—内嵌的indexes作为细胞barcode，可以实现在每个测序lane中高达12个样品
   的pool，进一步缩短时间，降低成本
 
单细胞转录组研究对于研究细胞群内不同单细胞表达情况非常重要。Takara Clontech 研发了单细胞mRNA转录本末端捕获技术，该技术侧重于3’端的末端捕获，使您可以用更少的测序reads获得高品质测序数据。本试剂同样采用了领先的SMART-Seq v4 技术，结合了SMART (Switching Mechanism at 5’ End of RNA Template) 技术和LNA (Locked Nucleic Acid) 技术。
本试剂除了侧重于mRNA转录本3’端外，还包含了内嵌的indexes作为Read2的细胞barcode，可以实现在每个测序lane中高达12个样品的pool，进一步缩减了时间和研究成本。本试剂可以1–10.5 μl体系起始，依赖于Illumina Nextera® XT DNA Library Preparation Kit。本试剂设计并经验证可以用于以下测序平台的cDNA文库和测序文库制备：HiSeq®,NextSeq®,MiSeq®和MiniSeq®。
 
Clontech 635040 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 96 Rxns
图1. 末端捕获方法简介
 
Clontech 635040 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 96 Rxns
表1. K562单细胞pool文库主要测序数据
 
Clontech 635040 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 96 Rxns
图2. 从K562单细胞中检测到的基因数
 
Technote：
点击图片查看		 Clontech 635040 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 96 Rxns
 
产品详情请点击：Clontech 635040 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 96 Rxns
 
 

ApoBrite V570 caspase 3/7底物 细胞渗透 （停产） 货号20201-AAT Bioquest荧光染料

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ApoBrite V570 caspase 3/7底物 细胞渗透 （停产）

ApoBrite V570 caspase 3/7底物 细胞渗透 （停产）

ApoBrite V570 caspase 3/7底物 细胞渗透 （停产） 货号20201 货号 20201 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 0
Ex (nm) 405 Em (nm) 600
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：20201

产品名称：ApoBrite V570 caspase 3/7底物 细胞渗透 

规格：100 Tests

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：N/A

溶剂：DMSO

激发波长(nm)：405

发射波长(nm)：600

 

产品介绍

ApoBrite V570 caspase 3/7底物是美国AAT Bioquest生产的细胞功能探针，caspase 3/7的激活对于凋亡的启动很重要。我们的Cell Meter 无洗涤活细胞caspase活性测定试剂盒基于ApoBrite V570，这是我们最近开发的可渗透细胞的荧光caspase底物，这是第一种直接检测活细胞caspase活性的荧光探针。ApoBrite V600由三个部分组成，包括a）掩蔽的荧光团，b）半胱天冬酶选择性肽片段（DEVD），以及c）细胞穿透部分。细胞穿透部分将探针带入活细胞。一旦进入活细胞，胱天蛋白酶选择性肽片段被胱天蛋白酶切割以释放掩蔽的荧光团。恢复的荧光强度与要测量的胱天蛋白酶的活性直接相关。与活细胞中现有的半胱天冬酶测定相比，ApoBrite V570更加坚固，方便和准确。ApoBrite V570释放出具有较大斯托克斯位移的荧光团，并且可以通过大多数新型流式细胞仪上安装的紫激光来激发。如NucView试剂所报道的，它不需要DNA相互作用就能发荧光。如FMK肽探针所报道的，它不抑制胱天蛋白酶活性。尽管胱天蛋白酶的荧光FMK肽抑制剂被广泛用于检测活细胞中的胱天蛋白酶活性，但是该技术有一些严重的局限性：a）FMK半胱天冬酶抑制剂具有高细胞毒性，因为FMK肽与活性胱天蛋白酶共价结合。b）FMK肽与caspase不可逆地共价结合会抑制caspase活性，导致假阳性凋亡。C）FMK分析具有极高的背景，并需要大量洗涤，从而导致吞吐量很低；d）FMK肽在水溶液中不稳定，必须立即使用。

 

参考文献

Helicobacter pylori Secreted Protein HP1286 Triggers Apoptosis in Macrophages via TNF-Independent and ERK MAPK-Dependent Pathways
Authors: Raquel Tavares, Sushil Kumar Pathak
Journal: Frontiers in Cellular and Infection Microbiology (2017): 58

Death receptor 3 mediates necroptotic cell death
Authors: Sebastian Bittner, Gertrud Knoll, Martin Ehrenschwender
Journal: Cellular and Molecular Life Sciences (2016): 1–12

Helicobacter pylori protein JHP0290 exhibits proliferative and anti-apoptotic effects in gastric epithelial cells
Authors: Raquel Tavares, Sushil Kumar Pathak
Journal: PloS one (2015): e0124407

 

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产品名称 货号
ApoBrite U470 caspase 3/7底物 细胞渗透 Cat#20200

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ApoBrite V570 caspase 3/7底物 细胞渗透 （停产）.pdf