iFluor 546羊抗兔免疫球蛋白(H+L)

	货号	16618	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 ug	价格	1008
	Ex (nm)	541	Em (nm)	557
	分子量	~150000	溶剂	Water
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：16618

产品名称：iFluor 546羊抗兔免疫球蛋白(H+L)

规格：200 ug

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

产品物理化学光谱特性

分子量：N/A

溶剂：水

激发波长(nm)：541

发射波长(nm)：557

产品介绍

iFluor 546羊抗兔免疫球蛋白(H+L)是美国AAT Bioquest生产的荧光标记二抗，AAT Bioquest的iFluor 染料针对标记蛋白质（特别是抗体）进行了优化。这些染料是明亮的，光稳定的，并且对蛋白质的淬灭作用最小。它们可以被荧光仪器的主要激光线（例如350、405、488、555和633 nm）很好地激发。iFluor 546山羊抗兔IgG（H + L）偶联物的荧光激发和发射最大值分别约为〜541 nm和〜557 nm。这些光谱特性使其成为AlexaFluor®546山羊抗兔IgG（H + L）偶联物（AlexaFluor®是Invitrogen的商标）的绝佳替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的iFluor 546羊抗兔免疫球蛋白(H+L)。 

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参考文献

Overexpression of CXCR2 predicts poor prognosis in patients with colorectal cancer.
Authors: Jingkun Zhao, Baochi Ou, Hao Feng, Puxiongzhi Wang, Shuai Yin, Congcong Zhu, Shenjie Wang, Chun Chen, Minhua Zheng, Yaping Zong
Journal: Oncotarget (2017)

Cadherin-12 enhances proliferation in colorectal cancer cells and increases progression by promoting EMT
Authors: Junjun Ma, Jingkun Zhao, Jun Lu, Puxiongzhi Wang, Hao Feng, Yaping Zong, Baochi Ou, Minhua Zheng, Aiguo Lu
Journal: Tumor Biology (2016): 1–12

The migration and differentiation of hUC-MSCsCXCR4/GFP encapsulated in BDNF/chitosan scaffolds for brain tissue engineering
Authors: Chuanjun Huang, Longxiang Zhao, Jun Gu, Dekang Nie, Yinan Chen, Hao Zuo, Wei Huan, Jinlong Shi, Jian Chen, Wei Shi
Journal: Biomedical Materials (2016): 035004

Transplantation of RADA16-BDNF peptide scaffold with human umbilical cord mesenchymal stem cells forced with CXCR4 and activated astrocytes for repair of traumatic brain injury
Authors: W Shi, CJ Huang, XD Xu, GH Jin, RQ Huang, JF Huang, YN Chen, SQ Ju, Y Wang, YW Shi
Journal: Acta Biomaterialia (2016): 247–261

相关产品

Gelite 橙色核酸凝胶染色试剂盒

	货号	17594	存储条件	室温储存不要冷冻, 避免光照
	规格	1 Kit	价格	2604
	Ex (nm)	495	Em (nm)	540
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：17594

产品名称：Gelite 橙色核酸凝胶染色试剂盒

规格：1kit

储存条件：保存在冰箱-15℃避光干燥

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

外观：液体

激发波长（nm）：495

发射波长（nm）：540

产品介绍

Gelite 橙色核酸凝胶染色试剂盒 是美国AAT Bioquest生产的核酸染料，Cyber Orange 是一种极其敏感的核酸凝胶染料，可使用标准的300 nm UV透照仪和Polaroid 667黑白印刷胶片检测凝胶中的DNA或RNA。 与Cyber Green 染色剂一样，这种出色的敏感性可以归因于独特的染料特性的结合。 由于与核酸结合的Cyber Orange 染料在〜495 nm和〜300 nm处均显示出最大激发光（最大发射量为〜537 nm），因此它可与多种仪器兼容，包括紫外线落射照明器和透射照明器以及 蓝光透射灯，以及基于汞弧灯和氩离子激光的凝胶扫描仪。我们的Gelite 橙色核酸凝胶染色凝胶试剂盒包括我们的Cyber Orange 核酸染色剂，具有优化且稳定的操作流程。 它为凝胶中的核酸样品染色提供了方便的操作方案。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Gelite 橙色核酸凝胶染色试剂盒 。 

产品说明书

样品实验方案

溶液配制

工作溶液

将1μLGelite 橙色（组分A）添加到200μL5X凝胶上样缓冲液（组分B）中。 通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。

操作步骤

1.根据需要准备DNA样品。

2.将4 µL Gelite Orange工作溶液加入16 µL DNA样品中，并充分混合。 电泳前，在室温下孵育5-15分钟。

3.根据您的标准方案运行凝胶。

4.使用300 nm紫外线或254 nm透照器或使用长路径绿色滤光片（例如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片）的基于激光的凝胶扫描仪对凝胶成像。

参考文献

A Broadly Reactive One-Step SYBR Green I Real-Time RT-PCR Assay for Rapid Detection of Murine Norovirus
Authors: Hanaki K, Ike F, Kajita A, Yasuno W, Yanagiba M, Goto M, Sakai K, Ami Y, Kyuwa S.
Journal: PLoS One (2014): e98108

A SYBR Green I based real time RT-PCR assay for specific detection and quantitation of Peste des petits ruminants virus
Authors: Abera T, Thangavelu A, Joy Chandran ND, Raja A.
Journal: BMC Vet Res (2014): 22

A SYBR-green I quantitative real-time reverse transcription-PCR assay for rabies viruses with different virulence
Authors: Wang L, Liu Y, Zhang S, Wang Y, Zhao J, Miao F, Hu R.
Journal: Virol Sin (2014): 131

Comparison of SYBR Green and TaqMan methods in quantitative real-time polymerase chain reaction analysis of four adenosine receptor subtypes
Authors: Tajadini M, Panjehpour M, Javanmard SH.
Journal: Adv Biomed Res (2014): 85

Detection and characterization of Leishmania (Leishmania) and Leishmania (Viannia) by SYBR green-based real-time PCR and high resolution melt analysis targeting kinetoplast minicircle DNA
Authors: Ceccarelli M, Galluzzi L, Migliazzo A, Magnani M.
Journal: PLoS One (2014): e88845

Detection of Cardamom mosaic virus and Banana bract mosaic virus in cardamom using SYBR Green based reverse transcription-quantitative PCR
Authors: Siljo A, Bhat AI, Biju CN.
Journal: Virusdisease (2014): 137

Development and comparative evaluation of SYBR Green I-based one-step real-time RT-PCR assay for detection and quantification of West Nile virus in human patients
Authors: Kumar JS, Saxena D, Parida M.
Journal: Mol Cell Probes. (2014)

Development and evaluation of SYBR Green-I based quantitative PCR assays for herpes simplex virus type 1 whole transcriptome analysis
Authors: Garvey CE, McGowin CL, Foster TP.
Journal: J Virol Methods (2014): 101

Development of a High-resolution Melting Analysis Method Based on SYBR Green-I for rs7216389 Locus Genotyping in Asthmatic Child Patients
Authors: Vali Z, Raz A, Bokharaei H, Nabavi M, Bemanian MH, Yazdi MS, Djadid ND.
Journal: Avicenna J Med Biotechnol (2014): 72

Development of a SYBR Green I based one-step real-time PCR assay for the detection of Hantaan virus
Authors: Jiang W, Wang PZ, Yu HT, Zhang Y, Zhao K, Du H, Bai XF.
Journal: J Virol Methods (2014): 145

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iFluor 594羊抗兔免疫球蛋白(H+L)

	货号	16628	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 ug	价格	1008
	Ex (nm)	588	Em (nm)	604
	分子量	~150000	溶剂	Water
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：16628

产品名称：iFluor 594羊抗兔免疫球蛋白(H+L)

规格：200μg

浓度：1mg/ml

储存条件：2-6℃，避光。为了延长该产品的保质期，添加等体积的甘油，使最终浓度为约50％的甘油，并储存在-20℃。

适用：荧光免疫、流式细胞术

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

外观：紫色粉末

溶剂：含水缓冲液

激发波长(nm)：592

发射波长(nm)：614

稀释液推荐

对于免疫荧光，建议的染色浓度为75-750ng / ml。对于流式细胞，建议浓度为1 mL染色缓冲液中500 ng-5μg/百万细胞。为了获得每种应用的最佳性能，需要仔细确定该试剂的最佳浓度。

注意：建议的工作稀释度仅供参考。建议用户使用适当的阳性和阴性对照滴定产品以用于测试。

金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最前沿、最新的AAT 产品及资讯。

图示

图1. HeLa细胞先用兔抗微管蛋白染色，再用iFluor™ 594山羊抗兔IgG（H + L）（红色）染色； 肌动蛋白丝用鬼笔环肽-iFluor™ 488共轭物染色（绿色）; 细胞核用DAPI（蓝色）染色。

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参考文献

Overexpression of CXCR2 predicts poor prognosis in patients with colorectal cancer.
Authors: Jingkun Zhao, Baochi Ou, Hao Feng, Puxiongzhi Wang, Shuai Yin, Congcong Zhu, Shenjie Wang, Chun Chen, Minhua Zheng, Yaping Zong
Journal: Oncotarget (2017)

Cadherin-12 enhances proliferation in colorectal cancer cells and increases progression by promoting EMT
Authors: Junjun Ma, Jingkun Zhao, Jun Lu, Puxiongzhi Wang, Hao Feng, Yaping Zong, Baochi Ou, Minhua Zheng, Aiguo Lu
Journal: Tumor Biology (2016): 1–12

The migration and differentiation of hUC-MSCsCXCR4/GFP encapsulated in BDNF/chitosan scaffolds for brain tissue engineering
Authors: Chuanjun Huang, Longxiang Zhao, Jun Gu, Dekang Nie, Yinan Chen, Hao Zuo, Wei Huan, Jinlong Shi, Jian Chen, Wei Shi
Journal: Biomedical Materials (2016): 035004

Transplantation of RADA16-BDNF peptide scaffold with human umbilical cord mesenchymal stem cells forced with CXCR4 and activated astrocytes for repair of traumatic brain injury
Authors: W Shi, CJ Huang, XD Xu, GH Jin, RQ Huang, JF Huang, YN Chen, SQ Ju, Y Wang, YW Shi
Journal: Acta Biomaterialia (2016): 247–261

相关产品

4%甲醛固定化溶液 ReadiUse

	货号	20010	存储条件	在2-8度冷藏保存, 避免光照
	规格	50 mL	价格	1008
	Ex (nm)		Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

我们所有的ReadiUse 试剂都需要最少的手动操作时间。这种4％甲醛固定溶液是即用型。 它通常用于保存组织以进行常规组织学检查。

样本方案

注意：以下是我们推荐的协议，仅提供指南。 应根据您的具体需求进行修改。

1.进行甲醛固定：在室温下用4％甲醛孵育细胞10-30分钟。

注意：避免使用任何含甲醇的固定剂，因为甲醇会在固定过程中损害肌动蛋白。 优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。

2.用PBS冲洗固定的细胞2-3次。

3.细胞准备好进行免疫组化/免疫荧光检测。

注意：将固定的细胞保存在4 ℃的PBS中。

参考文献

Rhinacanthin C Alleviates Amyloid-β Fibrils’ Toxicity on Neurons and Attenuates Neuroinflammation Triggered by LPS, Amyloid-β, and Interferon-γ in Glial Cells
Authors: Kai-An Chuang, Ming-Han Li, Ni-Hsuan Lin, Chih-Hsuan Chang, I Lu, I Pan, Tomoya Takahashi, Ming-Der Perng, Shu-Fang Wen
Journal: Oxidative Medicine and Cellular Longevity (2017)

Impact of siRNA targeting of β-catenin on differentiation of rat neural stem cells and gene expression of Ngn1 and BMP4 following in vitro hypoxic-ischemic brain damage
Authors: Xiaoying Zhang, Cuicui Zhu, Qiong Luo, Jv Dong, Lv Liu, Min Li, Hongtao Zhu, Xiangping Ma, Jun Wang
Journal: Molecular Medicine Reports (2016): 3595–3601

Application of interleukin-22 mediates protection in experimental acetaminophen-induced acute liver injury
Authors: Patrick Scheiermann, Malte Bachmann, Itamar Goren, Bernhard Zwissler, Josef Pfeilschifter, Heiko Mühl
Journal: The American journal of pathology (2013): 1107–1113

Synergistic activity of αvβ3 integrins and the elastin binding protein enhance cell-matrix interactions on bioactive hydrogel surfaces
Authors: Dhaval Patel, Susan E Vandromme, Michael E Reid, Lakeshia J Taite
Journal: Biomacromolecules (2012): 1420–1428

海藻糖六乙酸酯 CytoWatch 细胞渗透

	货号	20040	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	100 mg	价格	3924
	Ex (nm)		Em (nm)
	分子量	594.52	溶剂	DMSO
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：20040

产品名称：海藻糖六乙酸酯 CytoWatch 细胞渗透 

规格：100mg

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

产品物理化学光谱特性

分子量：594.52

溶剂：DMSO

激发波长(nm)：N/A

发射波长(nm)：N/A

产品介绍

海藻糖是一种天然存在的二糖，在某些单细胞和多细胞生物物种中具有超强的抗逆能力。在哺乳动物细胞中，细胞内和细胞外海藻糖的存在已被证明可以提高对冷冻和干燥的耐受性。由于哺乳动物细胞既不合成也不导入海藻糖，因此有效地细胞内递送海藻糖的新方法的开发一直在进行中。在这里，我们研究了工程海藻糖亲脂性衍生物的膜渗透性。与常规的海藻糖，海藻糖二乙酸酯（2-O-Ac-Tre）和海藻糖四乙酸酯（4-O-Ac- Tre）。一旦进入牢房 细胞内酯酶水解6-O-Ac-Tre分子，将游离海藻糖释放到细胞质中。细胞内海藻糖（加上乙酰化变体）的总浓度高达6-O-Ac-Tre细胞外浓度的10倍，达到适用于生物保存的浓度。为了描述这种累积现象，提出了扩散反应模型，并通过拟合实验数据确定了6-O-Ac-Tre的渗透性和反应动力学。进一步的研究表明，负载量和细胞内海藻糖的存在对细胞活力和功能的影响可以忽略不计。设计海藻糖化学结构而不是操纵细胞是一种无害的，细胞友好的海藻糖递送方法，

参考文献

Engineered Trehalose Permeable to Mammalian Cells
Authors: Abazari A, Meimetis LG, Budin G, Bale SS, Weissleder R, Toner M.
Journal: PLoS One (2015): e0130323

iFluor 647羊抗兔免疫球蛋白(H+L)

	货号	16642	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 ug	价格	1008
	Ex (nm)	656	Em (nm)	670
	分子量	~150000	溶剂	Water
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：16642

产品名称：iFluor 647羊抗兔免疫球蛋白(H+L)

规格：200 ug

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

产品物理化学光谱特性

分子量：N/A

溶剂：水

激发波长(nm)：654

发射波长(nm)：674

产品介绍

iFluor 647羊抗兔免疫球蛋白(H+L)是美国AAT Bioquest生产的荧光标记二抗，AAT Bioquest的iFluor 染料针对标记蛋白质（特别是抗体）进行了优化。这些染料是明亮的，光稳定的，并且对蛋白质的淬灭作用最小。它们可以被荧光仪器的主要激发光线（例如350、405、488、555和633 nm）很好地激发。iFluor 647山羊抗兔IgG（H + L）偶联物的荧光激发和发射最大值分别为〜654 nm和〜674 nm。这些光谱特性使其成为AlexaFluor®647山羊抗兔IgG（H + L）偶联物（AlexaFluor®是Invitrogen的商标）的绝佳替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的iFluor 647羊抗兔免疫球蛋白(H+L)。 

图示

图1. HeLa细胞分别与小鼠抗微管蛋白和AAT的iFluor™ 647山羊抗小鼠IgG偶联物（红色，左）或AlexaFluor®647山羊抗小鼠IgG（红色，右）一起孵育。 细胞核用Hoechst 33342（蓝色，Cat#17530）染色。

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参考文献

Overexpression of CXCR2 predicts poor prognosis in patients with colorectal cancer.
Authors: Jingkun Zhao, Baochi Ou, Hao Feng, Puxiongzhi Wang, Shuai Yin, Congcong Zhu, Shenjie Wang, Chun Chen, Minhua Zheng, Yaping Zong
Journal: Oncotarget (2017)

Cadherin-12 enhances proliferation in colorectal cancer cells and increases progression by promoting EMT
Authors: Junjun Ma, Jingkun Zhao, Jun Lu, Puxiongzhi Wang, Hao Feng, Yaping Zong, Baochi Ou, Minhua Zheng, Aiguo Lu
Journal: Tumor Biology (2016): 1–12

The migration and differentiation of hUC-MSCsCXCR4/GFP encapsulated in BDNF/chitosan scaffolds for brain tissue engineering
Authors: Chuanjun Huang, Longxiang Zhao, Jun Gu, Dekang Nie, Yinan Chen, Hao Zuo, Wei Huan, Jinlong Shi, Jian Chen, Wei Shi
Journal: Biomedical Materials (2016): 035004

Transplantation of RADA16-BDNF peptide scaffold with human umbilical cord mesenchymal stem cells forced with CXCR4 and activated astrocytes for repair of traumatic brain injury
Authors: W Shi, CJ Huang, XD Xu, GH Jin, RQ Huang, JF Huang, YN Chen, SQ Ju, Y Wang, YW Shi
Journal: Acta Biomaterialia (2016): 247–261

相关产品

iFluor 680羊抗兔免疫球蛋白(H+L)

	货号	16646	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 ug	价格	1008
	Ex (nm)	684	Em (nm)	701
	分子量	~150000	溶剂	Water
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：16646

产品名称：iFluor 680羊抗兔免疫球蛋白(H+L)

规格：200μg

浓度：1mg/ml

储存条件：2-6℃，避光。为了延长该产品的保质期，添加等体积的甘油，使最终浓度为约50％的甘油，并储存在-20℃。

适用：荧光免疫、流式细胞术

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

外观：蓝色粉末

溶剂：含水缓冲液

激发波长(nm)：682

发射波长(nm)：701

稀释液推荐

对于免疫荧光，建议的染色浓度为75-750ng / ml。对于流式细胞，建议浓度为1 mL染色缓冲液中500 ng-5μg/百万细胞。为了获得每种应用的最佳性能，需要仔细确定该试剂的最佳浓度。

注意：建议的工作稀释度仅供参考。建议用户使用适当的阳性和阴性对照滴定产品以用于测试。

金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最前沿、最新的AAT 产品及资讯。

点击查看光谱

参考文献

Overexpression of CXCR2 predicts poor prognosis in patients with colorectal cancer.
Authors: Jingkun Zhao, Baochi Ou, Hao Feng, Puxiongzhi Wang, Shuai Yin, Congcong Zhu, Shenjie Wang, Chun Chen, Minhua Zheng, Yaping Zong
Journal: Oncotarget (2017)

Cadherin-12 enhances proliferation in colorectal cancer cells and increases progression by promoting EMT
Authors: Junjun Ma, Jingkun Zhao, Jun Lu, Puxiongzhi Wang, Hao Feng, Yaping Zong, Baochi Ou, Minhua Zheng, Aiguo Lu
Journal: Tumor Biology (2016): 1–12

The migration and differentiation of hUC-MSCsCXCR4/GFP encapsulated in BDNF/chitosan scaffolds for brain tissue engineering
Authors: Chuanjun Huang, Longxiang Zhao, Jun Gu, Dekang Nie, Yinan Chen, Hao Zuo, Wei Huan, Jinlong Shi, Jian Chen, Wei Shi
Journal: Biomedical Materials (2016): 035004

Transplantation of RADA16-BDNF peptide scaffold with human umbilical cord mesenchymal stem cells forced with CXCR4 and activated astrocytes for repair of traumatic brain injury
Authors: W Shi, CJ Huang, XD Xu, GH Jin, RQ Huang, JF Huang, YN Chen, SQ Ju, Y Wang, YW Shi
Journal: Acta Biomaterialia (2016): 247–261

相关产品

Annexin V-iFluor 488标记

	货号	20071	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	100 tests	价格	2604
	Ex (nm)	491	Em (nm)	516
	分子量	~36000	溶剂	Water
	产品详细介绍

简要概述

Annexin V-iFluor 488标记是美国AAT Bioquest研发的用于检测细胞功能的探针，膜联蛋白是钙依赖性磷脂结合蛋白家族。 它们富含真核生物，属于参与信号转导的普遍存在的细胞质蛋白家族。 膜联蛋白V的优先结合配偶体是磷脂酰丝氨酸（PS），其通常保持在细胞膜的内叶（细胞质侧）。 在细胞凋亡中，PS被转移到质膜的外部小叶。 磷脂酰丝氨酸在细胞表面上的出现是细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指示，并且可以在观察到形态变化之前检测到。 我们的膜联蛋白V结合物是一组监测细胞功能的工具，旨在通过测量磷脂酰丝氨酸的易位来监测细胞凋亡。

膜联蛋白V结合物在Ca²⁺存在下与凋亡细胞表面上的PS结合，它也可以通过坏死细胞膜或死细胞并与细胞内部的PS结合。 因此，我们建议将细胞不可渗透的核染色与膜联蛋白V结合物结合使用，以区分死细胞和凋亡细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Annexin V-iFluor 488检测试剂。 

产品说明书

分析方案

概述

用测试化合物（200μL/样品）制备细胞

添加Annexin V结合物测定溶液

室温孵育30-60分钟

用流式细胞仪或荧光显微镜分析

1.用膜联蛋白V缀合物制备和孵育细胞：

1.1制备膜联蛋白V结合测定缓冲液：10mM HEPES，140mM NaCl和2.5mM CaCl₂，pH 7.4。

1.2用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。

1.3离心细胞，得到1-5×10⁵个细胞/管。

1.4将细胞重悬于200μL膜联蛋白V结合测定缓冲液中（来自步骤1.1）。

1.5在细胞中加入2μL膜联蛋白V结合物。

可选：在细胞内加入死细胞染色剂如碘化丙锭，用于坏死细胞。

1.6在室温下孵育30至60分钟，避光。

1.7在用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前，加入300μL膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）以增加体积（参见下面的步骤1.8）。

1.8使用流式细胞仪或荧光显微镜监测荧光强度（参见下面的步骤2或3）。

2.使用流式细胞仪分析：

通过使用具有适当过滤器的流式细胞仪来量化膜联蛋白V缀合物。

注意：粘附细胞上的膜联蛋白V结合流式细胞术分析未经常检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。 然而，Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。 和van Engelend等人（见参考文献1和2）。

3.使用荧光显微镜分析：

3.1移取步骤1.6的细胞悬液，用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）冲洗1-2次，然后用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）重悬细胞。 将细胞添加到盖有玻璃盖玻片的载玻片上。

注意：对于粘附细胞，建议直接在盖玻片上生长细胞。 与膜联蛋白V缀合物孵育（步骤1.6）后，用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）冲洗1-2次，并将膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）加回到盖玻片中。 在玻璃载玻片上翻转盖玻片并观察细胞。 在与膜联蛋白V缀合物孵育后，细胞也可以在2％甲醛中固定，并在显微镜下观察。

3.2在荧光显微镜下用适当的滤光片分析膜联蛋白V缀合物的凋亡细胞

数据分析

        下图是使用流式细胞仪检测膜联蛋白V-mFluor Violet 450与磷脂酰丝氨酸在Jurkat细胞凋亡中的结合活性的实例。 在活的非凋亡细胞中，膜联蛋白V-mFluor Violet 450检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡，其通常为所有细胞的2-6％。 在凋亡细胞中，膜联蛋白V-mFluor Violet 450与磷脂酰丝氨酸结合，磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上，导致染色强度增加。

图1.在Jurkat细胞中检测膜联蛋白VmFluor Violet 450和磷脂酰丝氨酸的结合活性。 将Jurkat细胞在37℃，5％CO₂培养箱中不用（蓝色）或用1μM星形孢菌素（红色）处理5小时，然后用Annexin V-mFluor Violet 450染色30分钟。 使用FACSCalibur（Becton Dickinson，San Jose，CA）流式细胞仪，使用紫外激光在Ex / Em = 405 / 450nm下测量膜联蛋白V-mFluor Violet 450的荧光强度。

参考文献

Resources-Application Notes Phenotypic and Epigenetic Mechanism of Action Determinations of Histone Methylase and Demethylase Inhibitors using Digital Widefield Microscopy
Authors: Brad Larson, Peter Banks
Journal: Experimental Biology (2017)

Targeted Magnetic Intra-Lysosomal Hyperthermia produces lysosomal reactive oxygen species and causes Caspase-1 dependent cell death
Authors: Pascal Clerc, Pauline Jeanjean, Nicolas Halalli, Michel Gougeon, Bernard Pipy, Julian Carrey, Daniel Fourmy, Véronique Gigoux
Journal: Journal of Controlled Release (2017)

Annexin V-iFluor 647标记

	货号	20074	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	100 tests	价格	2604
	Ex (nm)	656	Em (nm)	670
	分子量	~36000	溶剂	Water
	产品详细介绍

简要概述

Annexin V-iFluor 647标记是美国AAT Bioquest研发的用于检测细胞功能的探针，膜联蛋白是钙依赖性磷脂结合蛋白家族。 它们富含真核生物，属于参与信号转导的普遍存在的细胞质蛋白家族。 膜联蛋白V的优先结合配偶体是磷脂酰丝氨酸（PS），其通常保持在细胞膜的内叶（细胞质侧）。 在细胞凋亡中，PS被转移到质膜的外部小叶。 磷脂酰丝氨酸在细胞表面上的出现是细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指示，并且可以在观察到形态变化之前检测到。 我们的膜联蛋白V结合物是一组监测细胞功能的工具，旨在通过测量磷脂酰丝氨酸的易位来监测细胞凋亡。

膜联蛋白V结合物在Ca²⁺存在下与凋亡细胞表面上的PS结合，它也可以通过坏死细胞膜或死细胞并与细胞内部的PS结合。 因此，我们建议将细胞不可渗透的核染色与膜联蛋白V结合物结合使用，以区分死细胞和凋亡细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Annexin V-iFluor 647检测试剂。 

产品说明书

分析方案

概述

用测试化合物（200μL/样品）制备细胞

添加Annexin V结合物测定溶液

室温孵育30-60分钟

用流式细胞仪或荧光显微镜分析

1.用膜联蛋白V缀合物制备和孵育细胞：

1.1制备膜联蛋白V结合测定缓冲液：10mM HEPES，140mM NaCl和2.5mM CaCl₂，pH 7.4。

1.2用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。

1.3离心细胞，得到1-5×10⁵个细胞/管。

1.4将细胞重悬于200μL膜联蛋白V结合测定缓冲液中（来自步骤1.1）。

1.5在细胞中加入2μL膜联蛋白V结合物。

可选：在细胞内加入死细胞染色剂如碘化丙锭，用于坏死细胞。

1.6在室温下孵育30至60分钟，避光。

1.7在用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前，加入300μL膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）以增加体积（参见下面的步骤1.8）。

1.8使用流式细胞仪或荧光显微镜监测荧光强度（参见下面的步骤2或3）。

2.使用流式细胞仪分析：

通过使用具有适当过滤器的流式细胞仪来量化膜联蛋白V缀合物。

注意：粘附细胞上的膜联蛋白V结合流式细胞术分析未经常检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。 然而，Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。 和van Engelend等人（见参考文献1和2）。

3.使用荧光显微镜分析：

3.1移取步骤1.6的细胞悬液，用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）冲洗1-2次，然后用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）重悬细胞。 将细胞添加到盖有玻璃盖玻片的载玻片上。

注意：对于粘附细胞，建议直接在盖玻片上生长细胞。 与膜联蛋白V缀合物孵育（步骤1.6）后，用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）冲洗1-2次，并将膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）加回到盖玻片中。 在玻璃载玻片上翻转盖玻片并观察细胞。 在与膜联蛋白V缀合物孵育后，细胞也可以在2％甲醛中固定，并在显微镜下观察。

3.2在荧光显微镜下用适当的滤光片分析膜联蛋白V缀合物的凋亡细胞

数据分析

        下图是使用流式细胞仪检测膜联蛋白V-mFluor Violet 450与磷脂酰丝氨酸在Jurkat细胞凋亡中的结合活性的实例。 在活的非凋亡细胞中，膜联蛋白V-mFluor Violet 450检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡，其通常为所有细胞的2-6％。 在凋亡细胞中，膜联蛋白V-mFluor Violet 450与磷脂酰丝氨酸结合，磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上，导致染色强度增加。

图1.在Jurkat细胞中检测膜联蛋白VmFluor Violet 450和磷脂酰丝氨酸的结合活性。 将Jurkat细胞在37℃，5％CO₂培养箱中不用（蓝色）或用1μM星形孢菌素（红色）处理5小时，然后用Annexin V-mFluor Violet 450染色30分钟。 使用FACSCalibur（Becton Dickinson，San Jose，CA）流式细胞仪，使用紫外激光在Ex / Em = 405 / 450nm下测量膜联蛋白V-mFluor Violet 450的荧光强度。

参考文献

Resources-Application Notes Phenotypic and Epigenetic Mechanism of Action Determinations of Histone Methylase and Demethylase Inhibitors using Digital Widefield Microscopy
Authors: Brad Larson, Peter Banks
Journal: Experimental Biology (2017)

Targeted Magnetic Intra-Lysosomal Hyperthermia produces lysosomal reactive oxygen species and causes Caspase-1 dependent cell death
Authors: Pascal Clerc, Pauline Jeanjean, Nicolas Halalli, Michel Gougeon, Bernard Pipy, Julian Carrey, Daniel Fourmy, Véronique Gigoux
Journal: Journal of Controlled Release (2017)

iFluor 405羊抗兔免疫球蛋白(H+L)*交叉亲和 降低干扰*

	货号	16674	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 ug	价格	1272
	Ex (nm)	403	Em (nm)	427
	分子量	~150000	溶剂	Water
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：16674

产品名称：iFluor 405羊抗兔免疫球蛋白(H+L)*交叉亲和 降低干扰*

规格：200 ug

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

产品物理化学光谱特性

分子量：N/A

溶剂：水

激发波长(nm)：401

发射波长(nm)：420

产品介绍

iFluor 405羊抗兔免疫球蛋白(H+L)是美国AAT Bioquest生产的荧光标记二抗，AAT Bioquest的iFluor 染料针对标记蛋白质（特别是抗体）进行了优化。这些染料是明亮的，光稳定的，并且对蛋白质的淬灭作用最小。它们可以被荧光仪器的主要激光线（例如350、405、488、555和633 nm）很好地激发。iFluor 405山羊抗兔IgG（H + L）偶联物的荧光激发和发射最大值分别为〜401 nm和〜420 nm。这些光谱特性使其成为AlexaFluor®405山羊抗兔IgG（H + L）偶联物（AlexaFluor®是Invitrogen的商标）的绝佳替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的iFluor 405羊抗兔免疫球蛋白(H+L)。 

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参考文献

Overexpression of CXCR2 predicts poor prognosis in patients with colorectal cancer.
Authors: Jingkun Zhao, Baochi Ou, Hao Feng, Puxiongzhi Wang, Shuai Yin, Congcong Zhu, Shenjie Wang, Chun Chen, Minhua Zheng, Yaping Zong
Journal: Oncotarget (2017)

Cadherin-12 enhances proliferation in colorectal cancer cells and increases progression by promoting EMT
Authors: Junjun Ma, Jingkun Zhao, Jun Lu, Puxiongzhi Wang, Hao Feng, Yaping Zong, Baochi Ou, Minhua Zheng, Aiguo Lu
Journal: Tumor Biology (2016): 1–12

The migration and differentiation of hUC-MSCsCXCR4/GFP encapsulated in BDNF/chitosan scaffolds for brain tissue engineering
Authors: Chuanjun Huang, Longxiang Zhao, Jun Gu, Dekang Nie, Yinan Chen, Hao Zuo, Wei Huan, Jinlong Shi, Jian Chen, Wei Shi
Journal: Biomedical Materials (2016): 035004

Transplantation of RADA16-BDNF peptide scaffold with human umbilical cord mesenchymal stem cells forced with CXCR4 and activated astrocytes for repair of traumatic brain injury
Authors: W Shi, CJ Huang, XD Xu, GH Jin, RQ Huang, JF Huang, YN Chen, SQ Ju, Y Wang, YW Shi
Journal: Acta Biomaterialia (2016): 247–261

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