Annexin V-APC 偶联物 货号: A6080S/A6080L 规格: 0.1 mL/1 mL

Annexin V-APC 偶联物

产品货号: A6080S/A6080L

产品规格: 0.1 mL/1 mL

目录价(元):467/3536

推荐仪器:流式细胞仪

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产品概述:

储存条件

4℃避光冷藏,请勿冻存。有效期见外包装

 

光谱特性

Annexin V-APCEx/Em = 650/660 nm

 

产品介绍

Annexin V(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36 KDCa2+依赖性磷脂结合蛋白,可与磷脂酰丝氨酸(PS)选择性结合。磷脂酰丝氨酸(PS)主要分布在细胞膜内侧,即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期,不同类型的细胞都会把磷脂酰丝氨酸外翻到细胞表面,暴露在细胞外环境中。此时,使用荧光蛋白APC标记的 Annexin V,即 Annexin V-APC,与外翻的磷脂酰丝氨酸(PS)结合,就可用流式细胞仪直接检测到磷脂酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。正常细胞不会被Annexin V-APC所染色,发生凋亡或坏死的细胞会被Annexin V-APC所染色。Annexin V-APC可以与部分非渗透性的细胞核染料 ( 7-AAD/PI ) 等联合使用,区分处于不同凋亡时期的细胞。

 

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

2. 为降低细胞凋亡进程,孵育过程可在冰上操作,但孵育时间至少延长至30 min

3. 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后 1 h之内进行分析。

4. 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI 摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与 Annexin V-APC的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用 EDTAEDTA 会影响 Annexin V  PS 的结合。

5. 贴壁细胞用胰蛋白酶消化后,建议在最佳培养条件和培养基中恢复约30 min后染色,避免假阳性。

6. 为了避免洗涤细胞时损失细胞,在吸液时可以用大的 Tip 头套上小的 Tip 头吸液。

7. 染料的最佳使用浓度由具体实验要求确定。

8. 荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

9. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

Annexin V-APC 偶联物 货号:               A6080S/A6080L  规格:               0.1 mL/1 mL A6080S/A6080L    
MSDS:

MSDS A6080 Annexin V-APC

APC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号: A6030S/A6030M/A6030L 规格: 10T/50T/100T

APC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒

产品货号: A6030S/A6030M/A6030L

产品规格: 10T/50T/100T

目录价(元):317/1194/1769

推荐仪器:流式细胞仪(主推)、荧光显微镜

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产品概述:

储存条件
4℃ 避光冷藏,请勿冻存。有效期见外包装。

组分  

规格

 A6030S10T

 A6030M50T

 A6030L100T

A. 1×Annexin V 结合缓冲液

10 mL

50 mL

50 mL×2

B. Annexin V-APC

50 μL

250 μL

500 μL

C. PI

100 μL

500 μL

1 mL

储存条件
4℃ 避光冷藏,请勿冻存。有效期见外包装。

光谱特性
Annexin V-APC: Ex/Em = 650/660 nm
PI: Ex/Em=535 nm/617 nm (with DNA)

产品介绍
Annexin V(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,可于磷脂酰丝氨酸(PS)选择性结合。磷脂酰丝氨酸(PS)主要分布在细胞膜内侧,即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期,不同类型的细胞都会把磷脂酰丝氨酸外翻到细胞表面,暴露在细胞外环境中。此时,使用远红外荧光蛋白APC标记的Annexin V,即Annexin V-APC,与外翻的磷脂酰丝氨酸(PS)结合,就可用流式细胞仪或荧光显微镜直接检测到磷脂酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。对于坏死或晚期凋亡的细胞,由于细胞完整性已经被破坏,Annexin V-APC则可以进入胞浆与处于磷脂层内侧的 PS 结合,从而也使坏死细胞呈现远红外荧光。
碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种 DNA 结合染料,它可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞的细胞核。PI可以由488,532或546 nm的激光激发,呈现红色荧光。


注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 为降低细胞凋亡进程,孵育过程可在冰上操作,但孵育时间至少延长至30 min。
3. 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后 1 h之内进行分析。
4. 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI 摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与 Annexin V-APC的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用 EDTA,EDTA 会影响 Annexin V 与 PS 的结合。
5. 贴壁细胞用胰蛋白酶消化后,建议在最佳培养条件和培养基中恢复约30 min后染色,避免假阳性。
6. 为了避免洗涤细胞时损失细胞,在吸液时可以用大的 Tip 头套上小的 Tip 头吸液。
7. 染料的最佳使用浓度由具体实验要求确定。
8. 荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
9. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

APC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号:               A6030S/A6030M/A6030L  规格:               10T/50T/100T A6030S/A6030M/A6030L    
MSDS:

MSDS A6030 Annexin V-APC&PI
常见问题解答:

为何染色结果显示细胞凋亡率过高?

1. 凋亡时间处理过长,使细胞全部死亡。建议重新摸索细胞凋亡条件,使细胞处于不同的凋亡状态。
2. 对于贴壁细胞,胰蛋白酶消化时间过长或机械刮擦细胞会暂时破坏质膜,使Annexin V能够与细胞膜胞内面上的磷脂酰丝氨酸结合,导致假阳性染色。建议在胰蛋白酶消化或机械刮擦细胞后,让细胞在最佳细胞培养条件和培养基中培养约30分钟,以恢复其膜完整性。

实验结果使用什么仪器观察?
实验结果可以通过流式细胞仪和荧光显微镜进行观察,但更推荐使用流式细胞仪。因为正常的细胞和凋亡的细胞膜上都有磷脂酰丝氨酸(PS),只是凋亡细胞膜外更多,可以结合更多的Annexin V,流式细胞仪更灵敏,可以区分出微小差异,将正常细胞与凋亡细胞分成不同的两群,但如果用荧光显微镜,可能观察不到这一差别,尤其是贴壁细胞。若要在成像测定中检测细胞凋亡,推荐使用SuperView™ 488 Caspase-3 Assay Kit for Live Cells。

流式细胞仪检测细胞凋亡,结果图中的各个象限代表什么状态的细胞?
左上角:Annexin V-/PI+,机械损伤细胞;右上角: AnnexinV+/PI+,晚期凋亡细胞或坏死;右下角:AnnexinV+/PI-,早期凋亡细胞;左下角:AnnexinV-/PI-,正常细胞。

这款试剂盒可同时检测出凋亡率和细胞周期分布吗?
不可以。检测细胞凋亡时PI结合的是核酸,包括DNA和RNA。而PI用于检测细胞周期时需要只结合DNA,由于RNA的干扰,用细胞凋亡检测试剂盒测出来的细胞周期不准。同时,凋亡检测与周期检测时PI的工作浓度以及样本处理都不一样。 如果需要进行细胞周期检测,推荐Cell Cycle and Apoptosis Kit(C6031)

各象限代表的细胞状态问题?
Q1:(AnnexinV-染料)-/PI+,此区域的细胞为坏死细胞。也可能有少数的晚期凋亡细胞在其中,甚至机械损伤的细胞也包含其中。Annexin V-/PI+越多,实验结果越不可信,建议实验中尽量控制这一象限细胞比例。
Q2: (AnnexinV+染料)+/PI+,此区域的细胞为晚期凋亡细胞或坏死。
Q3:(AnnexinV-染料)+/PI-,此区域的细胞为早期凋亡细胞。
Q4:(AnnexinV-染料)-/PI-,此区域的细胞为活细胞。

APC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号:               A6030S/A6030M/A6030L  规格:               10T/50T/100T


假阳性问题?

1. 消化液中含有EDTA或消化时间过长引起的假阳性。Annexin V和PS的结合需要Ca2+,而EDTA是Ca2+螯合剂,使用含有EDTA的胰酶会造成假阴性。其次消化时间不宜过长,吹打细胞要轻柔,因为胰酶的过度消化和机械损伤都会引起细胞膜的损伤,造成假阳性。细胞消化下来后,建议在培养箱中在孵育30min,使细胞膜恢复完整性,避免假阳性,或者将细胞报讯在含2% BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
2. 如果样品来源于血液,必须去除血液中的血小板,因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,干扰实验结果。建议:可以含有EDTA的缓冲液200g离心去除血小板, 最后细胞多洗几遍,减小EDTA螯合钙离子产生的影响。
3. 神经细胞膜容易破坏外翻,导致假阳性,所以Annexin V/PI 双染法流式检测细胞凋亡不适用于神经细胞。
4. 诱导时间过长。一般情况下诱导几个小时就可以出现早期凋亡,因此通常不需要处理大于48小时以上,诱导时间过长会使营养物质耗尽,导致细胞状态差,假阳性结果偏高。

荧光染料选择的问题?
1. 实验样本是否带荧光,因为感染病毒或质粒转染的细胞往往带GFP荧光,GFP与YF488/FITC通道重叠,不能选择YF488/FITC标记的Annexin V,此时如果只有488 nm一根激光管可以用PE标记Annexin V,用7-AAD代替PI,若有633 nm激光管,可以改用YF647 Annexin V代替YF488。
2. 如果流式细胞仪带有488 nm和633 nm两个或以上激光管,首先考虑用APC或YF647标记 Annexin V,因为它和PI通道几乎不用考虑光重叠问题,可以减少调节补偿的烦恼,如果只有488 nm激光管则可选择YF488/FITC标记的Annexin V。
3. 处理因素是否带有荧光,本实验室就碰到过一个促凋亡药物Doxorubicin本身发红色荧光,对PI通道的检测造成严重干扰,而且浓度越大干扰越明显。这时建议选用A6079或Y6102 。

圈门问题?
1.要特别注意在FSC/SSC圈门时,所选细胞范围会对结果造成较大影响,所以在分析数据时,要把所有细胞都圈进FSC/SSC的门内,这样实验结果才会更可信。如图,使细胞群大概位于对角线上,并且细胞群较集中,群内细胞比例要在80%以上,如果细胞全部圈入,细胞比例才50%或者更低,说明细胞被压在了坐标轴上,这时要重新调节FSC和SSC。
2.贴壁细胞做Annexin V凋亡检测,通常分群不太规则,这时我们可以根据不加药细胞来画不规则的十字门。如上面图形的设门方式:
APC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号:               A6030S/A6030M/A6030L  规格:               10T/50T/100TAPC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号:               A6030S/A6030M/A6030L  规格:               10T/50T/100T


免疫染色与凋亡染色顺序问题?

Annexin V凋亡染色可以和抗体一起对细胞进行染色吗?
可以,但建议Annexin V和其它抗体分开染色。例如Annexin V、PI和CD3、CD8同时标记淋巴细胞,可以先在PBS中标记CD3/CD8后洗去,再在Binding buffer(含钙离子)中标记Annexin V。

这款试剂盒可同时检测出凋亡率和细胞周期分布吗?
不可以。检测细胞凋亡时PI结合的是核酸,包括DNA和RNA。而PI用于检测细胞周期时需要只结合DNA,由于RNA的干扰,用细胞凋亡检测试剂盒测出来的细胞周期不准。同时,凋亡检测与周期检测时PI的工作浓度以及样本处理都不一样。 若果需要进行细胞周期检测,推荐Cell Cycle and Apoptosis Kit(C6031)

固定、冷冻、切片或解离的组织,还可以做流式细胞分析吗?
不建议做流式细胞分析。因为流式细胞分析要求细胞分散、单个,活性好,这些状态下的样本外膜上的PS及膜的完整性都受到了影响,因此无法依赖膜的完整性区分健康细胞和凋亡细胞。组织在冻存、复温的过程中会有大量的细胞死亡,同时经过这一过程的组织在分离成单个细胞的时候会形成许多细胞碎片,不宜上流式检测,所以用于流式检测的标本最好是新鲜标本,即取材后立即检测,效果最好。 液氮保存的组织块,可以将组织标本进行切片,然后做原位染色,观察组织细胞的凋亡。

Annexin V可以用在植物和细菌中吗?
Annexin V也可以用在植物和细菌中检测凋亡,具体实验步骤可参考相关文献。
使用本产品的文献:

参考文献
1.Terminating the criminal collaboration in pancreatic cancer: Nanoparticle-based synergistic therapy for overcoming fibroblast-induced drug resistance.
应用方向:检测胰腺导管腺癌(PDAC)细胞的凋亡

2.Ribosomal protein L23 negatively regulates cellular apoptosis via the RPL23/Miz-1/c-Myc circuit in higher-risk myelodysplastic syndrome.
应用方向:检测高危骨髓增生异常综合征(MDS)患者CD34+细胞的凋亡

3.Chlamydia trachomatis plasmid-encoded protein Pgp3 inhibits apoptosis via the PI3K-AKT-mediated MDM2-p53 axis.
应用方向:检测Hela细胞的凋亡

APC(别藻蓝蛋白) 货号: A6071 规格: 1 mg

APC(别藻蓝蛋白)

产品货号: A6071

产品规格: 1 mg

目录价(元):1035

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产品概述:

产品参数
外观:蓝色液体
浓度:详见产品标签
Ex/Em = 651/662 nm
分子量:~105,000 daltons

APC(别藻蓝蛋白) 货号:               A6071  规格:               1 mg

图1.APC在PBS溶液中的吸收光谱和发射光谱。

储存条件
4℃避光保存,避免冷冻。有效期见外包装。

产品介绍

藻胆蛋白由许多亚基组成,每个亚基具有蛋白质骨架,线性四吡咯发色团与之共价结合。藻红蛋白(红色)和藻蓝蛋白(蓝色)是两种主要的藻胆蛋白。藻红蛋白(PE)的吸收最大值介于490和570 nm之间,而藻蓝蛋白(PC)的吸收最大值在610和665 nm之间。一般来说,藻胆蛋白在含有硫酸铵溶液中,冷藏储存时具有良好的长期稳定性。纯化的藻胆蛋白在酸性或碱性条件下可能分解成亚基,但在室温下,在中性溶液中,浓度大于0.1 mg/mL时相对稳定。解离的亚基通常比天然色素具有较低的着色和荧光。建议所有藻胆蛋白及其结合物(最好是在中性缓冲溶液中)冷藏保存,不能冷冻。
藻胆蛋白(包括B-藻红蛋白(B-PE),R-藻红蛋白(R-PE)和别藻蓝蛋白(APC))是用于生物检测的超灵敏荧光染料。 它们灵敏度比常规有机荧光团高100倍以上,即使在流式细胞仪和免疫分析等实际应用中也是如此。藻胆蛋白结合抗体的灵敏度通常远高于相应的基于分子共轭物的有机抗体。
别藻蓝蛋白(APC)是从螺旋藻(一种蓝绿藻)中分离的藻胆蛋白。与其他藻胆蛋白一样,APC是具有极高的吸收率和高量子效率的荧光物质。它是一种蛋白质,通过常规蛋白质交联技术可以很容易地与抗体和其他蛋白质连接,而不会改变其光谱特征。别藻蓝蛋白在主要的藻胆蛋白中是最不稳定的,在低浓度下(包括某些实验浓度)易于解离。CL-APC是指α和β亚基化学交联而形成的比APC更稳定的结构。交联的别藻蓝蛋白在水溶液中具有改善的稳定性。

注意事项
1. 该产品为溶液形式,溶液为含有硫酸铵的中性缓冲液。
2. 该产品请于4℃保存,避免冷冻。
3. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。


说明书:

APC(别藻蓝蛋白) 货号:               A6071  规格:               1 mg A6071    

APC Antibody Labeling Kits(APC抗体标记试剂盒) 货号: S601122S/S601122M/S601122L 规格: 50μg/100μg/500μg

APC Antibody Labeling Kits(APC抗体标记试剂盒)

产品货号: S601122S/S601122M/S601122L

产品规格: 50μg/100μg/500μg

目录价(元):1250/1680/3980

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产品概述:

产品内容

组分

S601122S (50 μg)

S601122M (100 μg)

S601122L (500 μg)

A: Modified APC

1 vial

1 vial

1 vial

B: Linking Reagent

1 vial

1 vial

1 vial

C: Storage Buffer

100 μL

100 μL

100 μL

D: Ultrafiltration vial (MWCO=10KDa)

2 each

2 each

2 each

 
储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。

产品应用
APC抗体标记可以兼容NaN3、低浓度的甘油、Tris和甘氨酸。试剂盒里提供的微型超滤离心管可以在标记前快速去除不兼容的小分子抗体稳定剂。
我们还提供酶标记和荧光标记的 Super-n-stain®试剂盒(请访问www.uelandy.com)。

注意事项
1. 管子从冰箱拿出需先恢复至室温,再揭开管子封口膜打开产品,避免产品回潮,影响产品使用效果。


说明书:

APC Antibody Labeling Kits(APC抗体标记试剂盒) 货号:               S601122S/S601122M/S601122L  规格:               50μg/100μg/500μg S601122S/S601122M/S601122L    
MSDS:

MSDS S601122 APC Antibody Labeling Kits
使用本产品的文献:

参考文献
1.Paraoxonase 2 decreases renal reactive oxygen species production, lowers blood pressure, and mediates dopamine D2 receptor-induced inhibition of NADPH oxidase
应用方向:polyclonal rabbit anti-PON2 antibody/  polyclonal rabbit anti-D2R antibody 

2.The Q loops of the human multidrug resistance transporter ABCB1 are necessary to couple drug binding to the ATP catalytic cycle
应用方向:Primary antibody 4E3

3.Increased Metabolite Levels of Glycolysis and Pentose Phosphate Pathway in Rabbit Atherosclerotic Arteries and Hypoxic Macrophage
应用方向:anti-Ki-67 antibody/anti-macrophage antibody / anti-SMC antibody

4.Mucosal immunoglobulins at respiratory surfaces mark an ancient association that predates the emergence of tetrapods
应用方向:rabbit anti-trout IgT / mouse anti-trout IgM / rabbit anti-Ich

5.Data ofrationalprocessoptimization for the production of a full IgG and its Fab fragment from hybridoma cells
应用方向:IgG

6.Adenoviral L4 33K forms ring-like oligomers and stimulates ATPase activity of IVa2: implications in viral genome packaging
应用方向:polyclonal anti-IVa2 and anti-33K antibodies

7.Principal cell activity induces spine relocation of adult-born interneurons in the olfactory bulb
应用方向:Anti-synaptophysin antibody

8.Enhancing proteasome-inhibitory activity and specificity of bortezomib by CD38 targeted nanoparticles in multiple myeloma
应用方向:anti-CD38 chitosan NPs

APC Goat Anti-Mouse IgG (H&L)(APC羊抗鼠二抗) 货号: A6119S/A6119M/A6119L 规格: 20μL/100μL/500μL

APC Goat Anti-Mouse IgG (H&L)(APC羊抗鼠二抗)

产品货号: A6119S/A6119M/A6119L

产品规格: 20μL/100μL/500μL

目录价(元):288/1200/3900

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产品概述:

产品参数

Ex/Em: 650/660 nm

 

储存条件

-20℃避光保存,有效期见外包装。

 

储存缓冲液

50 mM Tris Base,95 mM NaCl,10 mg/mL BSA,50%甘油。

 

产品介绍

APC Goat Anti-Mouse IgG (H&L)用于免疫荧光染色。抗体为亲和纯化级羊抗鼠IgG,与鼠IgG免疫反应性良好;与人IgG、兔IgG等无交叉反应。

 

使用方法

APC Goat Anti-Mouse IgG (H&L)用于免疫荧光染色时的推荐稀释比例为1:200-1:1000,可根据抗原以及抗体的具体情况进行调整。

按照96孔板,100 μL/孔,20 μL规格可使用40-200次,100 μL规格可使用200-1000次,500 μL规格可使用1000-5000次。

 

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

3. 为避免反复冻融,可对本产品进行小量分装。


说明书:

APC Goat Anti-Mouse IgG (H&L)(APC羊抗鼠二抗) 货号:               A6119S/A6119M/A6119L  规格:               20μL/100μL/500μL A6119S/A6119M/A6119L    

APC Goat Anti-Rabbit IgG (H&L)(APC羊抗兔二抗) 货号: A6120S/A6120M/A6120L 规格: 20μL/100μL/500μL

APC Goat Anti-Rabbit IgG (H&L)(APC羊抗兔二抗)

产品货号: A6120S/A6120M/A6120L

产品规格: 20μL/100μL/500μL

目录价(元):288/1200/3900

大包装询价


产品概述:

产品参数

Ex/Em: 650/660 nm

 

储存条件

-20℃避光保存,有效期见外包装。

 

储存缓冲液

50 mM Tris Base,95 mM NaCl,10 mg/mL BSA,50%甘油。

 

产品介绍

APC Goat Anti-Rabbit IgG (H&L)用于免疫荧光染色。抗体为亲和纯化级羊抗兔IgG,与兔IgG免疫反应性良好;与人IgG、鼠IgG等无交叉反应。

 

使用方法

APC Goat Anti-Rabbit IgG (H&L)用于免疫荧光染色时的推荐稀释比例为1:200-1:1000,可根据抗原以及抗体的具体情况进行调整。

按照96孔板,100 μL/孔,20 μL规格可使用40-200次,100 μL规格可使用200-1000次,500 μL规格可使用1000-5000次。

 

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

3. 为避免反复冻融,可对本产品进行小量分装。


说明书:

APC Goat Anti-Rabbit IgG (H&L)(APC羊抗兔二抗) 货号:               A6120S/A6120M/A6120L  规格:               20μL/100μL/500μL A6120S/A6120M/A6120L    

预活化APC-Cy7马来酰亚胺(Preactivated APC-Cy7 Maleimide) 货号: P0111 规格: 1mg

预活化APC-Cy7马来酰亚胺(Preactivated APC-Cy7 Maleimide)

产品货号: P0111

产品规格: 1mg

目录价(元):2766

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产品概述:

产品规格:1 mg

分子量:~105 kDa
Extinction coefficient (cm-1 M-1):700000

货号

名称

Ex/Em

P0110

预活化APC-Cy5.5马来酰亚胺(Preactivated APC-Cy5.5 Maleimide)

650/690 nm

P0111

预活化APC-Cy7马来酰亚胺(Preactivated APC-Cy7 Maleimide)

650/785 nm

P0112

预活化APC-YF750马来酰亚胺(Preactivated APC-YF750 Maleimide)

650/780 nm


储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。

产品介绍

预活化APC-Cy/YF马来酰亚胺(Preactivated APC-Cy/YF Maleimide)是一种巯基反应染料,可与蛋白上游离的巯基反应。活化后的染料很容易和蛋白或抗体结合,且不改变APC-Cy/YF的光谱特性。

注意事项
1. 标记不同的抗体,所需染料与抗体的标记比例可能不同,当排除抗体质量、标记步骤等其他可能影响标记结果的因素后,可考虑降低抗体质量来达到较好的标记效果。
2. 荧光染料均存在淬灭,请注意避光,以减缓荧光淬灭。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

预活化APC-Cy7马来酰亚胺(Preactivated APC-Cy7 Maleimide) 货号:               P0111  规格:               1mg P0111    

预活化APC马来酰亚胺(Preactivated APC Maleimide) 货号: P0100 规格: 5mg

预活化APC马来酰亚胺(Preactivated APC Maleimide)

产品货号: P0100

产品规格: 5mg

目录价(元):6460

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产品概述:

产品参数
Ex/Em = 651/662 nm
分子量:~105 kDa
Extinction coefficient (cm-1 M-1):700000

储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。

产品介绍

预活化APC马来酰亚胺(Preactivated APC Maleimide)是一种巯基反应染料,可与蛋白上游离的巯基反应。活化后的染料很容易和蛋白或抗体结合,且不改变APC的光谱特性。

注意事项
1. 标记不同的抗体,所需染料与抗体的标记比例可能不同,当排除抗体质量、标记步骤等其他可能影响标记结果的因素后,可考虑降低抗体质量来达到较好的标记效果。
2. 荧光染料均存在淬灭,请注意避光,以减缓荧光淬灭。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

预活化APC马来酰亚胺(Preactivated APC Maleimide) 货号:               P0100  规格:               5mg P0100    

Buccutite APC抗体标记试剂盒 标记100ug抗体 货号1311-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Buccutite APC抗体标记试剂盒 标记100ug抗体

Buccutite APC抗体标记试剂盒 标记100ug抗体

Buccutite APC抗体标记试剂盒 标记100ug抗体    货号1311 货号 1311 存储条件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格 2 Labelings 价格 6564
Ex (nm) 651 Em (nm) 660
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Buccutite APC 抗体标记试剂盒提供了一种以微观方式标记抗体的最便捷方法。APC是红色荧光蛋白,其激发波长为651nm,发射波长为662nm。 AAT Bioquest提供这种Buccutite 快速标记试剂盒,以促进APC与抗体和其他蛋白质(如链霉抗生物素蛋白和其他二级试剂)的结合。 Buccutite APC共轭试剂盒为抗体与APC结合提供了一种强大而方便的方法。该试剂盒包括预活化的APC和反应缓冲液。缀合的抗体可用于WB,ELISA和IHC应用。该试剂盒足以进行2次标记反应,每次反应最多100μg抗体。任何新抗体试剂的最佳比例必须通过实验确定。我们的试剂盒提供预活化的APC,以促进APC与抗体和其他蛋白质(如链霉抗生物素蛋白和其他二级试剂)的结合。我们的预活化APC已准备好结合,产生比常规繁琐的基于SMCC的缀合化学高得多的产率。此外,我们的预活化APC通过其蛋白质丰富的氨基与蛋白质缀合,而SMCC化学靶向必须通过抗体还原而再生的硫醇基团。Buccutite RPE抗体标记试剂盒是美国AAT Bioquest研发的产品。

点击查看光谱

产品说明书

实验方案

操作步骤

1.运行Antibody-Buccutite MTA反应

1.1将抗体溶液直接加入到Buccutite MTA(组分B)的小瓶中,并通过反复移液几次将其充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。

1.2将抗体-Buccutite MTA反应混合物在室温下保持30-60分钟。 注意:如果需要,抗体-Buccutite MTA反应混合物可以旋转或摇动更长时间。

 

2.制备抗体-APC缀合物

4.1通过向Buccutite FOL活化的APC(组分A)的小瓶中加入50μLddH2O制备Buccutite FOL活化的PE溶液,通过反复移液几次充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。

4.2将整瓶Buccutite FOL活化的APC溶液混合到纯化的抗体-Buccutite MTA溶液(来自步骤纯化抗体-Buccutite MTA溶液)中,充分混合并在室温下旋转混合物1小时。

4.3抗体-APC结合物现在可以使用了。 注意:立即使用时,抗体-APC结合物需要用您选择的缓冲液稀释。 注意:对于长期储存,需要浓缩或冷冻干燥抗体-APC结合物溶液。

 

3.抗体-APC共轭物的储存

抗体缀合物应在载体抗体(例如0.1%牛血清白蛋白)存在下以> 0.5mg / mL储存。 当在2mM叠氮化钠存在下储存并避光时,抗体-PE缀合物溶液可以在4℃下储存两个月而没有显着变化。 对于更长时间的储存,可以将抗体-APC缀合物冻干并在≤-20℃下储存。

 

参考文献

Chromophore attachment to phycobiliprotein beta-subunits: phycocyanobilin:cysteine-beta84 phycobiliprotein lyase activity of CpeS-like protein from Anabaena Sp. PCC7120
Authors: Zhao KH, Su P, Li J, Tu JM, Zhou M, Bubenzer C, Scheer H.
Journal: J Biol Chem (2006): 8573

Excitation energy transfer from phycobiliprotein to chlorophyll d in intact cells of Acaryochloris marina studied by time- and wavelength-resolved fluorescence spectroscopy
Authors: Petrasek Z, Schmitt FJ, Theiss C, Huyer J, Chen M, Larkum A, Eichler HJ, Kemnitz K, Eckert HJ.
Journal: Photochem Photobiol Sci (2005): 1016

Single-molecule spectroscopy selectively probes donor and acceptor chromophores in the phycobiliprotein allophycocyanin
Authors: Loos D, Cotlet M, De Schryver F, Habuchi S, Hofkens J.
Journal: Biophys J (2004): 2598

Evaluation of Tolypothrix germplasm for phycobiliprotein content
Authors: Prasanna R, Prasanna BM, Mohammadi SA, Singh PK.
Journal: Folia Microbiol (Praha) (2003): 59

Isolation and characterisation of phycobiliprotein rich mutant of cyanobacterium Synechocystis sp
Authors: Prasanna R, Dhar DW, Dominic TK, Tiwari ON, Singh PK.
Journal: Acta Biol Hung (2003): 113

Co-ordinated expression of phycobiliprotein operons in the chromatically adapting cyanobacterium Calothrix PCC 7601: a role for RcaD and RcaG
Authors: Noubir S, Luque I, Ochoa de Alda JA, Perewoska I, Tandeau de Marsac N, Cobley JG, Houmard J.
Journal: Mol Microbiol (2002): 749

Phycobiliprotein genes of the marine photosynthetic prokaryote Prochlorococcus: evidence for rapid evolution of genetic heterogeneity
Authors: Ting CS, Rocap G, King J, Chisholm SW.
Journal: Microbiology (2001): 3171

Novel activity of a phycobiliprotein lyase: both the attachment of phycocyanobilin and the isomerization to phycoviolobilin are catalyzed by the proteins PecE and PecF encoded by the phycoerythrocyanin operon
Authors: Zhao KH, Deng MG, Zheng M, Zhou M, Parbel A, Storf M, Meyer M, Strohmann B, Scheer H.
Journal: FEBS Lett (2000): 9

Phycobiliprotein-Fab conjugates as probes for single particle fluorescence imaging
Authors: Triantafilou K, Triantafilou M, Wilson KM.
Journal: Cytometry (2000): 226

[Phycobiliprotein and fluorescence immunological assay]
Authors: Wu P.
Journal: Sheng Li Ke Xue Jin Zhan (2000): 82

 

相关产品

产品名称 货号
Buccutite APC抗体标记试剂盒 标记25ug抗体 Cat#1313
Buccutite PerCP抗体标记试剂盒 标记25ug抗体 Cat#1353
Buccutite RPE抗体标记试剂盒 标记100ug抗体 Cat#1310

说明书
Buccutite APC抗体标记试剂盒 标记100ug抗体.pdf

Buccutite APC抗体标记试剂盒 标记25ug抗体 货号1313-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Buccutite APC抗体标记试剂盒 标记25ug抗体

Buccutite APC抗体标记试剂盒 标记25ug抗体

Buccutite APC抗体标记试剂盒 标记25ug抗体    货号1313 货号 1313 存储条件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格 2 Labelings 价格 3924
Ex (nm) 651 Em (nm) 660
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Buccutite APC 抗体标记试剂盒提供了一种以微观方式标记抗体的最便捷方法。APC是红色荧光蛋白,其激发波长为651nm,发射波长为662nm。 AAT Bioquest提供这种Buccutite 快速标记试剂盒,以促进APC与抗体和其他蛋白质(如链霉抗生物素蛋白和其他二级试剂)的结合。 Buccutite APC共轭试剂盒为抗体与APC结合提供了一种强大而方便的方法。该试剂盒包括预活化的APC和反应缓冲液。整个过程仅需要两次简单的混合,无需进一步纯化。缀合的抗体可用于WB,ELISA和IHC应用。该试剂盒足以进行2次标记反应,每次反应最多25μg抗体。任何新抗体试剂的最佳比例必须通过实验确定。我们的试剂盒提供预活化的APC,以促进APC与抗体和其他蛋白质(如链霉抗生物素蛋白和其他二级试剂)的结合。我们的预活化APC已准备好结合,产生比常规繁琐的基于SMCC的缀合化学高得多的产率。此外,我们的预活化APC通过其蛋白质丰富的氨基与蛋白质缀合,而SMCC化学靶向必须通过抗体还原而再生的硫醇基团。Buccutite APC抗体标记试剂盒是美国AAT Bioquest研发的产品。

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实验方案

操作步骤

1.运行Antibody-Buccutite MTA反应

1.1将抗体溶液直接加入到Buccutite MTA(组分B)的小瓶中,并通过反复移液几次将其充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。

1.2将抗体-Buccutite MTA反应混合物在室温下保持30-60分钟。 注意:如果需要,抗体-Buccutite MTA反应混合物可以旋转或摇动更长时间。

 

 

2.制备抗体-APC缀合物

4.1通过向Buccutite FOL活化的APC(组分A)的小瓶中加入50μLddH2O制备Buccutite FOL活化的APC溶液,通过反复移液几次充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。

4.2将整瓶Buccutite FOL活化的APC溶液混合到纯化的抗体-Buccutite MTA溶液(来自步骤纯化抗体-Buccutite MTA溶液)中,充分混合并在室温下旋转混合物1小时。

4.3抗体-APC结合物现在可以使用了。 注意:立即使用时,抗体-APC结合物需要用您选择的缓冲液稀释。 注意:对于长期储存,需要浓缩或冷冻干燥抗体-APC结合物溶液。

 

3.抗体-APC共轭物的储存

抗体缀合物应在载体抗体(例如0.1%牛血清白蛋白)存在下以> 0.5mg / mL储存。 当在2mM叠氮化钠存在下储存并避光时,抗体-APC缀合物溶液可以在4℃下储存两个月而没有显着变化。 对于更长时间的储存,可以将抗体-APC缀合物冻干并在≤-20℃下储存。

 

参考文献

Chromophore attachment to phycobiliprotein beta-subunits: phycocyanobilin:cysteine-beta84 phycobiliprotein lyase activity of CpeS-like protein from Anabaena Sp. PCC7120
Authors: Zhao KH, Su P, Li J, Tu JM, Zhou M, Bubenzer C, Scheer H.
Journal: J Biol Chem (2006): 8573

Excitation energy transfer from phycobiliprotein to chlorophyll d in intact cells of Acaryochloris marina studied by time- and wavelength-resolved fluorescence spectroscopy
Authors: Petrasek Z, Schmitt FJ, Theiss C, Huyer J, Chen M, Larkum A, Eichler HJ, Kemnitz K, Eckert HJ.
Journal: Photochem Photobiol Sci (2005): 1016

Single-molecule spectroscopy selectively probes donor and acceptor chromophores in the phycobiliprotein allophycocyanin
Authors: Loos D, Cotlet M, De Schryver F, Habuchi S, Hofkens J.
Journal: Biophys J (2004): 2598

Evaluation of Tolypothrix germplasm for phycobiliprotein content
Authors: Prasanna R, Prasanna BM, Mohammadi SA, Singh PK.
Journal: Folia Microbiol (Praha) (2003): 59

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Co-ordinated expression of phycobiliprotein operons in the chromatically adapting cyanobacterium Calothrix PCC 7601: a role for RcaD and RcaG
Authors: Noubir S, Luque I, Ochoa de Alda JA, Perewoska I, Tandeau de Marsac N, Cobley JG, Houmard J.
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Phycobiliprotein genes of the marine photosynthetic prokaryote Prochlorococcus: evidence for rapid evolution of genetic heterogeneity
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Novel activity of a phycobiliprotein lyase: both the attachment of phycocyanobilin and the isomerization to phycoviolobilin are catalyzed by the proteins PecE and PecF encoded by the phycoerythrocyanin operon
Authors: Zhao KH, Deng MG, Zheng M, Zhou M, Parbel A, Storf M, Meyer M, Strohmann B, Scheer H.
Journal: FEBS Lett (2000): 9

Phycobiliprotein-Fab conjugates as probes for single particle fluorescence imaging
Authors: Triantafilou K, Triantafilou M, Wilson KM.
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Authors: Wu P.
Journal: Sheng Li Ke Xue Jin Zhan (2000): 82

 

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说明书
Buccutite APC抗体标记试剂盒 标记25ug抗体.pdf