热敏磷酸酶 货 号 #M0289L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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热敏磷酸酶                货   号                  #M0289L 热敏磷酸酶                货   号                  #M0289L 热敏磷酸酶                货   号                  #M0289L 热敏磷酸酶                货   号                  #M0289L

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特性

 DNA 和 RNA 的去磷酸化

 克隆载体去磷酸化,防止载体自连
 测序或 SNP 分析前除去 PCR 反应中dNTP 和焦磷酸盐
 T4 PNK 标记 5´ DNA 末端前的去磷酸化

概述

热敏磷酸酶催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外,热敏磷酸酶水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸(NTP 和 dNTP)。热敏磷酸酶在分子生物学研究中应用广泛,如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团,用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中,对线性载体去磷酸化,防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。热敏磷酸酶也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP,用于制备测序模板和 SNP 分析。热敏磷酸酶 在 70℃ 温育 5 分钟即可完全的、不可逆的失活,因此,在连接或末端标记之前,可以不用去除热敏磷酸酶。 

来源

克隆有 TAB5 AP 基因的 E. coli 菌株,该基因最初克隆于质粒 pNI 中,后来重新克隆于质粒 pEGTAB7-4.1 中。 

反应条件

1X 热敏磷酸酶反应缓冲液
[50 mM Bis Tris-丙烷 HCl,1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2(pH 6.0 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:80℃ 加热 2 分钟。 

质保声明

热敏磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义

 
1 μg 经内切酶消化产生 5´ 凹陷末端的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制 > 95% 的 DNA 再环化(通过转化 E. coli 细胞来检测)。单位活性检测条件请联系我们。
 

浓度

5,000 units/ml。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。  

小牛肠碱性磷酸酶(CIP)(停产有替代) 货 号 #M0290L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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小牛肠碱性磷酸酶(CIP)(停产有替代)                              收藏

小牛肠碱性磷酸酶(CIP)(停产有替代)               货   号                  #M0290L 小牛肠碱性磷酸酶(CIP)(停产有替代)               货   号                  #M0290L 小牛肠碱性磷酸酶(CIP)(停产有替代)               货   号                  #M0290L

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5,000 units
2,999.00

#M0290S
1,000 units
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停产通知

 请注意:该产品已停产,库存售完为止,替代产品为M0525

特性

 DNA 和 RNA 的去磷酸化

 克隆载体去磷酸化,防止载体自连
 测序或 SNP 分析前除去 PCR 反应中dNTP 和焦磷酸盐
 T4 PNK 标记 5´ DNA 末端前的去磷酸化

概述

小牛肠碱性磷酸酶(CIP)催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外,CIP 水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸(NTP 和 dNTP)。CIP 在分子生物学研究中应用广泛,如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团,用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中,对线性载体去磷酸化,防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。CIP 也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP,用于制备测序模板和 SNP 分析。 

来源

 小牛肠粘膜。

反应条件

1X CutSmart 反应缓冲液
[50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2,100 μg/ml BSA(pH 7.9 @ 25℃)],37℃ 温育。

质保声明

小牛肠碱性磷酸酶(CIP)经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义

1 单位指在 1 ml 反应体系中,37℃ 条件下,1 分钟催化 1 μmol 的对硝基苯磷酸盐(PNPP)水解成对硝基苯酚所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们。  

浓度

10,000 units/ml。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。  

热稳定无机焦磷酸酶 货 号 #M0296L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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热稳定无机焦磷酸酶                              收藏

热稳定无机焦磷酸酶               货   号                  #M0296L 热稳定无机焦磷酸酶               货   号                  #M0296L 热稳定无机焦磷酸酶               货   号                  #M0296L

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1,250 units
3,249.00

#M0296S
250 units
809.00

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特性

  增强 DNA 复制

热稳定无机焦磷酸酶               货   号                  #M0296L

概述

无机焦磷酸酶(PPase)催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐。 

P207–4 + H20 → 2HP04–2

来源

重组 E. coli 菌株,携带从极度耐热的 Thermococus litoralis 中克隆的无机焦磷酸酶基因。 

单位定义

1 单位指标准反应条件下 [0.5 ml 反应体系,50 mM Tricine(pH 8.5),1 mM MgCl2 和 0.32 mM PPi,75℃ 反应 10 分钟],每分钟催化无机焦磷酸盐生成 1 μmol 磷酸盐的酶量。 

浓度

2,000 units/ml。 

无机焦磷酸酶(E. coli) 货 号 #M0361L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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无机焦磷酸酶(E. coli)                              收藏

无机焦磷酸酶(E. coli)               货   号                  #M0361L 无机焦磷酸酶(E. coli)               货   号                  #M0361L 无机焦磷酸酶(E. coli)               货   号                  #M0361L

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#M0361L
50 units
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#M0361S
10 units
749.00

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特性

 反转录反应中提高 RNA 产量
 增强 DNA 复制 

概述

无机焦磷酸酶(E. coli)催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐。

P207–4 + H20 → 2HP04–2 

来源

无机焦磷酸酶(大肠杆菌)纯化自携带 E.coli 无机焦磷酸酶基因的重组 E. coli 菌株。
 
无机焦磷酸酶(酵母)纯化自重组 E. coli 菌株,携带有从酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)克隆的 ppa 基因和蟾分枝杆菌(Mycobacterium xenopi)GyrA 内含肽的融合基因。由 Biohelix(现为 Quidel公司的全资子公司)研发,由 New England Biolabs生产。

质保声明

无机焦磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。 

单位定义

1 单位指标准反应条件下每分钟催化无机焦磷酸盐生成 1 μmol 磷酸盐所需的酶量。 

浓度

100 units/ml。 

参考文献

 

虾碱性磷酸酶(rSAP) 货 号 #M0371L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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虾碱性磷酸酶(rSAP)                              收藏

虾碱性磷酸酶(rSAP)                货   号                  #M0371L 虾碱性磷酸酶(rSAP)                货   号                  #M0371L 虾碱性磷酸酶(rSAP)                货   号                  #M0371L 虾碱性磷酸酶(rSAP)                货   号                  #M0371L

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#M0371L
2,500 units
2,929.00

#M0371S
500 units
729.00

#M0371V
250 units
389.00

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特性

 DNA 和 RNA 的去磷酸化

 克隆载体去磷酸化,防止载体自连
 测序或 SNP 分析前除去 PCR 反应中dNTP 和焦磷酸盐
 T4 PNK 标记 5´ DNA 末端前的去磷酸化

概述

虾碱性磷酸酶(rSAP)是热敏感的重组碱性磷酸酶,rSAP 与野生型酶一样,不包含任何亲和标签或其他修饰。rSAP 非特异性的催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外,rSAP 水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸(NTP 和 dNTP)。rSAP 在分子生物学研究中应用广泛,如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团,用于后续的克隆和探针末端标记。rSAP 也可以用来处理 PCR 反应中的 dNTP,用于制备测序模板和 SNP 分析。rSAP 在 65℃ 温育 5 分钟即可完全、不可逆失活,因此,在连接或末端标记之前,可以不用去除 rSAP。 

来源

来自毕赤酵母菌(Pichia pastoris),其克隆有北极虾(Pandalus borealis)碱性磷酸酶基因(1, 2)。 

反应条件

1X CutSmart 反应缓冲液。37℃ 温育。
热失活:65℃ 温育 5 分钟。 

质保声明

rSAP 经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位是指 1 ml 反应体系中,37℃ 条件下水解 1 μmol 对硝基苯酚磷酸盐 PNPP(NEB #P0757)所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

1,000 units/ml。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

ATP 双磷酸酶 货 号 #M0398L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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ATP 双磷酸酶                              收藏

ATP  双磷酸酶                货   号                  #M0398L ATP  双磷酸酶                货   号                  #M0398L ATP  双磷酸酶                货   号                  #M0398L ATP  双磷酸酶                货   号                  #M0398L

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50 units
3,559.00

#M0398S
10 units
879.00

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特性

 高效将 ATP 转化为 AMP
 在 DNA 测序循环中去除脱氧核糖核苷酸
 将 5´ 端三磷酸化的 RNA 转化为可连接的单磷酸化 RNA
 将 5´ 端三磷酸化的 RNA 转化为单磷酸 RNA,后者可被 5´ 核酸外切酶 XRN-1(NEB #M0338)切割
 提供 10 倍高浓度产品 

概述

ATP 双磷酸酶(重组酶,E. coli)是一种高效 ATP 双磷酸酶。该酶可相继催化去除 ATP 的磷酸基团生成ADP,然后 ADP 生成 AMP,释放无机磷酸盐。该酶为重组酶,是三磷酸腺苷双磷酸酶的一个亚型。它可以水解三磷酸和双磷酸核苷以及脱氧核糖核苷生成相应的单磷酸核糖核苷。三磷酸腺苷双磷酸酶可以相继去除 γ 和 β 磷酸基团,将 5´ 端三磷酸化的 RNA 转化为单磷酸化 RNA。 

来源

纯化自大肠杆菌,其携带有编码马铃薯 ATP 双磷酸酶的基因(S. tuberosum apyrase)。 

反应条件

1X Apyrase 反应缓冲液。
[20 mM MES, 50 mM NaCl, 5 mM CaCl2, 1 mM DTT,0.05% Tween 20,(pH 6.5 @ 25℃)]。

热失活:65℃ 温育 20 分钟。 

质保声明

ATP 双磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中,1X Apyrase 反应缓冲液,30℃ 条件下,1 分钟内催化 1 μmol ATP(1 μM, NEB #P0756)释放 1 μmol 无机磷酸盐所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

500 units/ml。 

注意事项

Apyrase 对 ATP 和 ADP 的催化活性比高达 14:1。
Apyrase 是一种钙激酶。在 Apyrase 反应缓冲液中,Mg2+ 代替 Ca2+,Apyrase 大约有 50% 的活性。
作为金属离子依赖性的酶,EGTA 和 EDTA 可以抑制 Apyrase 的活性。
在 NEBuffers 1.1、2.1、3.1 和 CutSmart Buffer 中大约有 30% 的活性。
Apyrase 不会去除真核 mRNA 5´ 端的帽结构。 

无机焦磷酸酶(Yeast) 货 号 #M2403L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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无机焦磷酸酶(Yeast)                              收藏

无机焦磷酸酶(Yeast)               货   号                  #M2403L 无机焦磷酸酶(Yeast)               货   号                  #M2403L 无机焦磷酸酶(Yeast)               货   号                  #M2403L

货 号
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价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存

#M2403L
50 units
3,149.00

#M2403S
10 units
779.00

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特性

 反转录反应中提高 RNA 产量
 增强 DNA 复制  

概述

无机焦磷酸酶(酵母)催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐。

P207–4 + H20 → 2HP04–2 
 

来源

无机焦磷酸酶(酵母)纯化自重组 E. coli 菌株,携带有从酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)克隆的 ppa 基因和蟾分枝杆菌(Mycobacterium xenopi)GyrA 内含肽的融合基因。由 Biohelix(现为 Quidel公司的全资子公司)研发,由 New England Biolabs 生产。

质保声明

无机焦磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。  

单位定义

1 单位指标准反应条件下每分钟催化无机焦磷酸盐生成 1 μmol 磷酸盐所需的酶量。  

浓度

100 units/ml。  

参考文献

  

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 绿色荧光 货号11953-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 绿色荧光

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 绿色荧光

货号 11953 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于磷酸酶的试剂盒,碱性磷酸酶是广泛分布于人体各脏器器官中,其中以肝脏为最多其次为肾脏,骨骼、肠、和胎盘等组织,。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA 或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端,并生成一分子的有机基团和一分子的无机磷酸。碱性磷酸酶不是单一的酶,而是一组同功酶。碱性磷酸酶在ELISA、免疫组化,Northern, Southern 和 Western blot分析中有很高的灵敏度。它广泛地用于多种生物学分析(特别是免疫分析)和基于ELISA的疾病诊断。Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 *绿色荧光* 用FDP,一种灵敏的碱性磷酸酶绿色荧光底物来定量检测溶液中、细胞抽提液,固相物质表面(例如PVDF膜)的碱性磷酸酶活性。本试剂盒提供所有必需组分,包括我们最佳的产品组合和分析方法,并且与可用于HTS(高通量筛选)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备碱性磷酸酶工作溶液(50μL)
2.添加碱性磷酸酶标准品或测试样品(50μL)
3.在室温或37°C孵育10 – 30分钟
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光强度(Cutfoff = 515 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 FDP(250X):
将100μLDMSO(组分D)加入到FDP小瓶(组分A)中以制备250X FDF储备溶液。 应立即使用FDP储备溶液。

1.2 碱性磷酸酶标准溶液(100 U / mL):
将100μL含0.1%BSA(H2O-0.1%BSA)的蒸馏水加入碱性磷酸酶标准品(组分C,10单位)中,得到100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液。 注意:碱性磷酸酶标准溶液不稳定。

 

2.标准溶液

碱性磷酸酶标准
将10μL100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液加入990μLH2O-0.1%BSA中,生成1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液。 取1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液,进行1:10(AS7),然后在H2O-0.1%BSA中进行1:3连续稀释,得到碱性磷酸酶标准品(AS6-AS1)的连续稀释液。

 

3.工作溶液

将20μL250XFDP储备溶液加入5 mL分析缓冲液(组分B)中并充分混合以制备碱性磷酸酶工作溶液。 注意:避光。

点击查看细胞制备指南

 

样品操作及分析

表1.碱性磷酸酶标准品和实心黑色96孔微孔板中的测试样品的布局。 AS =碱性磷酸酶标准品(AS1-AS7,0.1至100 mU / mL); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
AS1 AS1
AS2 AS2
AS3 AS3    
AS4 AS4    
AS5 AS5    
AS6 AS6    
AS7 AS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释(0.1至100 mU / mL)
BL 50ul H2O – 0.1% BSA
TS 50ul 测试样本

1.在上清液中进行碱性磷酸酶测定:

1.1根据表1和2中提供的布局制备碱性磷酸酶标准品(AS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。注意:根据需要准备细胞或组织样本。应丢弃未使用的碱性磷酸酶标准品系列稀释液。

1.2向碱性磷酸酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL碱性磷酸酶工作溶液,使总碱性磷酸酶测定体积为100μL/孔。对于384孔板,在每个孔中加入25μL碱性磷酸酶工作溶液,总体积为50μL/孔。

1.3将反应在所需温度下孵育10至30分钟,避光。可选:在30分钟孵育结束时,加入50μL/孔(对于96孔板)或25μL/孔(对于384孔板)的终止溶液(组分E)。

1.4用荧光板读数器在激发= 490±10,发射= 525±10nm(截止= 515nm)监测荧光增加。

 

2.在细胞中运行碱性磷酸酶测定:

2.1根据需要处理细胞。

2.2从细胞板中完全除去生长培养基。 注意:由于生长培养基与FDP的干扰,重要的是从细胞板中完全除去生长培养基。

2.3用5mL蒸馏水将1mL稀释的5mL碱性磷酸酶工作溶液稀释。

2.4向细胞孔中加入100μL(对于96孔板)或50μL(对于384孔板)1:1稀释的碱性磷酸酶工作溶液。

2.5将反应在所需温度下孵育30至60分钟,避光。 可选:在30分钟孵育结束时加入50μL/孔(对于96孔板)或25μL/孔(对于384孔板)的终止溶液(组分E)。

2.6用荧光板读数器在激发= 490±10,发射= 525±10nm(截止= 515nm)监测荧光增加。

 

参考文献

Development and validation of bioengineered intestinal tubules for translational research aimed at safety and efficacy testing of drugs and nutrients
Authors: Paulus GM Jochems, Jeroen van Bergenhenegouwen, Anne Metje van Genderen, Sophie T Eis, Livia JF Wilod Versprille, Harry J Wichers, Prescilla V Jeurink, Johan Garssen, Rosalinde Masereeuw
Journal: Toxicology in Vitro (2019)

Rapid detection of Escherichia coli in beverages using genetically engineered bacteriophage T7
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DRG axon elongation and growth cone collapse rate induced by Sema3A are differently dependent on NGF concentration
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Lambda 蛋白磷酸酶(Lambda PP) 货 号 #P0753L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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Lambda 蛋白磷酸酶(Lambda PP)                              收藏

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概述

Lambda 蛋白磷酸酶(Lambda PP)是一种 Mn2+ 依赖型蛋白磷酸酶,对磷酸化的丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸残基均有活性。Lambda PP 也可作用于磷酸化的组氨酸残基。

来源

重组 E. coli 菌株,携带有 Lambda 噬菌体 ORF221开放阅读框(Dr.D.Barford 惠赠)。

反应条件

1X 蛋白金属磷酸酶(PMP)缓冲液 [50 mM HEPES(pH 7.5 @ 25 ℃),100 mM NaCl,2 mMDTT 和 0.01% Brij 35] 。添加 1 mM MnCl2,30℃ 温育。
热失活:在 50 mM Na2EDTA 存在的条件下,65℃ 加热 1 小时。

随酶提供的试剂

10X 蛋白金属磷酸酶(PMP)缓冲液
10X MnCl2(10 mM)

分子量

25 kDa。

质量保证

无蛋白酶污染。

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中,30℃ 条件下 1 分钟内水解 1 nmol 的对硝基苯酚磷酸盐(50mM,NEB #P0757)所需要的酶量。

浓度

400,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的相关文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

碱性磷酸酶[CIAP] 货号11900-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

碱性磷酸酶[CIAP]

碱性磷酸酶[CIAP]

碱性磷酸酶[CIAP]    货号11900 货号 11900 存储条件
规格 5000 U 价格 1164
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:11900

产品名称:碱性磷酸酶[CIAP]

规格:5000 U

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:6个月

 

产品物理化学光谱特性

外观:固体

溶剂:水

 

产品介绍

牛小肠碱性磷酸酶(CIP或CIAP)非特异性地催化DNA和RNA磷酸单酯5’和3’末端的去磷酸化。 CIAP还水解核糖以及脱氧核糖核苷三磷酸(NTP和dNTP)。 CIAP可用于许多分子生物学应用,例如去除DNA和RNA的磷酸化末端,以便随后用于探针的克隆或末端标记。 在克隆中,去磷酸化阻止线性化质粒DNA的重新连接。CIAP还可以用于降解PCR反应中未掺入的dNTP,以制备用于DNA测序或SNP分析的模板。 CIAP结合物已与多种有色或荧光AP底物结合广泛用于免疫学分析和测试中。 AAT Bioquest提供了大量的荧光AP底物,用于开发基于AP的ELISA分析和测试。

 

参考文献

CXCL12-CXCR4 Interplay Facilitates Palatal Osteogenesis in Mice.
Authors: Verheijen, Nanne and Suttorp, Christiaan M and van Rheden, René E M and Regan, Raymond F and Helmich, Maria P A C and Kuijpers-Jagtman, Anne Marie and Wagener, Frank A D T G
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