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荧光染料

YF®488-Phalloidin YF®488标记鬼笔环肽（绿色） 货号: YP0059S/YP0059L 规格: 50T/300T

发表于由

YF®488-Phalloidin YF®488标记鬼笔环肽（绿色）

产品货号: YP0059S/YP0059L

产品规格: 50T/300T

目录价（元）:589/2063

推荐仪器：荧光显微镜

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产品概述：

货号

名称

Abs/Em (nm)

规格

YP0059S

YF®488-Phalloidin

YF®488标记鬼笔环肽（绿色）

490/515

50T

YP0059L

300T

YP0060S

YF®555-Phalloidin

YF®555标记鬼笔环肽（橙红）

555/565

50T

YP0060L

300T

YP0052S

YF®594-Phalloidin

YF®594标记鬼笔环肽（红色）

590/617

50T

YP0052L

300T

YP0053S

YF®633-Phalloidin

YF®633标记鬼笔环肽（远红）

630/650

50T

YP0053L

300T

YP0055S

YF®680-Phalloidin

YF®680标记鬼笔环肽（远红）

681/698

50T

YP0055L

300T

YP0063S

Rhodamine-Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽（橙红）

546/575

50T

YP0063L

300T

储存条件
-20℃干燥、避光保存，有效期见外包装。若配制成水溶液，应小量分装保存。

产品介绍

鬼笔环肽是从致命的伞形毒蕈蘑菇中分离出来的一种毒素。它是特异性结合于F-肌动蛋白的双环肽。因此用荧光染料标记的鬼笔环肽可以非常方便的研究F-肌动蛋白的分布。鬼笔环肽内部，在半胱氨酸和色氨酸之间含有不常见的硫醚桥形成内环结构。在pH升高时，该硫醚被裂解，鬼笔环肽失去对肌动蛋白的亲和力。
YF®染料是我司开发的一系列新一代荧光染料，与其他荧光染料相比，在亮度，光稳定性和水溶性方面具有综合优势。荧光标记的鬼笔环肽可在纳摩尔水平染色F-肌动蛋白。在各种植物细胞或动物细胞中，标记的鬼笔环肽对大、小细丝具有相似的亲和力，平均每个肌动蛋白亚基结合一个鬼笔环肽分子。不同于抗体，鬼笔环肽与肌动蛋白的结合亲和力在不同物种间没有显着变化。非特异性染色可以忽略不计，染色和未染色区域之间的对比度非常大。鬼笔环肽将单体/聚合物的平衡转向聚合状态，将聚合临界浓度降低至30倍。鬼笔毒肽类（Phallotoxins）可通过抑制细胞松弛素的解聚，碘化钾和升高的温度，稳定F-肌动蛋白。因为鬼笔环肽缀合物很小，大约直径12-15 Å，分子量< 2000 Dal，多种肌动蛋白结合蛋白，包括肌球蛋白，原肌球蛋白和后肌钙蛋白依然可以和鬼笔环肽标记的肌动蛋白结合。更重要的是，鬼笔环肽标记的肌动蛋白丝保持功能，标记甘油肌纤维仍然收缩，标记的肌动蛋白丝仍然可以继续移动。而且荧光标记的鬼笔环肽也可用于对细胞中F-肌动蛋白进行定量研究。

注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。
2. 本产品为冻干粉形式，微量不易观察，使用前请瞬时离心，加适当溶剂溶解后使用，溶解后的溶液近乎透明色。


说明书：

YF®488-Phalloidin YF®488标记鬼笔环肽（绿色） 货号: YP0059S/YP0059L 规格: 50T/300T YP0059S/YP0059L    
MSDS：
MSDS YP0059 YF®488-Phalloidin
常见问题解答：

◆为什么我拿到的是空管？

本产品为冻干粉形式，微量不易观察，使用前请瞬时离心，加适当溶剂溶解后使用。

◆鬼笔环肽染色细胞骨架过程中，能使用甲醇固定细胞吗？

甲醇会破坏Actin蛋白，因此不能使用含有甲醇的固定液，并且使用不含甲醇的甲醛。

◆为什么用鬼笔环肽结合F-actin标记石蜡切片，没有看到信号？
当细胞和组织经由二甲苯或丙酮之类的溶剂处理时（例如组织切片脱石蜡期间），它通过阻止鬼笔环肽结合的方式来影响F-actin。可以使用通常不用有机溶剂洗涤的冷冻切片代替石蜡切片，或者可以使用抗肌动蛋白抗体。

◆鬼笔环肽染料能重复利用吗？
正常情况下染色液在使用后，可能会影响染色效果，最好不要重复使用；我们的鬼笔环肽按说明书添加，浓度较低，这是染料不能重复利用的原因。

◆鬼笔环肽染色F-Actin, 有的染上，有的没染上，并且染色信号较弱怎么办？
（1）可能是染料浓度低或孵育时间不足，建议增加染料浓度或培养时间。
（2）可能是在错误的波长下分析细胞，建议重新检查过滤器设置是否正确。

◆不进行透化步骤，鬼笔环肽直接染色固定后的细胞可以吗？
荧光标记的phalloidins，只能用于在固定透化后的组织切片、细胞培养和无细胞实验中染色F-actin。

◆染色后，没有荧光信号怎么办？
（1）检查储液、工作液配制是否有误。
（2）固定及透化步骤尤为重要，使用新鲜配置的4%多聚甲醛进行固定，使用新鲜配置的0.5% Triton X-100 进行透化。摸索最佳的固定及透化时间。
（3）摸索最佳染色工作液浓度及染色时间。

◆可以用于做流式细胞吗？
该产品主要是用于微丝的染色，一般用荧光显微镜观察结果，不推荐用流式检测。

◆可以用普通荧光显微镜观察吗？
普通的荧光显微镜也是可以检测的，激光共聚焦拍照效果会更好一些。

◆探针的浓度是多少？
请按照说明书的稀释比例进行使用，具体浓度信息未知。


使用本产品的文献：

Pyridoxine induces glutathione synthesis viaPKM2-mediated Nrf2 transactivation andconfers neuroprotection

  • Yao Wei,
  • Ming Lu,
  • Meng Mei,
  • Haoran Wang,
  • Zhitao Han,
  • Miaomiao Chen,
  • Hang Yao,
  • Nanshan Song, 
  • Xiao Ding, 
  • Jianhua Ding,
  • Ming Xiao& 
  • Gang Hu

Nature Communications volume 11

参考文献：
1.4D Super-Resolution Microscopy with Conventional Fluorophores and Single Wavelength Excitation in Optically Thick Cells and TissUEs
应用方向：人体组织切片，心脏大鼠心肌细胞和密集生长的神经元培养物

2.Fluorescent phallotoxins as probes for filamentous actin
应用方向：组织切片、动物细胞、植物细胞

3.A balance of Btk and SHIP activation regulates B-cell receptor cluster formation by controlling actin remodeling
应用方向：哺乳动物细胞：小鼠脾B细胞

4.Fluorescent phallotoxins as probes for filamentous actin
应用方向：组织切片

5.Formation of actin clusters in rat liver parenchymal cells on phalloidin poisoning as visualized by a fluorescent phallotoxin
应用方向：组织切片

6.F-actin architecture in coleoptile epidermal cells
应用方向：植物细胞

7.A Rac switch regulates random versus directionally persistent cell migration
应用方向：哺乳动物细胞： 原代人类成纤维细胞

8.A role for actin, Cdc1p, and Myo2p in the inheritance of late Golgi elements in Saccharomyces cerevisiae.
应用方向：酿酒酵母菌细胞

DiO（细胞膜绿色荧光探针） 货号: D4007 规格: 10 mg

发表于由

DiO（细胞膜绿色荧光探针）

产品货号: D4007

产品规格: 10 mg

目录价（元）:480

推荐仪器：荧光显微镜

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产品概述：

产品参数
外观：黄色固体。DiO溶于无水乙醇、无水DMSO和无水DMF，在无水DMSO中的溶解度约为10 mg/mL。较难溶解时，可以适当加热或者超声处理。
Ex/Em (MeOH) = 484/501 nm
CAS号：34215-57-1
分子式：C53H85ClN2O6
分子量：881.7
分子结构图：

DiO（细胞膜绿色荧光探针） 货号: D4007 规格: 10 mg


储存条件
4℃避光保存，有效期见外包装。

产品介绍

DiO即DiOC18(3)，是最常用的细胞膜荧光探针之一，呈现绿色荧光。DiO是一种亲脂性膜染料，进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐染色整个细胞的细胞膜。DiO在进入细胞膜之前荧光非常弱，当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，被激发后可以发出绿色荧光，具有很高的淬灭常数和激发态寿命，可以用标准的FITC滤光片检测。
DiO作为示踪剂或长期示踪剂，被广泛用于正向或逆向的，活的或固定的神经等细胞或组织。DiO通常不会显著影响细胞的生存力。DiO除了细胞膜荧光标记外，还可用于检测细胞的融合和粘附，发育或移植过程中的细胞迁移，通过FRAP（光脱色荧光恢复技术）检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
DiO染色后可进行多聚甲醛（不可使用甲醇等其他试剂）的固定，但不建议在染色后进行透化的过程。此外，在固定透化（室温下用0.1% TritonX-100 透化）后，也可以很好地进行质膜染色。DiO染色强度通常低于DiI，有时在固定组织中会完全丧失。
以每次使用100 μL染色工作液，染色工作液浓度10 μM计算，10 mg配置为工作液大概可以用11341次。

注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。
2. DiO染色固定的细胞或组织样品时，通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定，使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
3. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书：

DiO（细胞膜绿色荧光探针） 货号: D4007 规格: 10 mg D4007    
MSDS：
MSDS D4007 DiO (Green fluorescence probe for cell membrane)
常见问题解答：

◆用PBS稀释后的DiO工作液染色时出现聚沉现象，怎么处理？

因为这类细胞膜染料在水中的溶解性不好，建议用PBS稀释时稍微加入一点DMSO有机溶剂，来增加其溶解度

◆固定后的细胞，可以用DiO进行染色吗？
该类细胞膜染料可以染色固定后的细胞样本，但如果固定过程中，细胞膜破损，会影响染色的效果

◆DiO也可以染色细胞内的细胞器膜吗？
可以，因为DiO染色细胞膜是非特异性的，所以细胞器的膜也会被染上色，如果不想细胞器染色太明显，可以减少孵育时间或者将染料浓度降低

◆细胞追踪有很多产品，该如何选择？
首先确定追踪细胞的时间，然后考虑染料结合机制。
1.钙黄绿素染料（C4041）标记均匀且对短期细胞迁移示踪效果极佳，但也会被某些类型细胞迅速外排。
2.亲脂性的花青素染料，如DiI（D4010），DIO（D4007），DiA(D4059)，DiD(D4019)，DiR(D4006)能标记细胞膜而不破坏其功能，并且能持续更长时间，但如果发生膜融合则可能会染上其他细胞。此外，它们还会在透化过程中丢失。
3.CellTracker染料（C4060）更有利于长期标记，其带有温和的氯甲基反应基团使之能够与细胞组分共价结合。
4.CFDA SE（C4070）也能共价地结合于细胞组分。
在所有列出的试剂中，细胞内保留与否取决于细胞分裂的速率和细胞的固有特性（主动外排，膜和蛋白质的周转率等）。其中共价结合试剂比非共价结合的试剂展现出更长的保留时间


使用本产品的文献：

1.Overcoming the Reticuloendothelial System Barrier to Drug Delivery with a “Don’t-Eat-Us” Strategy
Yixuan Tang，Xiaoyou Wang，Jie Li，Yu Nie，Guojian Liao，Yang Yu，Chong Li
ACS NANO
应用方向：细胞膜染色  


2.Inducing Endoplasmic Reticulum Stress to Expose Immunogens: A DNA Tetrahedron Nanoregulator for Enhanced Immunotherapy
Yanhua Li，Xia Zhang，Xiuyan Wan，Xiaohan Liu，Wei Pan，Na Li，Bo Tang
Adv. Funct. Mater.

3.Curved Nanofiber Network Induces Cellular Bridge Formation to Promote Stem Cell Mechanotransduction
Qian Sun Fang Pei, Man Zhang, Bo Zhang, Ying Jin, Zhihe Zhao , Qiang Wei
Advanced Science


参考文献
1.Optimizing conditions and avoiding pitfalls for prolonged axonal tracing with carbocyanine dyes in fixed rat spinal cords
应用方向：标记示踪


2.Labeling with fluorescent carbocyanine dyes of cultured endothelial and smooth muscle cells by growth in dye-containing medium
应用方向：细胞迁移


3.A versatile flow cytometry-based assay for the determination of short- and long-term natural killer cell activity
应用方向：细胞毒性


4.Neurons secrete miR-132-containing exosomes to regulate brain vascular integrity
应用方向：标记的神经细胞外泌体


5.Microfluidic device (ExoChip) for On-Chip isolation, quantification and characterization of circulating exosomes.
应用方向：用DiO进行外泌体染色，通过荧光的强弱对不同来源样品中的外泌体进行定量分析

细菌活力/毒性检测试剂盒 货号: L6060S/L6060L 规格: 20T/100T

发表于由

细菌活力/毒性检测试剂盒

产品货号: L6060S/L6060L

产品规格: 20T/100T

目录价（元）:500/1916

推荐仪器：荧光显微镜、流式细胞仪

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产品概述：

产品内容

组分

L6060S (20T)

L6060L (100T)

A. NucGreen

20 μL

100 μL

B. EthD-III

40 μL

200 μL

注：本试剂盒次数是按照1 mL菌液加10 μL的染色工作液规定的。


光谱信息：NucGreen: Ex/Em = 503/530 nm (结合 DNA)；EthD-III: Ex/Em = 530/620 nm (结合 DNA)。

 

储存条件

-20℃ 避光保存，有效期见外包装。

 

产品介绍

细菌活力/毒性检测试剂盒包含两种荧光染料，NucGreen 是绿色核酸染料，可染色活细菌和死细菌；EthD-III 是红色核酸染料，仅染色细胞膜受损的死细菌。将 NucGreen 和 EthD-III 适当混用，具有完整细胞膜的细菌呈现绿色，而具有受损细胞膜的细菌在不同通道下可分别呈现绿色和红色。

细菌活力的常见标准是在合适的营养培养基中繁殖的能力，称为生长测定。本试剂盒通常与在液体或固体培养基中的生长测定结果有着很好的一致性。然而，在某些条件下，膜损伤的细菌可能会在营养培养基中恢复并繁殖，而这种细菌在本测定中会被认定死菌。相反，一些具有完整膜的细菌可能无法在营养培养基中繁殖，但在本测定中会被认认定活菌。因此，若本试剂盒检测结果和细菌生长测定之间有较大的差异，应考虑上述可能。

 

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。

2. 若使用孔板检测，可静置 10 min 后留少量菌液成像，能有效降低背景。

3. 为更接近真实结果，Merge图片时建议保持红色荧光与绿色荧光亮度一致。

4. 荧光染料均存在淬灭问题，实验操作时请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书：

细菌活力/毒性检测试剂盒 货号: L6060S/L6060L 规格: 20T/100T L6060S/L6060L    
MSDS：
MSDS L6060 DeadTM ViabilityCytotoxicity Assay Kit for Bacteria Cells
常见问题解答：


使用本产品的文献：

1.Multifunctional MIL-101 nanoparticles with Fenton-like reactions to Co-deliver LL-37 peptide and Vancomycin for targeted NIR imaging and Drug-resistant bacteria treatment
LuogenLai，WanqingZou，YanZhang，YuanbiaoTu，SimengLi，TongxuanXin，TianyueZhou，ShanXu，PengwuZheng，QingshanPan，WufuZhu
Chemical Engineering Journal

2.Iodinene Nanosheet-to-Iodine Molecule Allotropic Transformation for Antibiosis
Yanling You, Ya-Xuan Zhu, Junjie Jiang, Zhixin Chen, Chenyao Wu, Zhimin Zhang , Han Lin, Jianlin Shi
Journal of the American Chemical Society

FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号: F6012S/F6012M/F6012L 规格: 10T/50T/100T

发表于由

FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒

产品货号: F6012S/F6012M/F6012L

产品规格: 10T/50T/100T

目录价（元）:220/737/1244

推荐仪器：流式细胞仪（主推）、荧光显微镜

大包装询价


产品概述：

产品内容：

组分

  F6012S（10T）

  F6012M（50T）

  F6012L（100T）

   A. 1× Annexin V 结合缓冲液

10 mL

50 mL

50 mL×2

B. FITC-Annexin V

50 μL

250 μL

500 μL

C. PI

100 μL

500 μL

1 mL

储存条件
4℃避光冷藏，请勿冻存。有效期见外包装。

光谱特性
FITC-Annexin V: Ex/Em = 494/518 nm
PI: Ex/Em = 535/617 nm (with DNA)

产品介绍

FITC-Annexin V/PI凋亡试剂盒提供了一种快速简便的方法，通过标记早期凋亡细胞（绿色）和坏死或晚期凋亡的细胞（红色）检测细胞凋亡水平。产品可以使用流式细胞仪或其它荧光检测设备进行检测。
Annexin V（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，可于磷脂酰丝氨酸（PS）选择性结合。磷脂酰丝氨酸（PS）主要分布在细胞膜内侧，即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期，不同类型的细胞都会把磷脂酰丝氨酸外翻到细胞表面，暴露在细胞外环境中。此时，使用绿色荧光探针FITC标记的Annexin V，即FITC – Annexin V，与外翻的磷脂酰丝氨酸（PS）结合，就可用流式细胞仪或荧光显微镜直接检测到磷脂酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。对于坏死或晚期凋亡的细胞，由于细胞完整性已经被破坏，FITC – Annexin V则可以进入胞浆与处于磷脂层内侧的PS结合，从而也使坏死细胞呈现绿色荧光。
碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种DNA结合染料，它可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞的细胞核。PI可以由488、532或546 nm的激光激发，呈现红色荧光。

注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。
2. 为降低细胞凋亡进程，孵育过程可在冰上操作，但孵育时间至少延长至30 min。
3. 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后 1 h之内进行分析。
4. 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI 摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与 FITC-Annexin V的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后，轻摇时胰酶与细胞充分接触，然后倒掉大部分胰酶，利用剩余的少量胰酶再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用 EDTA，EDTA 会影响 Annexin V 与 PS 的结合。
5. 贴壁细胞用胰蛋白酶消化后，建议在最佳培养条件和培养基中恢复约30 min后染色，避免假阳性。
6. 为了避免洗涤细胞时损失细胞，在吸液时可以用大的 Tip 头套上小的 Tip 头吸液。
7. 染料的最佳使用浓度由具体实验要求确定。
8. 荧光染料均存在淬灭问题，保存和使用过程中请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
9. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书：

FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号: F6012S/F6012M/F6012L 规格: 10T/50T/100T F6012S/F6012M/F6012L    
MSDS：
MSDS F6012 FITC-Annexin V&PI
常见问题解答：

◆为何染色结果显示细胞凋亡率过高？

1. 凋亡时间处理过长，使细胞全部死亡。建议重新摸索细胞凋亡条件，使细胞处于不同的凋亡状态。
2. 对于贴壁细胞，胰蛋白酶消化时间过长或机械刮擦细胞会暂时破坏质膜，使Annexin V能够与细胞膜胞内面上的磷脂酰丝氨酸结合，导致假阳性染色。建议在胰蛋白酶消化或机械刮擦细胞后，让细胞在最佳细胞培养条件和培养基中培养约30分钟，以恢复其膜完整性。

◆实验结果使用什么仪器观察？
实验结果可以通过流式细胞仪和荧光显微镜进行观察，但更推荐使用流式细胞仪。因为正常的细胞和凋亡的细胞膜上都有磷脂酰丝氨酸（PS），只是凋亡细胞膜外更多，可以结合更多的Annexin V，流式细胞仪更灵敏，可以区分出微小差异，将正常细胞与凋亡细胞分成不同的两群，但如果用荧光显微镜，可能观察不到这一差别，尤其是贴壁细胞。若要在成像测定中检测细胞凋亡，推荐使用SuperView™ 488 Caspase-3 Assay Kit for Live Cells。

◆流式细胞仪检测细胞凋亡，结果图中的各个象限代表什么状态的细胞？
左上角：Annexin V-/PI+，机械损伤细胞；右上角: AnnexinV+/PI+，晚期凋亡细胞或坏死；右下角：AnnexinV+/PI-，早期凋亡细胞；左下角：AnnexinV-/PI-，正常细胞。

◆这款试剂盒可同时检测出凋亡率和细胞周期分布吗？
不可以。检测细胞凋亡时PI结合的是核酸，包括DNA和RNA。而PI用于检测细胞周期时需要只结合DNA，由于RNA的干扰，用细胞凋亡检测试剂盒测出来的细胞周期不准。同时，凋亡检测与周期检测时PI的工作浓度以及样本处理都不一样。 如果需要进行细胞周期检测，推荐Cell Cycle and Apoptosis Kit（C6031）

◆各象限代表的细胞状态问题？
Q1：(AnnexinV-染料)-/PI+，此区域的细胞为坏死细胞。也可能有少数的晚期凋亡细胞在其中，甚至机械损伤的细胞也包含其中。Annexin V-/PI+越多，实验结果越不可信，建议实验中尽量控制这一象限细胞比例。
Q2: (AnnexinV+染料)+/PI+，此区域的细胞为晚期凋亡细胞或坏死。
Q3：(AnnexinV-染料)+/PI-，此区域的细胞为早期凋亡细胞。
Q4：(AnnexinV-染料)-/PI-，此区域的细胞为活细胞。

FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号: F6012S/F6012M/F6012L 规格: 10T/50T/100T


◆假阳性问题？

1. 消化液中含有EDTA或消化时间过长引起的假阳性。Annexin V和PS的结合需要Ca2+，而EDTA是Ca2+螯合剂，使用含有EDTA的胰酶会造成假阴性。其次消化时间不宜过长，吹打细胞要轻柔，因为胰酶的过度消化和机械损伤都会引起细胞膜的损伤，造成假阳性。细胞消化下来后，建议在培养箱中在孵育30min，使细胞膜恢复完整性，避免假阳性，或者将细胞报讯在含2% BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
2. 如果样品来源于血液，必须去除血液中的血小板，因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，干扰实验结果。建议：可以含有EDTA的缓冲液200g离心去除血小板， 最后细胞多洗几遍，减小EDTA螯合钙离子产生的影响。
3. 神经细胞膜容易破坏外翻，导致假阳性，所以Annexin V/PI 双染法流式检测细胞凋亡不适用于神经细胞。
4. 诱导时间过长。一般情况下诱导几个小时就可以出现早期凋亡，因此通常不需要处理大于48小时以上，诱导时间过长会使营养物质耗尽，导致细胞状态差，假阳性结果偏高。

◆荧光染料选择的问题？
1. 实验样本是否带荧光，因为感染病毒或质粒转染的细胞往往带GFP荧光，GFP与YF488/FITC通道重叠，不能选择YF488/FITC标记的Annexin V，此时如果只有488 nm一根激光管可以用PE标记Annexin V，用7-AAD代替PI，若有633 nm激光管，可以改用YF647 Annexin V代替YF488。
2. 如果流式细胞仪带有488 nm和633 nm两个或以上激光管，首先考虑用APC或YF647标记 Annexin V，因为它和PI通道几乎不用考虑光重叠问题，可以减少调节补偿的烦恼，如果只有488 nm激光管则可选择YF488/FITC标记的Annexin V。
3. 处理因素是否带有荧光，本实验室就碰到过一个促凋亡药物Doxorubicin本身发红色荧光，对PI通道的检测造成严重干扰，而且浓度越大干扰越明显。这时建议选用A6079或Y6102 。

◆圈门问题？
1.要特别注意在FSC/SSC圈门时，所选细胞范围会对结果造成较大影响，所以在分析数据时，要把所有细胞都圈进FSC/SSC的门内，这样实验结果才会更可信。如图，使细胞群大概位于对角线上，并且细胞群较集中，群内细胞比例要在80%以上，如果细胞全部圈入，细胞比例才50%或者更低，说明细胞被压在了坐标轴上，这时要重新调节FSC和SSC。
2.贴壁细胞做Annexin V凋亡检测，通常分群不太规则，这时我们可以根据不加药细胞来画不规则的十字门。如上面图形的设门方式：
FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号: F6012S/F6012M/F6012L 规格: 10T/50T/100TFITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号: F6012S/F6012M/F6012L 规格: 10T/50T/100T

◆免疫染色与凋亡染色顺序问题?
Annexin V凋亡染色可以和抗体一起对细胞进行染色吗？
可以，但建议Annexin V和其它抗体分开染色。例如Annexin V、PI和CD3、CD8同时标记淋巴细胞，可以先在PBS中标记CD3/CD8后洗去，再在Binding buffer（含钙离子）中标记Annexin V。

◆这款试剂盒可同时检测出凋亡率和细胞周期分布吗？
不可以。检测细胞凋亡时PI结合的是核酸，包括DNA和RNA。而PI用于检测细胞周期时需要只结合DNA，由于RNA的干扰，用细胞凋亡检测试剂盒测出来的细胞周期不准。同时，凋亡检测与周期检测时PI的工作浓度以及样本处理都不一样。 若果需要进行细胞周期检测，推荐Cell Cycle and Apoptosis Kit（C6031）

◆固定、冷冻、切片或解离的组织，还可以做流式细胞分析吗？
不建议做流式细胞分析。因为流式细胞分析要求细胞分散、单个，活性好，这些状态下的样本外膜上的PS及膜的完整性都受到了影响，因此无法依赖膜的完整性区分健康细胞和凋亡细胞。组织在冻存、复温的过程中会有大量的细胞死亡，同时经过这一过程的组织在分离成单个细胞的时候会形成许多细胞碎片，不宜上流式检测，所以用于流式检测的标本最好是新鲜标本，即取材后立即检测，效果最好。 液氮保存的◆组织块，可以将组织标本进行切片，然后做原位染色，观察组织细胞的凋亡。

◆Annexin V可以用在植物和细菌中吗？
Annexin V也可以用在植物和细菌中检测凋亡，具体实验步骤可参考相关文献。
使用本产品的文献：

1.MTP18 overexpression contributes to tumor growth and metastasis and associates with poor survival in hepatocellular carcinoma
Zhang, Yu Li, Hui Chang, Hulin Du, LixUE  Hai, Jun Geng, Xilin Yan, Xiang
cell death and disease(2018) 
应用方向：流式细胞仪检测：SMMC7721和 HLF 细胞的凋亡

2.MS-275对食管鳞癌KYSE-70细胞存活、凋亡、细胞周期以及迁移的影响
刘腾飞，周建康，黄团结，王亚苹，周馨魁，张　乐，张璐玉，陈一豪，刘红涛，关方霞，马珊珊
郑州大学学报（医学版）(2018) 5 547-552
应用方向：流式细胞仪检测：食管鳞癌KYSE-70细胞的凋亡

3.Histone deacetylases inhibitor MS‐275 suppresses human esophageal squamous cell carcinoma cell growth and progression via the PI3K/Akt/mTOR pathway
Shanshan Ma  Tengfei Liu  Ling Xu  Yaping Wang  Jiankang Zhou  Tuanjie Huang  Peng Li  Hongtao Liu Yanting Zhang  Xinkui Zhou  Yuanbo Cui  Xingxing Zang  Yuming Wang  Fangxia Guan
Journal of Cellular Physiology （23 May 2019）
应用方向：细胞凋亡检测：食管鳞状癌细胞（ESCC）

4.SDHC-related deficiency of SDH complex activity promotes growth and metastasis of hepatocellular carcinoma via ROS/NFκB signaling
JibinLi，NingLiang，XiaoyuLong，JingZhao，JinYang，XiaohongDu，TaoYang，PengYuan，XiaojunHuang，JianshengZhang，XianliHe，JinliangXing
Cancer Letters Volume 461, 1 October 2019, Pages 44-55
应用方向：细胞凋亡检测:：肝细胞癌（HCC）

5.MTFP1 overexpression promotes the growth of oral squamous cell carcinoma by inducing ROS production
Tingying Xiao，Jian Sun，Zhankui Xing，Fuqiang Xie，Lan Yang，Wenjuan Ding
CELL BIOLOGY INTERNATIONAL
应用方向：细胞凋亡检测：口腔鳞状细胞（OSCC）

6.ALG-2 couples T cell activation and apoptosis by regulating proteasome activity and inflUEncing MCL1 stability
Tian-Sheng He, Wangsheng Ji, Junqi Zhang, Jing Lu，Xinqi Liu 
Cell Death & Disease（11, Article number: 5 (2020)）

7.Over‐expression of TFB2M facilitates cell growth and metastasis via activating ROS‐Akt‐NF‐κB signaling in hepatocellular carcinoma
Xilin Geng，Zhimin Gen，Hui Li，Yu Zhang，Jibin Li，Hulin Chang
liver international

8.CRIF1 overexpression facilitates tumor growth and metastasis through inducing ROS/NFκB pathway in hepatocellular carcinoma
Hulin Chang,Juntang Li,Kai Qu,Yong Wan,Sinan Liu,Wei Zheng,Zhiyong Zhang，Chang Liu
 Cell Death & Disease volume 11, Article number: 332 (2020) 

9.Caffeine Targets G6PDH to Disrupt Redox Homeostasis and Inhibit Renal Cell Carcinoma Proliferation
Huanhuan Xu,Lihong Hu, Titi Liu1, Fei Chen, Jin Li, Jing Xu, Li Jiang, Zemin Xiang, Xuanjun Wang，Jun Sheng
Frontiers in Cell and Developmental Biology

10.A Network Pharmacology Approach to Investigate the Anticancer Mechanism and Potential Active Ingredients of Rheum palmatum L. Against Lung Cancer via Induction of Apoptosis
Qing Zhang, Jia Liu, Ruolan Li, Rong Zhao, Mengmeng Zhang, Shujun Wei, Dong Ran, Wei Jin, Chunjie Wu
Frontiers in Pharmacology

11.MIEF2 over-expression promotes tumor growth and metastasis through reprogramming of glucose metabolism in ovarian cancer
Shuhua Zhao, Xiaohong Zhang, Yuan Shi, Lu Cheng, Tingting Song, Bing Wu, Jia Li & Hong Yang
Journal of Experimental & Clinical Cancer Research

12.Repurposing Erythrocytes as a “Photoactivatable Bomb”: A General Strategy for Site-Specific Drug Release in Blood Vessels
Ya-Xuan Zhu,Hao-Ran Jia,Yuxin Guo,Xiaoyang Liu,Ningxuan Zhou,Peidang Liu,Fu-Gen Wu
Small

13.Multienzyme-like Reactivity Cooperatively Impairs Glutathione Peroxidase 4 and Ferroptosis Suppressor Protein 1 Pathways in Triple-Negative Breast Cancer for Sensitized Ferroptosis Therapy
Ke Li, Chuanchuan Lin, Menghuan Li, Kun Xu, Ye He, Yulan Mao, Lu Lu, Wenbo Geng, Xuemin Li, Zhong Luo, Kaiyong Cai
ACS Nano

14.A multiple functional supramolecular system for synergetic treatments of hepatocellular carcinoma
LijingSun, LiyuanChen, KeYang, Wei FengDai, YeYang, XiumingCui, BoYang, ChengxiaoWang
International Journalof Pharmaceutics

ROS活性氧检测试剂盒 货号: R6033 规格: 1000T

发表于由

ROS活性氧检测试剂盒

产品货号: R6033

产品规格: 1000T

目录价（元）:395

推荐仪器：流式细胞仪、荧光显微镜

大包装询价


产品概述：
产品内容

组分 规格
A. DCFH-DA（10 mM） 0.1 mL
B. 活性氧阳性对照（Rosup 100 mM） 1 mL

产品参数
Ex/Em：504/529 nm

储存条件
-20℃避光保存，有效期见外包装。

产品介绍
DCFH-DA（二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯）本身无荧光，可自由透过活细胞膜进入细胞内，并被细胞内的酯酶水解，形成 DCFH，DCFH 无荧光且不能通透细胞膜，从而被细胞内的活性氧氧化生成有荧光的 DCF。根据活细胞中荧光的产生，可以判断细胞活性氧的含量和变化。用流式细胞仪或荧光显微镜可直接观察，是一种经典的组织或活细胞中活性氧检测方法。Rosup 为活性氧阳性诱导药物，根据其荧光信号强度，可分析活性氧的真正水平。

注意事项
1. 阳性对照 Rosup 一般使用浓度为 100 μM（推荐浓度 100-400 μM，具体依细胞类型而定）。通常刺激后 30 min-4 h 可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞，活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后 30 min 内观察不到活性氧的升高，可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果活性氧升高得过快，可缩短诱导时间或适当降低活性氧阳性对照的浓度。
2. 实验过程中，如果发现没有刺激的阴性对照细胞荧光也比较强，可以按照 1:2000-1:5000 稀释 DCFH-DA，使 DCFH-DA 的终浓度为 2-5 μM。探针装载的时间也可以根据情况在 15-60 min 内适当进行调整。
3. 活性氧阳性对照（Rosup）仅仅用于作为阳性对照的样品，并不是在每个样品中都需加入活性氧阳性对照。
4. 探针装载后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
说明书：

ROS活性氧检测试剂盒 货号: R6033 规格: 1000T R6033    
使用本产品的文献：

1.Identification of a new natural biflavonoids against breast cancer cells induced ferroptosis via the mitochondrial pathway 
Yang Xie，Xi Zhou，Jing Li，Xiao-Chang Yao，Wan-Li Liu，Feng-Hua Kang，Zhen-Xing Zou，Kang-Ping Xu，Ping-Sheng Xu，Gui-Shan Tan

Bioorganic Chemistry Volume 109, April 2021, 104744

2. Transcriptional characteristics and functional validation of three monocyte subsets during aging.

Chen Wang, Yating Cheng , Boyu Li , Xueping Qiu , Hui Hu , Xiaokang Zhang , Zhibing Lu and Fang Zheng

Wang et al. Immunity & Ageing (2023) 20:50

3. The immunomodulatory efects of metformin in LPS‑induced macrophages: an in vitro study.

Zhiyong Wang , Min Wang , Mao Lin , Pei Wei

Infammation Research

DiD（细胞膜红色荧光探针） 货号: D4019 规格: 10 mg

发表于由

DiD（细胞膜红色荧光探针）

产品货号: D4019

产品规格: 10 mg

目录价（元）:480

推荐仪器：荧光显微镜

大包装询价


产品概述：

产品参数
外观：可溶于乙醇、DMF和DMSO的深蓝色固体
Ex/Em (MeOH) = 644/663 nm
CAS号：362596-00-7
分子式：C67H103ClN2O3S
分子量：1052.1
分子结构图：

DiD（细胞膜红色荧光探针） 货号: D4019 规格: 10 mg

储存条件
-20℃避光保存，有效期见外包装。

产品介绍

DiD染料是亲脂性荧光染料家族成员之一，它可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当DiD与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色，这类染料在整个细胞膜上扩散，最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。DiD（远红色荧光）可以用来对活细胞进行成像和流式分析。DiD可以用633 nm He–Ne激光器激发，有着比DiI（一种常见的细胞荧光染料）更长的激发波长和发射波长，在细胞和组织染色中更有价值。
DiD染色后可进行多聚甲醛（不可使用甲醇等其他试剂）的固定，但不建议在染色后进行透化的过程。此外，在固定透化（室温下用0.1% TritonX-100 透化）后，也可以很好地进行质膜染色。
以每次使用100 μL染色工作液，染色工作液浓度5 μM计算，10 mg配置为工作液大概可以用19009次。

注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。
2. DiD染色固定的细胞或组织样品时，通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定，使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
3. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书：

DiD（细胞膜红色荧光探针） 货号: D4019 规格: 10 mg D4019    
MSDS：
MSDS D4019 DiD（Red fluorescence probe for cell membrane）
常见问题解答：

◆染色发现背景有杂点，有什么好的改进方法吗？

考虑是染料堆积，这类细胞膜染料的水溶解度不是很好，溶解时可以用水浴加热方式促进溶解；或者用PBS稀释时稍微加入一点DMSO有机溶剂，来增加其溶解度

◆细胞追踪有很多产品，该如何选择？
首先确定追踪细胞的时间，然后考虑染料结合机制。
1.钙黄绿素染料（C4041）标记均匀且对短期细胞迁移示踪效果极佳，但也会被某些类型细胞迅速外排。
2.亲脂性的花青素染料，如DiI（D4010），DIO（D4007），DiA(D4059)，DiD(D4019)，DiR(D4006)能标记细胞膜而不破坏其功能，并且能持续更长时间，但如果发生膜融合则可能会染上其他细胞。此外，它们还会在透化过程中丢失。
3.CellTracker染料（C4060）更有利于长期标记，其带有温和的氯甲基反应基团使之能够与细胞组分共价结合。
4.CFDA SE（C4070）也能共价地结合于细胞组分。
在所有列出的试剂中，细胞内保留与否取决于细胞分裂的速率和细胞的固有特性（主动外排，膜和蛋白质的周转率等）。其中共价结合试剂比非共价结合的试剂展现出更长的保留时间


使用本产品的文献：

1.Nanoparticles Targeted against Cryptococcal Pneumonia by Interactions between Chitosan and Its Peptide Ligand
Tang, Yixuan Wu, Shuang Lin, Jiaqi Cheng, Liting Zhou, Jing Xie, Jing Huang, Kexin Wang, Xiaoyou Yu, Yang Chen, Zhangbao Liao, Guojian Li, Chong   
nano letters (2018)
应用方向：染色分析

2.Overcoming the Reticuloendothelial System Barrier to Drug Delivery with a “Don’t-Eat-Us” Strategy
Yixuan Tang，Xiaoyou Wang，Jie Li，Yu Nie，Guojian Liao，Yang Yu，Chong Li
ACS NANO
应用方向：细胞膜染色成像分析

3.TRIM34 Facilitates the Formation of Multinucleated Giant Cells by Enhancing Cell Fusion and Phagocytosis in Epithelial Cells
Dakang Sun,Xinye An,Bing Ji
Experimental Cell Research Volume 384,IssUE 1,1 November 2019,111594

4.Anti-Tumor Immunity Induced by a Ternary Membrane System Derived From Cancer Cells, Dendritic Cells, and Bacteria
He Ren , Jiexin Li , Jingyu Zhang , Jingang Liu , Xingyue Yang , Nan Zhang , Qian Qiu 1, Dan Li , Yue Yu , Xiaofeng Liu , Jonathan F Lovell , Yumiao Zhang
Small


5.Natural exosomes-like nanoparticles in mung bean sprouts possesses anti-diabetic effects via activation of PI3K/Akt/GLUT4/GSK-3βsignaling pathway

Chengxun He1, Ke Wang, Jun Xia , Die Qian , Juan Guo , Lian Zhong , Dandan Tang , Xiuping Chen , Wei Peng, Yunhui Chen and Yong Tang    https://doi.org/10.1186/s12951-023-02120-w

应用方向：胰岛素依赖性跨膜载体蛋白在细胞膜上的表达


参考文献

1.Enhanced gene delivery efficiency of cationic liposomes coated with PEGylated hyaluronic acid for anti P-glycoprotein siRNA: A potential candidate for overcoming multi-drug resistance
应用方向：标记siRNA复合物进行体内成像

2.Biomimetic nanoparticles delivered hedgehog pathway inhibitor to modify tumour microenvironment and improved chemotherapy for pancreatic carcinoma
应用方向：DiD标记纳米颗粒（MNP）注射小鼠

3.Exosome uptake through clathrin-mediated endocytosis and macropinocytosis and mediating miR-21 delivery

应用方向：DiD标记的外泌体与PC12细胞共孵育

考马斯亮蓝快速染色液（免脱色） 货号: K8006 规格: 500 mL

发表于由

考马斯亮蓝快速染色液（免脱色）

产品货号: K8006

产品规格: 500 mL

目录价（元）:599

大包装询价


产品概述：
储存条件
室温保存，有效期见外包装。

产品介绍
本产品是一种可以室温下即时染色，无需脱色，无毒无刺激气味的蛋白染液。适用于各种变性及非变性的蛋白质凝胶染色，也可以用于 Western 转膜后 PAGE 胶上残余蛋白的染色可以节约大量时间，加速实验进程。

产品特点
染色快，只染蛋白不染胶，无需脱色，尤其对于蛋白纯化的实验，数分钟后可以依据蛋白染色条带结果，决定下一步实验。全程易操作，易保存，不需特殊设备，脱色后凝胶可在纯水中保存数月。
注意：胶的厚度超过 1 mm 请多加入染液并延长染色时间。

注意事项
1. 本染色液呈酸性且有轻微腐蚀性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
说明书：

考马斯亮蓝快速染色液（免脱色） 货号: K8006 规格: 500 mL K8006    
MSDS：
MSDS K8006 Coomassie Blue Staining Solution (Not Required Decolorizing)

Live & DeadTM 动物细胞活力/毒性检测试剂盒 (Calcein AM, PI) 货号: L6037S/L6037M/L6037L 规格: 30T/150T/300T

发表于由

Live & DeadTM 动物细胞活力/毒性检测试剂盒 (Calcein AM, PI)

产品货号: L6037S/L6037M/L6037L

产品规格: 30T/150T/300T

目录价（元）:202/778/1139

推荐仪器：荧光显微镜、流式细胞仪

大包装询价


产品概述：

产品内容

组分

L6037S (30T)

L6037M (150T)

L6037L (300T)

A.   4 mM Calcein AM（无水DMSO）

10 μL

50 μL

100 μL

B. 1.5 mM Propidium（PI in H2O）

50 μL

250 μL

500 μL

注：本试剂盒次数是按照流式细胞仪一个样品使用0.5 mL工作液规定的。


光谱信息：Calcein AM：Ex/Em = 494/517 nm，PI：Ex/Em=535/617 nm（结合DNA）

 

储存条件

-20˚C避光保存。注意Calcein AM容易水解，需密封干燥保存，稀释工作液需当天配制。有效期见外包装。

 

产品介绍

Live & DeadTM动物细胞活力/毒性检测试剂盒 (Calcein AM, PI)是一种检测动物细胞死活的双荧光染色试剂盒。试剂盒内的两种探针可分别通过测定细胞内酯酶活性和质膜完整性从而反映细胞活力。本试剂盒可用于荧光显微镜、流式细胞仪、酶标仪以及其他荧光检测系统。

本试剂盒可应用于大多数的真核哺乳动物细胞，包括贴壁细胞核的某些组织，但不适用于真菌和酵母。本试剂盒与相同用处的台盼蓝相比，更快捷安全且灵敏度更高。


注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。

2. 酚红或血清对于本试剂盒的检测有一定的干扰。

3. 荧光染料均存在淬灭问题，实验操作时请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书：

Live & DeadTM 动物细胞活力/毒性检测试剂盒 (Calcein AM, PI) 货号: L6037S/L6037M/L6037L 规格: 30T/150T/300T L6037S/L6037M/L6037L    
MSDS：
MSDS L6037 Live & DeadTM ViabilityCytotoxicity Assay Kit for Animal Cells (Calcein AM, PI)
常见问题解答：

◆我如何为LIVE/DEAD细胞活力实验准备死细胞对照？

有两种简单的方法。一种是通过60°C放置20分钟热灭活细胞。第二种是将细胞放入70%乙醇。乙醇固定的细胞可以在冰箱中无限期储存直到使用，可达好几年。
步骤：
a.离心细胞、使细胞沉淀并去除上清
b.固定细胞：在15mL含有细胞团的试管中加入10 mL70%冰乙醇，先开始逐滴加入后震荡，混合均匀。
c.在冰箱中储存直到使用。
d.快使用时，水洗两次且在选择的缓冲液中重悬。

◆用该试剂盒染色后，可以进行后续固定步骤吗？
染色后不可以进行固定步骤。PI作为膜非透性染料，固定后将转移到所有细胞，不再维持死细胞特异性染色。


使用本产品的文献：

1.Scutellarin potentiates vancomycin against lethal pneumonia caused by methicillin-resistant Staphylococcus aureus through dual inhibition of sortase A and caseinolytic peptidase P
Author links open overlay panelXingyeWang, LinWei, LiWang, XiaoyuChen, XiangriKong, YanheLuan, JiyuGuan, XueruiGuo, YanShi, TiedongWang, BingmeiWang, WuSong, YichengZhao
Biochemical Pharmacology

参考文献
1.Cooption of heat shock regulatory system for anhydrobiosis in the sleeping chironomid Polypedilum vanderplanki
应用方向：死活细胞染色、细胞计数

2.Connexin43 hemichannels contribute to cadmium-induced oxidative stress and cell injury
应用方向：死活细胞染色、细胞活力

3.An improved fluorescence assay for the determination of lymphocyte-mediated cytotoxicity using flow cytometry
应用方向：细胞流式

4.Visualization of keratocytes in the human cornea with fluorescence microscopy
应用方向：组织切片染色

PicoGreenTM 核酸荧光染料 货号: P2023 规格: 1mL

发表于由

PicoGreenTM 核酸荧光染料

产品货号: P2023

产品规格: 1mL

目录价（元）:2800

大包装询价


产品概述：

储存条件

4℃避光保存，有效期见外包装。

 

产品参数

Ex/Em：480/520 nm（结合dsDNA）

 

产品介绍

PicoGreen是荧光检测dsDNA并进行定量的一种产品，这种方法非常灵敏。常用于分子生物学技术：cDNA文库的构建、亚克隆的DNA片段纯化及应用，比如进行DNA定量、产物扩增和引物的进一步检测。常规的DNA含量的检测方法是在260 nm处测其吸光值。这种方法的主要缺点是核苷酸、单链核酸和蛋白质对信号的影响很大，并且还会受到核酸制备过程中污染物的干扰，无法区分DNA和RNA，而且这种方法不灵敏（5 μg/mL dsDNA溶液A260=0.1）。PicoGreen定量检测方法简单、方便，成为生物制品残留DNA检测的标准。

PicoGreen只有与dsDNA结合后才发出荧光，并且所发荧光强度与DNA浓度成正比。PicoGreen可以检测出25 pg/mL-1000 ng/mL范围内的dsDNA，且线性关系较好(R2>0.99)。

对于终体积为200 μL的检测体系，0.1 mL规格可检测200个样本，1 mL规格可检测2000个样本。

 

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。

2. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

3. PicoGreen工作液最好现配现用，以保证最佳结果。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书：

PicoGreenTM 核酸荧光染料 货号: P2023 规格: 1mL P2023    
MSDS：
MSDS P2023 PicoGreen
常见问题解答：

◆我试图对一些带有荧光基团标记的DNA进行定量。这可行吗？

 PicoGreen 染料和其它基于荧光定量的试剂不建议用于对染料偶联的核酸进行定量。核酸上携带的染料基团会干扰定量试剂的结合或荧光产生。

◆该染料能否耐受污染物？
基本不受ssDNA和RNA的影响，并且可以耐受一定浓度的盐、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白等干扰。

◆该染料能检测哪些DNA？
可检测多个来源的DNA，包括基因组DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR扩增产物


使用本产品的文献：

1.Assembly Mechanism of Highly Crystalline Selenium-Doped Hydroxyapatite Nanorods via Particle Attachment and Their Effect on the Fate of Stem Cells
Yan Li，Hang Hao，Zhengyu Zhong，Mengdie Li，Jiaqi Li，Yingying Du，Xiaodan Wu，Jianglin Wang，Shengmin Zhang
ACS Biomaterials Science&Engineering
应用方向：dsDNA含量测定

引用文献
1.Detection of mitochondrial DNA depletion in living human cells using PicoGreen staining

应用方向：胞内原位染色人线粒体DNA（mtDNA）

2.Factors Affecting Quantification of Total DNA by UV Spectroscopy and PicoGreen Fluorescence

应用方向：测量植物组织中DNA浓度

3.Use of the Fluorescent Dye PicoGreenÔ for Quantification of PCR Products after Agarose Gel Electrophoresis
应用方向：PCR产物定量

Firefly Luciferase Assay Kit（萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒） 货号: F6024S/F6024M/F6024L 规格: 50T/200T/5×200T

发表于由

Firefly Luciferase Assay Kit（萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒）

产品货号: F6024S/F6024M/F6024L

产品规格: 50T/200T/5×200T

目录价（元）:619/1415/5129

推荐仪器：化学发光仪、酶标仪或液闪测定仪

大包装询价


产品概述：

储存条件：-20℃保存，有效期见外包装


应用范围：真核基因表达调控研究

产品特点

1. 快速：细胞裂解在10-15 min内完成。

2. 方便：试剂易于配制，样品检测步骤简单。

3. 灵敏：能够检测最低10-20 mol的萤光素酶。

4. 酶的浓度线性范围可达8个数量级。

 

产品组分

组分

F6024S（50T）

F6024M（200T）

F6024L（5×200T）

A. 5×Firefly Luciferase Lysis Buffer

5 mL

20 mL

5×20 mL

B. Firefly Luciferase Assay Buffer

5 mL

20 mL

5×20 mL

C. D-Luciferin

5 mg

5 mg

5×5 mg

产品介绍

真核基因表达调控研究常用的方法是进行报告基因的检测，生物发光法又是报告基因检测最常用的有效手段。萤光素酶能催化底物萤光素的转化，并发射出光子。该产品为萤火虫萤光素酶报告基因在哺乳动物细胞中的表达提供快速、灵敏、稳定的检测方法。能够检测最低10-20 mol的萤光素酶，在10-14至10-20 mol的酶浓度范围内呈很好的线性关系。

  

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。

2. 温度会对酶的活性产生影响，因此所有试剂应放置室温后再使用。

3. 如果单管萤光测定仪测定，每个样品与测定试剂混合后到测定前的时间应保持一致。

4. 萤火虫萤光素酶催化的生物发光的最强波长为560 nm。

5. 为防止孔间干扰，建议使用白色不透光孔板。

6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书：

Firefly Luciferase Assay Kit（萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒） 货号: F6024S/F6024M/F6024L 规格: 50T/200T/5×200T F6024S/F6024M/F6024L    
常见问题解答：

◆检测的萤光数值很低怎么办？

(1）可能为转染效率低
a.优化转染实验条件，用较易转染的质粒做阳性对照（如转染过表达荧光蛋白质粒）；
b.确保转染DNA的质量，可通过酶切或琼脂糖凝胶电泳的方法对DNA质量进行鉴定；
c.选择活性较高，处于指数分裂期的细胞进行转染。
(2）可能为启动子活性低或诱导失败
a.转染后的细胞培养使用特异性诱导启动子的条件；
b.优化细胞的培养条件，提高萤光素酶的表达量；
c.更换强启动子（如SV40、CMV）。
注：海肾萤光素酶基因作为内对照，其表达应不受时期、部位、环境影响，因此常用组成型表达的TK启动子。
(3）样品裂解效率低
a.细胞培养时间不宜过长，12-36h内最好，长时间培养后，细胞可能会难裂解。
b.加入的裂解液需足量，保证细胞能够充分裂解。
(4）检测过程操作不规范
a.选择合适的检测仪器，能够检测化学发光或者生物发光的仪器都适用于该实验；
b.需加入足量底物，保证底物的饱和，否则会造成检测结果出现很大偏差；
c.室温反应。反应时各个组分（细胞裂解产物，底物工作液等）都需要调整到室温；
d.萤光素酶的半衰期一般约30min，加完底物后可立即检测，尽量在30min内完成。
(5）底物氧化失效
a.底物避光密封保存，萤火虫荧光素酶底物-20℃保存；海肾萤光素酶底物推荐-80℃保存；
b.反应工作液建议现用现配。

◆进行检测的过程中，萤光信号值太高该如何进行调整？
（1） 减少质粒转染量。
（2）细胞样品裂解后，离心取上清后检测或对裂解产物进行稀释后检测。
注：不建议通过减少底物量来降低荧光值，需要保证底物的饱和来反映萤光素酶真实的表达水平，否则会造成检测结果出现大的偏差。