EcoRI 甲基转移酶 货 号 #M0211S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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EcoRI 甲基转移酶                 货   号                  #M0211S EcoRI 甲基转移酶                 货   号                  #M0211S EcoRI 甲基转移酶                 货   号                  #M0211S EcoRI 甲基转移酶                 货   号                  #M0211S EcoRI 甲基转移酶                 货   号                  #M0211S

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EcoRI 甲基转移酶                 货   号                  #M0211S

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概述

EcoRI 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧腺嘌呤残基(N6)进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从 E. coli RY 13(R.N. Yoshimori)克隆 EcoRI 修饰基因。 

反应条件

1X EcoRI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM NaCl,50 mM Tris-HCl(pH 8.0 @ 25℃),10 mM EDTA]。加入 80 μM SAM(随酶提供),37℃ 温
育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 EcoRI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

40,000 units/ml。 

注意事项

MgCl2 抑制 EcoRI 甲基转移酶活性。在存在 4 mM MgCl2 条件下,酶活只保留 50%。 

HpaII 甲基转移酶 货 号 #M0214S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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HpaII 甲基转移酶                  货   号                  #M0214S HpaII 甲基转移酶                  货   号                  #M0214S HpaII 甲基转移酶                  货   号                  #M0214S HpaII 甲基转移酶                  货   号                  #M0214S HpaII 甲基转移酶                  货   号                  #M0214S HpaII 甲基转移酶                  货   号                  #M0214S

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HpaII 甲基转移酶                  货   号                  #M0214S

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
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概述

HpaII 甲基转移酶与 MspI 甲基转移酶识别序列相同,但对左侧序列中的内侧胞嘧啶(C5)进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从副流感嗜血杆菌(Haemophilus parainfluenzae)(ATCC 49669)克隆的 HpaII 修饰基因。 

反应条件

1X HpaII 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM EDTA,5 mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM(随酶提供),37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HpaII 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

4,000 units/ml。 

MspI 甲基转移酶 货 号 #M0215S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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MspI 甲基转移酶                  货   号                  #M0215S MspI 甲基转移酶                  货   号                  #M0215S MspI 甲基转移酶                  货   号                  #M0215S MspI 甲基转移酶                  货   号                  #M0215S MspI 甲基转移酶                  货   号                  #M0215S MspI 甲基转移酶                  货   号                  #M0215S

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MspI 甲基转移酶                  货   号                  #M0215S

  • isoschizomers     |
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概述

MspI 甲基转移酶与 HpaII 甲基转移酶识别序列相同,但对左侧识别序列外侧胞嘧啶(C5)进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从莫拉氏菌属(Moraxella species)(ATCC 49670)克隆的 MspI 修饰基因。 

反应条件

1X MspI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[100 mM NaCl,50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM EDTA,5 mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM(随酶提供),37℃ 温育。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 MspI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。 

HhaI 甲基转移酶 货 号 #M0217S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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HhaI 甲基转移酶                  货   号                  #M0217S HhaI 甲基转移酶                  货   号                  #M0217S HhaI 甲基转移酶                  货   号                  #M0217S HhaI 甲基转移酶                  货   号                  #M0217S HhaI 甲基转移酶                  货   号                  #M0217S HhaI 甲基转移酶                  货   号                  #M0217S

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  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

概述

HhaI 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧胞嘧啶残基(C5)进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从溶血嗜血杆菌(Haemophilus haemolyticus) (ATCC 10014)克隆的 HhaI 修饰基因。 

反应条件

1X HhaI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM EDTA,5 mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM(随酶提供),37℃温育。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HhaI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

25,000 units/ml。 

TaqI 甲基转移酶 货 号 #M0219S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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TaqI 甲基转移酶                  货   号                  #M0219S

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

概述

Taq I 甲基转移酶对左侧序列中的腺嘌呤残基(N6)进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从水栖高温菌(Thermus aquatics)克隆的 Taq I 修饰基因。 

反应条件

1X CutSmart Buffer + SAM
[50 mM KAc,20 mM Tris-Ac,10 mM Mg(Ac)2,100 μg/ml BSA(pH 7.9 @ 25℃)]。加入 80 μM SAM(随酶提供),65℃ 温育。 

注意事项

37℃ 条件下的活性为 25%。 

单位定义

1 单位指在 20 μl 反应体系中,65℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 Taq I 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

10,000 units/ml。 

AluI 甲基转移酶 货 号 #M0220S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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100 units
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AluI 甲基转移酶                 货   号                  #M0220S

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概述

AluI 甲基转移酶能对左侧序列中的胞嘧啶残基(C5)进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus)(ATCC 21606)克隆的 AluI 修饰基因。 

反应条件

1X AluI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM EDTA,mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM(随酶提供),37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 AluI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。 

dam 甲基转移酶 货 号 #M0222L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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dam 甲基转移酶                              收藏

dam 甲基转移酶                货   号                  #M0222L dam 甲基转移酶                货   号                  #M0222L dam 甲基转移酶                货   号                  #M0222L dam 甲基转移酶                货   号                  #M0222L

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500 units
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dam 甲基转移酶                货   号                  #M0222L

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

概述

dam 甲基转移酶能对左侧序列中的腺嘌呤残基(N6)进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有 pTP166 载体,该载体含有从 E. coli(M. Marinus)克隆的 dam 修饰基因。 

反应条件

1X dam 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM EDTA,5mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM(随酶提供),37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 MboI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

8,000 units/ml。 

BamHI 甲基转移酶 货 号 #M0223L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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BamHI 甲基转移酶                 货   号                  #M0223L BamHI 甲基转移酶                 货   号                  #M0223L BamHI 甲基转移酶                 货   号                  #M0223L BamHI 甲基转移酶                 货   号                  #M0223L BamHI 甲基转移酶                 货   号                  #M0223L

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100 units
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BamHI 甲基转移酶                 货   号                  #M0223L

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  • compatible ends     | 
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概述

BamHI 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧胞嘧啶残基(N4)进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从解淀粉芽孢杆菌 H(Bacillus amyloliquefaciens)(ATCC 49763)克隆的 BamHI 修饰基因。 

反应条件

1X BamHI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM EDTA,5 mM DTT]。加入 80 μM SAM(随酶提供),37℃ 温育。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 BamHI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

4,000 units/ml。 

HaeIII 甲基转移酶 货 号 #M0224S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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HaeIII 甲基转移酶                              收藏

HaeIII 甲基转移酶                 货   号                  #M0224S HaeIII 甲基转移酶                 货   号                  #M0224S HaeIII 甲基转移酶                 货   号                  #M0224S HaeIII 甲基转移酶                 货   号                  #M0224S HaeIII 甲基转移酶                 货   号                  #M0224S

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#M0224S
500 units
869.00

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HaeIII 甲基转移酶                 货   号                  #M0224S

  • isoschizomers     |
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概述

HaeIII 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧胞嘧啶残基(C5)进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从埃及嗜血杆菌(Haemophilus aegyptius)(ATCC 11116)克隆的 HaeIII 修饰基因。 

反应条件

1X HaeIII 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM NaCl,50 mM Tris-HCl(pH 8.5 @ 25℃),10 mM DTT]。加入 80 μM SAM(随酶提供),37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HaeIII 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

10,000 units/ml。 

注意事项

HaeIII 甲基转移酶能保护 DNA 不被 NotI切割。 

CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 货 号 #M0226L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                              收藏

CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                货   号                  #M0226L CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                货   号                  #M0226L CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                货   号                  #M0226L CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                货   号                  #M0226L

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#M0226L
500 units
3,409.00

#M0226M
(高浓度5X)500 units
3,409.00

#M0226S
100 units
849.00

#M0226V
50 units
449.00

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CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                货   号                  #M0226L

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

特性

 阻止限制性内切酶的切割
 CpG 甲基化依赖性基因表达的研究
 研究探针序列特异性与 DNA 大沟的相互作用
 改变 DNA 的物理特性
 对 DNA 统一进行 [3H] 标记
 减少限制性内切酶的酶切位点数目,提高限制性内切酶的特异性 

概述

CpG 甲基转移酶(M.SssI)能将双链二核苷酸识别序列 5´ …CG…3´ 中所有胞嘧啶残基(C5)甲基化。 

来源

分离自重组的 E. coli 菌株,该菌株克隆有桑皱褶螺原体(Spiroplasma sp.)MQ1 菌株的 CpG 甲基转移酶基因。 

反应条件

1X NEBuffer 2 + SAM
[50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃)]。加入 160 μM S-腺苷甲硫氨酸(SAM,随酶提供),37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

注意

MgCl2 并不是必需的辅因子。Mg2+ 存在时,M.SssI 更倾向于分散甲基化,而不是连续甲基化,同时,会出现具有拓扑异构酶的活性。 

质保声明

CpG 甲基转移酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义

1 个酶活单位定义为在 20 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 BstUI 限制性内切酶切割所需要的酶量。

浓度

4,000 units/ml 和 20,000 units/ml(通过 λDNA检测)。 

注意事项

CpG 甲基转移酶(M.SssI)可以特异性地模拟高等真核生物基因组的修饰模式,因而可用于研究高等真核生物体内胞嘧啶甲基化的功能。与哺乳动物甲基转移酶不同,CpG 甲基转移酶对未甲基化和半甲基化的 DNA 底物的甲基化效率相同,因此该酶是更为有效的 DNA 修饰工具。
只要限制性内切酶的识别位点含有 CG 序列或此二核苷酸的重叠序列,CpG 甲基转移酶均能有效地阻止其发挥切割活性。需要注意的是,CpG 甲基转移酶使 DNA 甲基化,而 E. coli 中的 Mcr 和 Mrr 的限制作用不受甲基化影响(详见 315-317 页),故应使用 Mcr、MrrE. coli 菌株(例如,NEB #C2925)作为转化的宿主菌。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。