SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 CAS 64987-85-5 货号4502-AAT Bioquest荧光染料

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SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 CAS 64987-85-5

SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 CAS 64987-85-5

SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 CAS 64987-85-5    货号4502 货号 4502 存储条件 在零下15度以下保存
规格 1 g 价格 9948
Ex (nm) Em (nm)
分子量 334.32 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,SMCC是一种不可裂解且可透膜的交联剂,间隔臂为8.3Å。它含有胺反应性琥珀酰亚胺酯(SE)和巯基反应性马来酰亚胺基团。NHS酯在pH 7-9下与伯胺反应形成稳定的酰胺键。马来酰亚胺与pH6.5-7.5的巯基反应形成稳定的硫醚键。SMCC的SE组与载体蛋白上的赖氨酸残基反应,将它们转化为反应性马来酰亚胺。SMCC是一种广泛用于产生稳定的马来酰亚胺激活的载体蛋白的试剂,其可以自发地与巯基反应。或者,可将这些相对稳定的马来酰亚胺活化的中间体冻干并储存,以便随后与半抗原缀合。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯。 

产品说明书

操作方案

1.制备含胺蛋白质的缀合缓冲液,蛋白质-NH 2 (缓冲液A):磷酸盐缓冲盐水(PBS,pH 7.2)或pH值为7.2至8.0的其他无胺缓冲液可用于此。

注意:避免在缀合过程中含有伯胺(如Tris或甘氨酸)和巯基的缓冲液,因为它们会与预期的反应竞争。如有必要,将样品透析或脱盐至适当的缓冲液如PBS中。

 

2.制备含巯基蛋白质的缀合缓冲液,蛋白质-SH(缓冲液B):pH为6.5-7.5的不含巯基的缓冲液可用于此。

注1:在缀合过程中避免使用含有巯基的缓冲液,因为它们会与预期的反应竞争。如有必要,将样品透析或脱盐至适当的缓冲液如PBS中。

注2:加入1-5mM EDTA有助于螯合二价金属,从而减少含巯基蛋白质中的二硫化物形成。

 

3.准备脱盐柱,将改性蛋白与过量交联剂和反应副产物分离。

 

4.在其缀合缓冲液A和缓冲液B中制备含胺蛋白质(蛋白质-NH2)和含巯基蛋白质(蛋白质-SH)溶液。

 

5.制备蛋白质1-NH 2 -SMCC(或SMCC Plus )缀合物:将适量的SMCC(或SMCC Plus )加入到缓冲液A中的含胺蛋白质溶液中。蛋白质-NH 2的浓度 决定SMCC(或SMCC Plus )摩尔过量使用。SMCC(或SMCC Plus )摩尔过量的建议体积如下,但最佳比例必须使用目标蛋白质通过实验确定:

  • 蛋白质样品<1 mg / mL使用40-80倍摩尔过量。
  • 1-4 mg / mL的蛋白质样品使用20倍摩尔过量。
  • 5-10 mg / mL的蛋白质样品使用5至10倍摩尔过量。

 

6.将上述反应混合物在室温下孵育30-60分钟或在4℃孵育2-4小时。

注1:为了在完成前停止缀合反应,加入含有还原半胱氨酸的缓冲液,其浓度比Protein-SH的巯基浓度高几倍。

注2:可以通过电泳分离和随后的蛋白质染色来估计缀合效率。

 

7.使用用共轭缓冲液A平衡的脱盐柱除去多余的SMCC(或SMCC Plus )。

 

8.将含硫醇(蛋白-SH)和脱盐的含胺蛋白(蛋白-NH 2)SMCC(或SMCC Plus )缀合物混合并混合,摩尔比对应于最终缀合物所需的摩尔比,并与亲属一致两种蛋白质上存在的巯基和活化胺的数量。

注意:与马来酰亚胺部分反应的分子必须具有游离(还原的)巯基。对于蛋白质,在室温下使用5mM TCEP还原二硫键30分钟,然后通过合适的脱盐柱两次。请注意,蛋白质(例如抗体)可能会通过完全还原其二硫键而失活。可以用2-巯基乙胺·HCl(2-MEA)实现IgG中铰链区二硫键的选择性还原。可以使用N-琥珀酰亚胺基S-乙酰硫代乙酸酯(SATA)或2-亚氨基硫杂环戊烷·盐酸盐(Traut’s Reagent)将巯基化合物添加到分子中,后者可以修饰伯胺。

 

参考文献

N-glycan targeted gene delivery to the dendritic cell SIGN receptor
Authors: Kevin Anderson, Christian Fernandez, Kevin G Rice
Journal: Bioconjugate chemistry (2010): 1479–1485

说明书
SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 CAS 64987-85-5.pdf

荧光淬灭剂Tide Quencher 4WS叠氮化物 货号2068-AAT Bioquest荧光染料

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荧光淬灭剂Tide Quencher 4WS叠氮化物

荧光淬灭剂Tide Quencher 4WS叠氮化物

荧光淬灭剂Tide Quencher 4WS叠氮化物    货号2068 货号 2068 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 3924
Ex (nm) Em (nm)
分子量 968.24 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:2068

产品名称:荧光淬灭剂Tide Quencher 4WS叠氮化物

规格:1mg

储存条件:保存在冰箱-15℃干燥

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:968.24

溶剂:DMSO

Abs(nm):603

 

产品介绍

TQ4WS旨在成为ROX,TF4和TexasRed®的卓越淬灭剂。 TQ4WS有(a)吸收更强;(b)中淬火效率更高; (c)具有所需溶解度的多功能反应形式,用于标记寡核苷酸和肽。 该TQ4WS产品对炔烃具有活性,可用于点击化学。

点击查看光谱

 

参考文献

A mechanistic model to predict effects of cathepsin B and cystatin C on β-amyloid aggregation and degradation
Authors: Tyler J Perlenfein, Regina M Murphy
Journal: Journal of Biological Chemistry (2017): jbc–M117

Real-Time Detection of a Self-Replicating RNA Enzyme
Authors: Charles Olea, Gerald F Joyce
Journal: Molecules (2016): 1310

Development of Multi-Parametric/Multimodal Spectroscopy Apparatus for Characterization of Functional Interfaces
Authors: Lang Zhou, Mary Arugula, Christopher J Easley, Curtis Shannon, Aleksandr Simonian
Journal: ECS Transactions (2015): 9–16

Maternal serum glycosylated fibronectin as a point-of-care biomarker for assessment of preeclampsia
Authors: Juha Rasanen, Matthew J Quinn, Amber Laurie, Eric Bean, Charles T Roberts, Srinivasa R Nagalla, Michael G Gravett
Journal: American journal of obstetrics and gynecology (2015): 82–e1

Array of biodegradable microrafts for isolation and implantation of living, adherent cells
Authors: Yuli Wang, Colleen N Phillips, Gabriela S Herrera, Christopher E Sims, Jen Jen Yeh, Nancy L Allbritton
Journal: RSC advances (2013): 9264–9272

Development of SNAP-Tag Fluorogenic Probes for Wash-Free Fluorescence Imaging
Authors: Xiaoli Sun, Aihua Zhang, Brenda Baker, Luo Sun, Angela Howard, John Buswell, Damien Maurel, Anastasiya Masharina, Kai Johnsson, Christopher J Noren
Journal: ChemBioChem (2011): 2217–2226

FERRAMENTAS PARA ESTUDO DA BIOLOGIA DE GPCRS (G-PROTEIN COUPLED RECEPTORS)
Authors: Frederico Marianetti Soriani, Remo Castro Russo
Journal: Unknown

 

相关产品

产品名称 货号
荧光淬灭剂Tide Quencher 4WS马来酰亚胺 Cat#2064
荧光淬灭剂 Tide Quencher 4WS胺 Cat#2061
荧光淬灭剂Tide Quencher 4WS酸 Cat#2060

说明书
荧光淬灭剂Tide Quencher 4WS叠氮化物.pdf

DSG [二(N-琥珀酰亚胺基)戊二醛] CAS 79642-50-5 货号4520-AAT Bioquest荧光染料

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DSG [二(N-琥珀酰亚胺基)戊二醛] CAS 79642-50-5

DSG [二(N-琥珀酰亚胺基)戊二醛] CAS 79642-50-5

DSG [二(N-琥珀酰亚胺基)戊二醛] CAS 79642-50-5    货号4520 货号 4520 存储条件 在零下15度以下保存
规格 25 mg 价格 1008
Ex (nm) Em (nm)
分子量 326.26 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

DSG [二(N-琥珀酰亚胺基)戊二醛]是美国AAT Bioquest生产的荧光探针,DSG是二琥珀酰亚胺基戊二酸酯,一种简单的同双功能交联剂,基于5-(7.7埃)间隔臂两端的胺反应性N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯基。它用于交联具有胺部分的分子。DSG是细胞膜可渗透的。它用于ChIP分析以确定DNA-蛋白质结合相互作用。DSG交联剂必须溶解在有机溶剂(如DMSO或DMF)中,然后加入到水性交联反应中。我们的内部研究表明,DSG交联的肽结合物具有更好的稳定性,并倾向于产生高特异性的抗体。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的DSG [二(N-琥珀酰亚胺基)戊二醛]。 

产品说明书

样品实验方案

1.制备含胺蛋白质的缀合缓冲液,蛋白质-NH 2 (缓冲液A):磷酸盐缓冲盐水(PBS,pH 7.2)或pH值为7.2至8.0的其他无胺缓冲液可用于此。

注意:避免在缀合过程中含有伯胺(如Tris或甘氨酸)和巯基的缓冲液,因为它们会与预期的反应竞争。如有必要,将样品透析或脱盐至适当的缓冲液如PBS中。

 

2.制备含巯基蛋白质的缀合缓冲液,蛋白质-SH(缓冲液B):pH为6.5-7.5的不含巯基的缓冲液可用于此。

注1:在缀合过程中避免使用含有巯基的缓冲液,因为它们会与预期的反应竞争。如有必要,将样品透析或脱盐至适当的缓冲液如PBS中。

注2:加入1-5mM EDTA有助于螯合二价金属,从而减少含巯基蛋白质中的二硫化物形成。

 

3.准备脱盐柱,将改性蛋白与过量交联剂和反应副产物分离。

 

4.在其缀合缓冲液A和缓冲液B中制备含胺蛋白质(蛋白质-NH2)和含巯基蛋白质(蛋白质-SH)溶液。

 

5.制备蛋白质1-NH 2 -SMCC(或SMCC Plus)缀合物:将适量的SMCC(或SMCC Plus)加入到缓冲液A中的含胺蛋白质溶液中。蛋白质-NH 2的浓度 决定SMCC(或SMCC Plus)摩尔过量使用。SMCC(或SMCC Plus)摩尔过量的建议体积如下,但最佳比例必须使用目标蛋白质通过实验确定:

  • 蛋白质样品<1 mg / mL使用40-80倍摩尔过量。
  • 1-4 mg / mL的蛋白质样品使用20倍摩尔过量。
  • 5-10 mg / mL的蛋白质样品使用5至10倍摩尔过量。

 

6.将上述反应混合物在室温下孵育30-60分钟或在4℃孵育2-4小时。

注1:为了在完成前停止缀合反应,加入含有还原半胱氨酸的缓冲液,其浓度比Protein-SH的巯基浓度高几倍。

注2:可以通过电泳分离和随后的蛋白质染色来估计缀合效率。

 

7.使用用共轭缓冲液A平衡的脱盐柱除去多余的SMCC(或SMCC Plus)。

 

8.将含硫醇(蛋白-SH)和脱盐的含胺蛋白(蛋白-NH 2)SMCC(或SMCC Plus)缀合物混合并混合,摩尔比对应于最终缀合物所需的摩尔比,并与亲属一致两种蛋白质上存在的巯基和活化胺的数量。

注意:与马来酰亚胺部分反应的分子必须具有游离(还原的)巯基。对于蛋白质,在室温下使用5mM TCEP还原二硫键30分钟,然后通过合适的脱盐柱两次。请注意,蛋白质(例如抗体)可能会通过完全还原其二硫键而失活。可以用2-巯基乙胺·HCl(2-MEA)实现IgG中铰链区二硫键的选择性还原。可以使用N-琥珀酰亚胺基S-乙酰硫代乙酸酯(SATA)或2-亚氨基硫杂环戊烷·盐酸盐(Traut’s Reagent)将巯基化合物添加到分子中,后者可以修饰伯胺。

 

参考文献

N-glycan targeted gene delivery to the dendritic cell SIGN receptor
Authors: Kevin Anderson, Christian Fernandez, Kevin G Rice
Journal: Bioconjugate chemistry (2010): 1479–1485

说明书
DSG [二(N-琥珀酰亚胺基)戊二醛] CAS 79642-50-5.pdf

荧光淬灭剂Tide Quencher 4WS炔烃 货号2069-AAT Bioquest荧光染料

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荧光淬灭剂Tide Quencher 4WS炔烃

荧光淬灭剂Tide Quencher 4WS炔烃

荧光淬灭剂Tide Quencher 4WS炔烃    货号2069 货号 2069 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 3924
Ex (nm) Em (nm)
分子量 1158.49 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:2069

产品名称:荧光淬灭剂Tide Quencher 4WS炔烃

规格:1mg

储存条件:保存在冰箱-15℃干燥

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:937.22

溶剂:DMSO

Abs(nm):603

 

产品介绍

TQ4WS旨在成为ROX,TF4和TexasRed®的卓越淬灭剂。 TQ4WS有(a)吸收更强;(b)中淬火效率更高; (c)具有所需溶解度的多功能反应形式,用于标记寡核苷酸和肽。 该TQ4产品对叠氮化物具有反应性,可用于点击化学。

点击查看光谱

 

参考文献

A mechanistic model to predict effects of cathepsin B and cystatin C on β-amyloid aggregation and degradation
Authors: Tyler J Perlenfein, Regina M Murphy
Journal: Journal of Biological Chemistry (2017): jbc–M117

Real-Time Detection of a Self-Replicating RNA Enzyme
Authors: Charles Olea, Gerald F Joyce
Journal: Molecules (2016): 1310

Development of Multi-Parametric/Multimodal Spectroscopy Apparatus for Characterization of Functional Interfaces
Authors: Lang Zhou, Mary Arugula, Christopher J Easley, Curtis Shannon, Aleksandr Simonian
Journal: ECS Transactions (2015): 9–16

Maternal serum glycosylated fibronectin as a point-of-care biomarker for assessment of preeclampsia
Authors: Juha Rasanen, Matthew J Quinn, Amber Laurie, Eric Bean, Charles T Roberts, Srinivasa R Nagalla, Michael G Gravett
Journal: American journal of obstetrics and gynecology (2015): 82–e1

Array of biodegradable microrafts for isolation and implantation of living, adherent cells
Authors: Yuli Wang, Colleen N Phillips, Gabriela S Herrera, Christopher E Sims, Jen Jen Yeh, Nancy L Allbritton
Journal: RSC advances (2013): 9264–9272

Development of SNAP-Tag Fluorogenic Probes for Wash-Free Fluorescence Imaging
Authors: Xiaoli Sun, Aihua Zhang, Brenda Baker, Luo Sun, Angela Howard, John Buswell, Damien Maurel, Anastasiya Masharina, Kai Johnsson, Christopher J Noren
Journal: ChemBioChem (2011): 2217–2226

FERRAMENTAS PARA ESTUDO DA BIOLOGIA DE GPCRS (G-PROTEIN COUPLED RECEPTORS)
Authors: Frederico Marianetti Soriani, Remo Castro Russo
Journal: Unknown

 

相关产品

产品名称 货号
荧光淬灭剂Tide Quencher 4WS马来酰亚胺 Cat#2064
荧光淬灭剂 Tide Quencher 4WS胺 Cat#2061
荧光淬灭剂Tide Quencher 4WS酸 Cat#2060

说明书
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天冬氨酸Asp 5-FAM标记 货号5004-AAT Bioquest荧光染料

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天冬氨酸Asp 5-FAM标记

天冬氨酸Asp 5-FAM标记

天冬氨酸Asp 5-FAM标记    货号5004 货号 5004 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 mg 价格 6564
Ex (nm) 493 Em (nm) 517
分子量 755.72 溶剂 DMF
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:5004

产品名称:天冬氨酸Asp 5-FAM标记

规格:100mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:755.72

溶剂:DMF

激发波长(nm):494

发射波长(nm):521

 

产品介绍

FMOC-Asp(5-FAM)-OH是FAM的序列肽Asp标记的构件。 FAM是用于制备FRET肽的最常见的供体染料之一(通常与TAMRA或TQ2配对)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的天冬氨酸Asp EDANS标记。 

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参考文献

Pharmacophore Generation from a Drug-like Core Molecule Surrounded by a Library Peptide via the 10BASEd-T on Bacteriophage T7
Authors: Yuuki Tokunaga, Yuuki Azetsu, Keisuke Fukunaga, Takaaki Hatanaka, Yuji Ito, Masumi Taki
Journal: Molecules (2014): 2481–2496

ADIBO-based “click” chemistry for diagnostic peptide micro-array fabrication: physicochemical and assay characteristics
Authors: Denis Prim, Fabien Rebeaud, Vincent Cosandey, Roger Marti, Philippe Passeraub, Marc E Pfeifer
Journal: Molecules (2013): 9833–9849

Site-specific C-terminal and internal loop labeling of proteins using sortase-mediated reactions
Authors: Carla P Guimaraes, Martin D Witte, Christopher S Theile, Gunes Bozkurt, Lenka Kundrat, Annet EM Blom, Hidde L Ploegh
Journal: Nature protocols (2013): 1787–1799

 

相关产品

产品名称 货号
天冬氨酸Asp 5-TAMRA标记 Cat#5006
赖氨酸Lys 5-FAM标记 Cat#5043
谷氨酸Glu 5-FAM标记 Cat#5013

说明书
天冬氨酸Asp 5-FAM标记.pdf

荧光淬灭剂Tide Quencher 6WS马来酰亚胺 货号2094-AAT Bioquest荧光染料

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荧光淬灭剂Tide Quencher 6WS马来酰亚胺

荧光淬灭剂Tide Quencher 6WS马来酰亚胺

荧光淬灭剂Tide Quencher 6WS马来酰亚胺    货号2094 货号 2094 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 3924
Ex (nm) Em (nm)
分子量 1061.16 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:2094

产品名称:荧光淬灭剂Tide Quencher 6WS马来酰亚胺

规格:1mg

储存条件:保存在冰箱-15℃干燥

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:1061.16

溶剂:DMSO

Abs(nm):694

 

产品介绍

TQ6WS旨在成为Cy5.5,TF6和Alexa Fluor 680的优异猝灭剂.TQ6WS具有(a)吸收更强;(b)淬火效率更高; (c)具有所需溶解度的多功能反应形式,用于标记寡核苷酸和肽。 该TQ6WS产物用于硫醇修饰的寡核苷酸和含半胱氨酸的肽的后标记。

点击查看光谱

 

参考文献

A mechanistic model to predict effects of cathepsin B and cystatin C on β-amyloid aggregation and degradation
Authors: Tyler J Perlenfein, Regina M Murphy
Journal: Journal of Biological Chemistry (2017): jbc–M117

Real-Time Detection of a Self-Replicating RNA Enzyme
Authors: Charles Olea, Gerald F Joyce
Journal: Molecules (2016): 1310

Development of Multi-Parametric/Multimodal Spectroscopy Apparatus for Characterization of Functional Interfaces
Authors: Lang Zhou, Mary Arugula, Christopher J Easley, Curtis Shannon, Aleksandr Simonian
Journal: ECS Transactions (2015): 9–16

Maternal serum glycosylated fibronectin as a point-of-care biomarker for assessment of preeclampsia
Authors: Juha Rasanen, Matthew J Quinn, Amber Laurie, Eric Bean, Charles T Roberts, Srinivasa R Nagalla, Michael G Gravett
Journal: American journal of obstetrics and gynecology (2015): 82–e1

Array of biodegradable microrafts for isolation and implantation of living, adherent cells
Authors: Yuli Wang, Colleen N Phillips, Gabriela S Herrera, Christopher E Sims, Jen Jen Yeh, Nancy L Allbritton
Journal: RSC advances (2013): 9264–9272

Development of SNAP-Tag Fluorogenic Probes for Wash-Free Fluorescence Imaging
Authors: Xiaoli Sun, Aihua Zhang, Brenda Baker, Luo Sun, Angela Howard, John Buswell, Damien Maurel, Anastasiya Masharina, Kai Johnsson, Christopher J Noren
Journal: ChemBioChem (2011): 2217–2226

FERRAMENTAS PARA ESTUDO DA BIOLOGIA DE GPCRS (G-PROTEIN COUPLED RECEPTORS)
Authors: Frederico Marianetti Soriani, Remo Castro Russo
Journal: Unknown

 

相关产品

产品名称 货号
荧光淬灭剂Tide Quencher 6WS酸 Cat#2090
荧光淬灭剂Tide Quencher 6WS胺 Cat#2091
荧光淬灭剂Tide Quencher 6WS炔烃 Cat#2098

说明书
荧光淬灭剂Tide Quencher 6WS马来酰亚胺.pdf

谷氨酸Glu 5/6-TAMRA标记 货号5014-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

谷氨酸Glu 5/6-TAMRA标记

谷氨酸Glu 5/6-TAMRA标记

谷氨酸Glu 5/6-TAMRA标记    货号5014 货号 5014 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 mg 价格 6564
Ex (nm) 552 Em (nm) 578
分子量 937.91 溶剂 DMF
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:5014

产品名称:谷氨酸Glu 5/6-TAMRA标记

规格:100mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:937.91

溶剂:DMF

激发波长(nm):544

发射波长(nm):572

 

产品介绍

FMOC-Glu(5/6-TAMRA)-OH是多肽测序中FAM标记谷胺酸的一个构建单元。TAMRA是最常见的一种制备FRET(通常搭配FAM染料或TQ3)受予体。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的谷氨酸Glu 5-FAM标记。 

点击查看光谱

 

参考文献

Pharmacophore Generation from a Drug-like Core Molecule Surrounded by a Library Peptide via the 10BASEd-T on Bacteriophage T7
Authors: Yuuki Tokunaga, Yuuki Azetsu, Keisuke Fukunaga, Takaaki Hatanaka, Yuji Ito, Masumi Taki
Journal: Molecules (2014): 2481–2496

ADIBO-based “click” chemistry for diagnostic peptide micro-array fabrication: physicochemical and assay characteristics
Authors: Denis Prim, Fabien Rebeaud, Vincent Cosandey, Roger Marti, Philippe Passeraub, Marc E Pfeifer
Journal: Molecules (2013): 9833–9849

Site-specific C-terminal and internal loop labeling of proteins using sortase-mediated reactions
Authors: Carla P Guimaraes, Martin D Witte, Christopher S Theile, Gunes Bozkurt, Lenka Kundrat, Annet EM Blom, Hidde L Ploegh
Journal: Nature protocols (2013): 1787–1799

 

相关产品

产品名称 货号
谷氨酸Glu 5/6-FAM标记 Cat#5012
赖氨酸Lys 5/6-TAMRA标记 Cat#5044
天冬氨酸Asp 5/6-TAMRA标记 Cat#5005

说明书
谷氨酸Glu 5/6-TAMRA标记.pdf

荧光淬灭剂Tide Quencher 1 CPG *1000Å* 货号2194-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

荧光淬灭剂Tide Quencher 1 CPG *1000Å*

荧光淬灭剂Tide Quencher 1 CPG *1000Å*

荧光淬灭剂Tide Quencher 1 CPG *1000Å*    货号2194 货号 2194 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 mg 价格 2328
Ex (nm) Em (nm)
分子量 N/A 溶剂 MeCN
产品详细介绍

简要概述

荧光淬灭剂Tide Quencher 1 CPG *1000Å*是美国AAT Bioquest生产的淬灭剂,TQ1被设计为DABCYL的优异猝灭剂替代品。与DABCYL相比,TQ1具有(a)吸收更强; (b)淬火效率更高; (c)具有所需溶解度的多功能反应形式,用于标记寡核苷酸和肽。该TQ1产物主要用于寡核苷酸的合成内标记。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的荧光淬灭剂Tide Quencher 1 CPG *1000Å*。 

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产品说明书

操作步骤

用Tide Quencher 染料标记氨基修饰的寡核苷酸

以下方案已经过优化,可用于标记200μg(~6 A260 nm单位)的专有寡核苷酸。您需要修改协议,以通过多次实验为您的特定应用程序获得最佳结果。您的氨基改性OLIGO必须进行处理以去除快速反应并消耗染料SUCCINIMIDYL酯的氨。

1.制备Oligo溶液(溶液A)将氨基修饰的oligo(~200μg)溶解在四硼酸盐缓冲液(100μL,pH 8.5±0.5)中。

注1:寡核苷酸必须在5’末端用胺基合成。参见Appenxidx 1纯化氨基修饰的寡核苷酸。

注2:避免使用含有伯胺的缓冲液,如Tris,因为它们与胺反应性化合物竞争结合。

2.准备染料溶液(溶液B)

2.1通过上下吸移将1mg染料SE溶解在100μLDMSO中(如果可能,> 10mg / mL)。将小瓶侧面的溶液原液离心至小瓶底部。

注意:在开始缀合之前准备DMSO染料溶液。染料溶液的长期储存可降低染料活性。任何含有染料的溶液都应避光。我们不建议您存储DMSO染料溶液以备将来使用。

3.运行共轭反应

3.1在搅拌或摇动(保持反应混合物避光)的同时向染料溶液(B,20-50μL)中加入寡聚物溶液(A,100μL)。

3.2在室温下在旋转器或振荡器上旋转或摇动反应混合物4-6小时。

注意:在第一个小时内每10分钟轻轻涡旋一下小瓶,以确保反应溶液保持充分混合。不要剧烈混合,因为材料可能留在小瓶的两侧。六小时后,应标记50-90%的胺修饰的寡核苷酸分子。如果更方便的话,反应可以孵育过夜。然而,在大多数情况下,过夜孵育不会导致更高的标记效率。

4.纯化染料 – 寡糖结合物

4.1通过乙醇沉淀标记的寡核苷酸进行初步纯化

a.将20μL(一般十分之一反应溶液体积)的3M NaCl和300μL冷无水乙醇(通常为两个半反应溶液体积)加入反应小瓶中。

b.充分混合溶液并将其置于-20℃下30分钟。

c.将该溶液在微量离心机中以10,000至15,000×g离心30分钟。

d.注意:如果离心时间不够长,可能会导致样品丢失。

f.小心取出上清液,用冷的70%乙醇冲洗沉淀1-3次并短暂干燥。

g.注意:一些未反应的标记试剂可能在反应过程中沉淀或可能粘在反应瓶的壁上。在离心之前,通过大量涡旋混合将该材料完全再溶解。重新溶解标记试剂可确保沉淀的寡核苷酸最少被未反应的标记物污染。

4.2通过HPLC或凝胶电泳进行最终纯化

 

使用Tide Quencher 染料标记肽

以下方案已经过优化,用于标记10 mg仅含有一个游离氨基的专利肽(MW~2000)。您需要修改方案,以便通过多个实验为您的特定应用程序提供最佳结果。

1.制备肽溶液(溶液A)

1.1将肽(~10 mg)溶解在DMF(~1 ml)中。

注1:肽必须用碱如三乙胺或碳酸钾中和。

注2:避免使用含有伯胺的缓冲液,如Tris,因为它们与胺反应性化合物竞争结合。

2.准备染料溶液(溶液B)

2.1通过上下吸移将5mg染料SE溶解在500μLDMF中(如果可能,> 10mg / mL)。

2.2注意:在开始缀合之前准备DMF染料溶液。染料溶液的长期储存可降低染料活性。任何含有染料的溶液都应避光。我们不建议您存储DMF染料溶液以备将来使用。

3.运行共轭反应

3.1向染料溶液(B,500μL)中加入肽溶液(A,1mL),搅拌或摇动(保持反应混合物不发光)。

3.2在室温下搅拌反应混合物4-6小时。

4.纯化染料 – 肽缀合物

4.1浓缩反应溶液并在C18柱上纯化,得到所需的缀合物。通过HPLC分析级分,合并> 97%纯度的级分并冻干。

4.2注1:HPLC纯化条件:TEAB缓冲液(三乙基碳酸氢铵,0.25mmol,pH = 7.0-8.0)用作缓冲液A,乙腈用作缓冲液B. HPLC在60分钟内从0%B至30%B进行(流速:100毫升/分钟)。

4.3注2:操作过程中避免强光。

 

参考文献

A mechanistic model to predict effects of cathepsin B and cystatin C on β-amyloid aggregation and degradation
Authors: Tyler J Perlenfein, Regina M Murphy
Journal: Journal of Biological Chemistry (2017): jbc–M117

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Development of Multi-Parametric/Multimodal Spectroscopy Apparatus for Characterization of Functional Interfaces
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货号:5020

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保质期:12个月

 

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参考文献

Pharmacophore Generation from a Drug-like Core Molecule Surrounded by a Library Peptide via the 10BASEd-T on Bacteriophage T7
Authors: Yuuki Tokunaga, Yuuki Azetsu, Keisuke Fukunaga, Takaaki Hatanaka, Yuji Ito, Masumi Taki
Journal: Molecules (2014): 2481–2496

ADIBO-based “click” chemistry for diagnostic peptide micro-array fabrication: physicochemical and assay characteristics
Authors: Denis Prim, Fabien Rebeaud, Vincent Cosandey, Roger Marti, Philippe Passeraub, Marc E Pfeifer
Journal: Molecules (2013): 9833–9849

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产品基本信息

货号:2204

产品名称:荧光淬灭剂Tide Quencher 2 CPG *1000Å*

规格:100mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:N/A

溶剂:MeCN

激发波长(nm):501

发射波长(nm):N/A

 

产品介绍

TQ2被设计为FAM,HEX,TET,JOE,TF2和罗丹明6G的优异猝灭剂。TQ2有(a)吸收更强; (b)淬火效率更高; (c)具有所需溶解度的多功能反应形式,用于标记寡核苷酸和肽。该TQ2产物主要用于寡核苷酸的合成内标记。

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