Clontech 632635 Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit 50 Rxns ￥8,771 ￥7,017 Clontech 632636 Guide-it Complete sgRNA Screening System 50 Rxns ￥10,701 ￥8,561 Clontech 632639 Guide-it sgRNA Screening Kit 50 Rxns ￥4,810 ￥3,848 Clontech 632638 Guide-it IVT RNA Clean-Up Kit 50 Rxns酶试剂盒

发表于2022年9月23日由修饰性PEG

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

sgRNA体外转录和筛选
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	632635	Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit	50 Rxns	￥8,771 ￥7,017
Clontech	632636	Guide-it Complete sgRNA Screening System	50 Rxns	￥10,701 ￥8,561
Clontech	632639	Guide-it sgRNA Screening Kit	50 Rxns	￥4,810 ￥3,848
Clontech	632638	Guide-it IVT RNA Clean-Up Kit	50 Rxns	￥4,439

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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Guide – 修饰性PEG

			基因敲除
		↗		→	→
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→	→		基因敲入
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sgRNA的体外转录和筛选试剂盒
In Vitro Transcription and Screening Kits for sgRNA

我们的Guide-it in vitro transcription and screening kits for sgRNA 包括四个试剂盒，用于CRISPR/Cas9 研究中单链向导RNAs(single guide RNAs ,sgRNAs)的简单制备、清理和评价。每个试剂盒提供足够 50次反应的材料。
· Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit (Code No. 632635) 被用于通过体外转录制备大量的 sgRNAs。这个试剂盒同样包括Guide-it IVT RNA Clean-Up Kit (Code No. 632638), 被用于快速纯化参与体外转录（vitro transcription，IVT) 反应的sgRNA。从这个试剂盒纯化后的 sgRNA 可以直接被用于转染、电穿孔以及体外剪切实验。
· Guide-it sgRNA Screening Kit (Code No. 632639) 可以在Cas9介导的基因编辑相关研究前，先在体外检测不同sgRNAs的效率，这样就不必浪费时间将无效的sgRNAs转入您的细胞了。使用这个试剂盒，首先通过PCR产生包含sgRNA靶点的模板，随后再与您想测试的sgRNA以及重组Cas9核酸酶结合。Cas9 核酸酶剪切模板的效率可以通过使用琼脂糖凝胶电泳检测。
· Guide-it Complete sgRNA Screening System (Code No. 632636) 包含以上提到的全部试剂盒组分，可以被用来合成和检测sgRNAs效率。该试剂盒包含了用于体外转录和纯化sgRNAs，以及检测重组Cas9核酸酶对PCR靶向片段剪切效率的所有试剂。

■ 产品特点

· 共有4个试剂盒，可用于Cas9介导的基因编辑研究中sgRNA (single guide RNA)的简单制备、清洁以及效率评价。
· Lenti-X Packaging Single Shots易于产生高滴度病毒。
· 使用Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit (Code No. 632635; 包括Guide-it IVT RNA Clean-Up Kit, Code No. 632638)体外转录和纯化大量sgRNA，用于转染或体外筛选。
· 使用Guide-it IVT RNA Clean-Up Kit (Code No. 632638) 对IVT 反应后sgRNA的快速纯化，直接用于转染、电穿孔以及体外剪切试验。
· Guide-it sgRNA Screening Kit (Code No. 632639)包含高质量的重组Cas9蛋白质。
· Guide-it Complete sgRNA Screening System (Code No. 632636)是Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit (Code No. 632635) 和 Guide-it sgRNA Screening Kit (Code No. 632639)的组合，允许您进行sgRNA制备和对预设靶点体外剪切能力的测试。

■ 实验例

Clontech 632635 Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit 50 Rxns ￥8,771 ￥7,017 Clontech 632636 Guide-it Complete sgRNA Screening System 50 Rxns ￥10,701 ￥8,561 Clontech 632639 Guide-it sgRNA Screening Kit 50 Rxns ￥4,810 ￥3,848 Clontech 632638 Guide-it IVT RNA Clean-Up Kit 50 Rxns

图1. Guide-it sgRNA In Vitro Transcription and Screening System试剂盒组成和操作流程

图2. 采用Guide-it试剂盒制备高产量single guide RNA (sgRNA)和重组Cas9蛋白质剪切靶位点检测sgRNA剪切效率操作步骤概要

图3. Guide-it试剂和同类产品所制备的sgRNA品质比较
采用Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit制备的所有sgRNAs均为单一条带，而其他公司同类产品制备的sgRNAs均可观察到杂带，因此Guide-it试剂盒所制备的sgRNAs品质更高。

* 比较结果来自于Takara Bio USA, Inc.

图4. 以不同基因为靶标制备的sgRNA产量和品质比较
采用Guide-it Complete sgRNA Screening System以多个基因为靶基因制备sgRNA。
Panel A. 将20 μl sgRNA体外转录（IVT）反应液置于37°C孵育4 hr，采用NanoDrop分光光度计检测所制备产生的sgRNA产量。
Panel B. 采用安捷伦生物分析仪分析分析每一个sgRNA IVT反应液，检测sgRNA质量。

■ 产品组份

Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit (Code No. 632635; 50 rxns)
· 1 each Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Components v2 (Code No. 632637; 50 rxns; Not sold separately)
    ○ 50 μl Guide-it Scaffold Template (1 ng/μl)
    ○ 350 μl Guide-it In Vitro Transcription Buffer
    ○ 1 ml RNase Free Water
    ○ 500 μl RNase Free Water
    ○ 150 μl Guide-it T7 Polymerase Mix (33 U/μl)
    ○ 625 μl PrimeSTAR Max Premix (2X)
    ○ 100 μl Recombinant DNase I (RNase-Free) (5 U/μl)
· 1 each Guide-it IVT RNA Clean-Up Kit (Code No. 632638; 50 rxns)
    ○ 13 ml RNase Free Water
    ○ 3 ml IVT Binding Buffer
    ○ 50 IVT RNA Clean-Up Spin Columns
    ○ 2 x 6 ml IVT Wash Buffer
    ○ 50 Collection Tubes (2 ml)

Guide-it sgRNA Clean-Up Kit (Code No. 632638; 50 rxns)
· 13 ml RNase Free Water
· 3 ml IVT Binding Buffer
· 50 IVT RNA Clean-Up Spin Columns
· 2 x 6 ml IVT Wash Buffer
· 50 Collection Tubes (2 ml)

Guide-it sgRNA Screening Kit (Code No. 632639; 50 rxns)
· 25 μl Guide-it Recombinant Cas9 Nuclease (500 ng/μl)
· 50 μl 15X Cas9 Reaction Buffer
· 50 μl 15X BSA
· 5 μl Control sgRNA (50 ng/μl)
· 25 μl Control Fragment (20 ng/μl)
· 50 μl Terra PCR Direct Polymerase Mix (1.25 U/μl)
· 1.25 ml 2X Terra PCR Direct Buffer (with Mg2+, dNTP)
· 5 ml RNase Free Water
· 5 ml Extraction Buffer 1
· 0.5 ml Extraction Buffer 2

Guide-it Complete sgRNA Screening System (Code No. 632636; 50 rxns)
· Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit (Code No. 632635)
· Guide-it sgRNA Screening Kit (Code No. 632639)

■ 关联资料
点击查看Guide-it^™ sgRNA体外转录和筛选系统宣传页

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Clontech 632640 Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl) 3 × 100 μg酶试剂盒

发表于2022年9月23日由修饰性PEG

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重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	632640	Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl)	3 × 100 μg	￥6,845
Clontech	632641	Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl)	100 μg	￥2,701

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Guide – 修饰性PEG

Guide-it Recombinant Cas9 (Electroporation Ready)（Code No. 632641/632640）产品名称变更为Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl) ，产品内容没有发生变化。（2021年5月）

			基因敲除
		↗		→	→
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→	→		基因敲入
		↘

降低脱靶效应，可用于in vivo基因编辑实验

Guide-it^™ Recombinant Cas9 (3 μg/μl)

· 适用于电穿孔方法的低甘油含量、高浓度的Cas9蛋白质溶液
· 与质粒导入系统相比较，脱靶效应受到明显抑制
· NLS（核定位信号）有助于实现快速高效突变导入
· 与Guide-it Complete sgRNA Screening System组合使用实现高效率的基因编辑

■ 产品说明：

Guide-it Recombinant Cas9（3 μg/μl）是来源于野生型酿脓链球菌Streptococcus pyogenes，适用于CRISPR/Cas9基因编辑实验的重组Cas9蛋白质溶液。
高浓度Cas9蛋白质溶液中甘油浓度比其他公司低，特别适用于电穿孔导入方法。与借助质粒导入Cas9基因序列方法相比较，避免了残留Cas9基因的持续表达，有效抑制了脱靶效应。
无需经过蛋白质转录·翻译·表达过程，C末端的NLS（核定位信号）可以实现快速有效的突变导入。
Cas9导入细胞首先需要形成Cas9-sgRNA核糖核蛋白复合物，sgRNA制备推荐使用Guide-it sgRNA In VitroTranscription Kit（Code No. 632635）或者Guide-it Complete sgRNA Screening System（Code No. 632636）。

■ 实验例：

Clontech 632640 Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl) 3 × 100 μg

图1. AAVS1或者CXCR4基因同源重组修复（HDR）效率
Guide-it Recombinant Cas9（3 μg/μl）和修复模板复合物通过电穿孔的方式导入至CD34＋造血干细胞中检测同源重组修复（HDR）效率。将包含Hind III酶切位点的修复模板插入至AAVS1 基因中，包含Hind III和BamH I酶切位点的修复模板插入至CXCR4基因中。之后通过对细胞内靶基因进行PCR扩增和限制酶剪切分析，确认突变导入效率。基因编辑效率标注在凝胶阳性孔处。在基因编辑前野生型CXCR4基因已包含1处BamH I位点，因此BamH I剪切CXCR4基因后额外多显示一条条带。

图2. 不同公司Cas9产品在hiPS細胞中基因敲除效率比较
剪切后电泳条带的强弱可以半定量估计发生基因编辑细胞的百分数。Guide-it Recombinant Cas9（3 μg/μl）与Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit制备的sgRNA相结合，通过电穿孔的方法导入Cellartis hiPSC-18细胞，采用Guide-it Mutation Detection Kit（Code No. 631448）确认突变导入效率，％即表示基因编辑效率。如图所示，Guide-it Recombinant Cas9（3 μg/μl）在多数靶基因位点均显示有效的基因编辑。

* 比较结果来自于Takara Bio USA, Inc.

■ 浓度

3 μg/μl

■ 保存

－70℃
（注意）避免反复冻融。首次溶解之后，建议按照使用量分装保存。

■ 所需要的其它产品（主要产品）

· 电穿孔装置：
Neon Transfection System（Thermo Fisher Scientific）或者 4-D Nucleofector System（Lonza）
*各装置的导入条件请阅读使用说明书。

· sgRNA制备及筛选
Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit（Code No. 632635）：用于sgRNA制备及纯化
Guide-it Complete sgRNA Screening System（Code No. 632636）：用于确认制备的sgRNA的有效性

产品详情请点击：

■ 关联资料
相关资料：点击图片下载

Clontech 632652 Guide-it SNP Screening Kit 100 Rxns酶试剂盒

发表于2022年9月23日由修饰性PEG

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

基因编辑后高通量SNP筛选
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	632652	Guide-it SNP Screening Kit	100 Rxns	￥4,863
Clontech	632653	Guide-it SNP Screening Kit	400 Rxns	￥12,277

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			基因敲除
		↗		→	→
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→	→		基因敲入
		↘

检测基因编辑后细胞群中的单核苷酸替换
Guide-it SNP Screening Kit

· 高通量SNP筛选，无需测序
· 操作流程简单、快速，4小时可完成
· 在任意基因位点检测任意核苷酸替换
· 无论是哪种合子型，都可以识别出基因编辑后的细胞克隆

Guide-it SNP Screening Kit可以检测CRISPR/Cas9系统编辑后的细胞群中的单核苷酸替换，在96孔板中快速识别出基因编辑后的细胞克隆。整个操作流程简单快速，首先通过PCR扩增基因组靶标位点，之后使用识别特定结构的核酸内切酶进行酶切反应，然后读取荧光值就可以完成单核苷酸替换检测。无论需要检测的核苷酸替换类型、细胞克隆的接合性或者靶标位点的基因序列如何，都可以使用这个方法进行检测。了解此试剂盒的原理以及更多产品特点，您可以登录FAQs页面观看视频录像。

基因编辑技术其中一个强大的应用，就是在特定的基因组位点导入核苷酸替换，去模拟与人类疾病相关的单核苷酸多态性(SNPs)或者插入终止密码子以实现准确的基因敲除。然而，要从数以百计的克隆中筛选出一个对单核苷酸进行了编辑的细胞克隆，这对我们来说仍然是一个挑战，尤其是在没有相应的表型的情况下。而Guide-it SNP Screening Kit可以充分满足这个需求，让您在数百个细胞克隆中轻松筛选出单核苷酸编辑。

应用：

· 快速检测基因编辑后细胞群中的单核苷酸替换
· SNP基因分型

Video & FAQs

SNP Screening Kit Video & FAQs

实验例：

Clontech 632652 Guide-it SNP Screening Kit 100 Rxns

图1 Guide-it SNP Screening Kit 操作流程示意图。此示范操作流程描述了G>A替换（野生型鸟嘌呤编辑为腺嘌呤）的检测过程。基因编辑后，通过FACS或者有限稀释法分离单细胞并扩大培养成为克隆细胞系，野生型（G，上面）细胞系和核苷酸编辑成功的细胞系（A，下面）。之后提取基因组DNA，PCR扩增靶标位点附近的序列区域，所产生的PCR产物（蓝色）会与两个不同的互补寡核苷酸——一个displacement oligo（绿色）和一个 flap-probe oligo (深/浅紫色)进行杂交，flap-probe oligo 5’端包含一段不互补的固定序列（浅紫色），这段序列形成了flap。Oligos与PCR产物相杂交会形成以上两种结构中的其中一种结构，当然这取决于基因编辑的结果。当基因编辑成功发生时，flap-probe oligo在靶标位点形成完全的碱基配对，这时候产生的结构是一个double-flap结构（下面）。Double-flap结构由Guide-it Flap Detector识别检出，Guide-it Flapase核酸酶特异性剪切并释放出flap，从而产生荧光信号。当没有发生基因编辑时，flap-probe oligo在靶标位点不会形成完全的碱基配对，从而形成一个带有缺口的结构（上面），这个结构不能被Guide-it Flapase核酸酶剪切，也就不会产生荧光信号。通过这种方式，使用Guide-it SNP Screening Kit检测荧光信号就可以确认是否发生了预期的核苷酸替换。

图2 比较纯合子、杂合子和野生型细胞样品的SNP筛选结果。分别以纯合子、杂合子和野生型细胞为样品，使用Guide-it SNP Screening Kit检测所标明的核苷酸替换。在每一组检测结果中，在纯合子和杂合子样品（分别为蓝色和紫色）中所检测到荧光信号值相差不大。

图3 使用Guide-it SNP Screening Kit检测基因分型。本实验例中的SNPs样品均来自于Coriell研究所，这些样品在两个基因组位点（NCP1或者CFT基因）中的其中一个位点上携带了SNPs。使用Guide-it SNP Screening Kit（柱形图）和Sanger测序进行分析。Panel A. NCP1基因型分析。使用分别检测A或者G的两个flap-probe oligos独立进行实验，分析确定哪些样品是A>G替换的纯合子，哪些是杂合子。Panel B. CFTR基因型分析。分析确定哪些样品是没有发生T>A替换的野生型，哪些是T>A替换的纯合子。所有检测结果都通过Sanger测序进行了确认（结果显示在柱形图下面每个样品的下方）。

图4 利用Guide-it SNP Screening Kit在多个人类基因组位点检测核苷酸替换。以野生型或者纯合子来源的基因组DNA（从Coriell研究所获取）为样品，使用Guide-it SNP Screening Kit分析所标明的碱基替换。结果表明所有的碱基替换均可以被成功检测到，与野生型（橙色）和阴性对照（灰色）样品所获得的荧光信号相比，发生了所标明的核苷酸替换的纯合子（蓝色）样品产生了强荧光信号就可以说明这一点。

■ 产品组份

· MightyPrep Reagent for DNA

· Guide-it SNP Positive Control Mix

· Guide-it SNP Negative Control Mix

· Terra PCR Direct Polymerase Mix

· 2X Terra PCR Direct Buffer (with Mg²⁺, dNTP)

· Dilution Buffer

· RNase-free Water

· Annealing Buffer

· Flapase Buffer

· Guide-it Flapase

· Guide-it Flap Detector (40X)

产品详情请点击：

Clontech 632659 Guide-it™ Knockin Screening Kit 100 Rxns酶试剂盒

发表于2022年9月23日由修饰性PEG

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

基因编辑后基因敲入检测
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	632659	Guide-it^™ Knockin Screening Kit	100 Rxns	￥4,733
Clontech	632660	Guide-it^™ Knockin Screening Kit	400 Rxns	￥11,923

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Guide – 修饰性PEG

			基因敲除
		↗		→	→
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基因编辑后基因敲入检测试剂盒，简便·快速
Guide-it Knockin Screening Kit

Guide-it Knockin Screening Kit可高灵敏度地检测通过同源重组（homologous recombination, HR）所产生的基因编辑位点，可用于检测使用CRISPR/Cas9等技术进行基因编辑的批量或者单克隆细胞。该试剂盒采用了简单的基于荧光的检测方法，不论所敲入的插入物长度（从单碱基替换到更长的插入片段）或被编辑的基因组区域序列如何，都可以对由同源重组（HR）所产生的基因组编辑位点进行检测，这种检测方法简便可靠。

该试剂盒操作流程简便快速，主要包括基因组靶标位点PCR扩增，绿色和红色双色荧光检测的酶法测定。这个酶法测定实验，使用荧光读板机或定量PCR仪检测荧光信号即可进行测定，不需要其他特殊仪器。整个操作流程大约需要4个小时，由于荧光信号的检测与基因组靶标位点上目标序列的正确引入是正相关的关系，从而确保可以检测到突变。

在引入单核苷酸多态性（SNP）的应用中，该检测方法能够在混合和克隆细胞群中高灵敏度地检测出单核苷酸替换，可鉴定识别含有两个不同等位基因的杂合克隆（例如携带经编辑（SNP）和未经编辑（WT）各一个拷贝的等位基因）。对于敲入更长基因序列的应用，使用这种检测方法可以在插入序列的5'和3'末端，同时检测是否无缝插入。

■ 特点

· 无需测序，快速确定是否发生了正确的基因敲入
· 可用于批量或者单克隆细胞检测
· 操作简单快速，4小时可完成检测
· 无需特殊仪器，使用荧光读板机或者定量PCR仪进行测定
· SNP分析理想选择，双色检测可同时检测两个不同等位基因（SNP和WT等）

■ 应用

· 在经过编辑的细胞群中快速检测单核苷酸替换或准确敲入
· 在杂合克隆中同时检测已编辑和未编辑的等位基因
· 在进行单细胞克隆之前对杂合的细胞群进行编辑效率分析

■ 在线工具

寡核苷酸DNA设计对于使用Guide-it Knockin Screening Kit进行SNP分析是非常必要的，这个在线工具可以让您轻松设计每个寡核苷酸DNA。

注意：此在线工具仅用于设计检测单碱基替换的寡核苷酸DNA，而不能用于检测长片段插入的寡核苷酸DNA的设计。

Oligo design tool for Guide-it SNP screening assays

■ Tech Note

在iPSC中引入与疾病相关的遗传变异，包括SNP，可以评估这些变异在相关细胞类型中的表型效应，并消除由于遗传背景引起的变异性，从而可以更精细地分析疾病机制并更快速地评估潜在疗法（例如，药物筛选）。Guide-it Knockin Screening Kit提供了一种简便快速的方法，可以在繁琐耗时的单细胞克隆分离之前，从大量编辑后的细胞群和最终产生的克隆细胞群中，明确鉴定出成功的同源重组修复(homology-directed repair, HDR)。

详情点击图片查看

Clontech 632659 Guide-it™ Knockin Screening Kit 100 Rxns

■ 使用实例

图1. 使用Guide-it Knockin Screening Kit检测敲入的插入片段全长

基因编辑后，通过FACS或有限稀释法分离的大量细胞群和克隆细胞系可能表现出多种模式，例如野生型（WT），引入插入/缺失（indel）或敲入了全长插入片段。从克隆细胞中提取DNA并扩增靶标位点，然后将PCR产物与两套不同的displacement oligo（紫色）和flap probe进行杂交：一个与插入片段的5'端杂交（Flap-probe oligo A; 绿色），另外一个与3'端杂交（Flap-probe oligo B; 橙色）。如果同源重组成功并且全长插入片段无缝正确插入的情况下，探针会与两端完全杂交，Guide-it Flapase剪切flap probes后产生绿色和红色荧光信号。当仅检测到一种荧光信号（红色或绿色）时，表明插入片段分别在5'端或3'端发生了缺失。如果没有检测到荧光，则表明靶标位点依然是野生型序列或者引入了indel。

图2. 引入单碱基替换的常见结果

展示了使用基因编辑技术进行单碱基替换（G＞T）的示例，此工作流程示例为G>A替换检测示例。

Panel A. 在基因组靶标位点的结果：当在靶标位点没有发生成功切割，或者成功切割后发生了基于非同源末端连接(NHEJ)的准确修复的情况下，靶标位点没有发生变化，结果仍然为野生型(WT)序列。当切割后发生了基于NHEJ的不准确修复的情况下，其结果是在靶标位点引入了插入或缺失（Indel），这可能会导致基因敲除（KO；极有可能的结果）。当切割后发生了准确的HDR时，则会在靶标位点引入SNP。
Panel B. 二倍体细胞中等位基因组合结果：在二倍体细胞中进行编辑时，每个等位基因的编辑结果可能会有所不同，从而产生多种可能的组合。如果没有发生基因编辑，细胞仍然可以保持纯合型（野生型；顶部）；如果发生了不准确的NHEJ修复，会有一个或两个等位基因被修饰（Indel；中间）；如果发生了成功的HDR，则可以获得一个或两个等位基因中引入了目标SNP的细胞（成功的HDR；底部）。

图3. 使用Guide-it Knockin Screening Kit进行SNP分析的流程

此示例工作流程演示了对G>A单碱基替换的分析，其中G是野生型碱基，被编辑为A。在基因编辑后，将单细胞扩培成为克隆细胞系，目标基因的靶标位点可能具有几种不同的基因型结果。扩增靶位点后，将PCR产物与不同的寡核苷酸探针进行杂交：displacement oligo（紫色）与flap-probe oligo A（绿色；编码SNP等位基因，A）或flap-probe oligo B（橙色；编码WT等位基因，G）组合使用。寡核苷酸退火至PCR产物后，Guide-it Flapase酶（剪刀所示）识别完全的碱基配对，并切割flap-probe oligo 5’端部分（绿色或橙色阴影）。切割下来的flaps由相对应的Guide-it flap detectors检测，并分别产生绿色或红色荧光信号。在上面的示例中，在靶标位点仅产生红色信号的克隆细胞系分析是纯合WT（G/G），而同时产生红色和绿色信号的则是携带已编辑和WT等位基因（G/A）的杂合克隆。

图4. 检测iPS细胞群中PSEN1位点的准确碱基替换

为了验证Guide-it Knockin Screening Kit的SNP检测功能，使用CRISPR/Cas9系统构建了编码PSEN1基因突变体A>G替换（M164V）的杂合型iPS细胞系，该突变体与早发型阿尔茨海默氏病相关。

Panel A. 使用包含PAM沉默突变的HDR模板，在PSEN1基因座上进行准确基因编辑：如果同源重组成功，编辑后的PSEN1基因座将编码邻近PAM序列发生沉默突变（红色，小写）的SNP（蓝色，小写）或者WT（紫色，小写）等位基因。
Panel B. 基因组编辑后在批量iPS细胞群中成功检测碱基替换：使用正义或者反义HDR模板进行基因编辑，然后使用Guide-it Knockin Screening Kit检测是否在每种情况下都成功发生了基因编辑。
设计displacement和flap-probe oligos，用于检测由相应HDR模板编码的邻近PAM序列发生沉默突变（G>C）的WT或者SNP等位基因，将分别产生红色和绿色荧光信号。在独立平行实验中，将Cas9蛋白质（阴性对照），Cas9-sgRNA RNP复合物（KO）或者RNP复合物和正义或者反义WT/SNP HDR模板混合物通过电穿孔的方式分别导入至细胞中。合成检测PAM序列沉默突变的WT或SNP编码序列的寡核苷酸探针，进行平行检测并作为阳性对照。对于每个电穿孔混合物中包含HDR模板的编辑实验组，可以在批量细胞群中检测到成功的HDR。阴性对照组没有显示绿色和红色荧光信号，这证实了flap-probe oligos的特异性，因为在未编辑的WT序列存在下它们没有产生假阳性荧光信号。

■ 产品组份

· MightyPrep Reagent for DNA

· Guide-it Knockin Positive Control Mix

· Guide-it Knockin Negative Control Mix

· Terra PCR Direct Polymerase Mix

· 2X Terra PCR Direct Buffer (with Mg²⁺, dNTP)

· Dilution Buffer

· RNase-free Water

· Annealing Buffer

· Flapase Buffer

· Guide-it Flapase

· Guide-it Green Flap Detector (40X)

· Guide-it Red Flap Detector (40X)

■ 保存

MightyPrep Reagent for DNA：4℃

其它：－20℃

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Clontech 632646 Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library System 5 Screens酶试剂盒

发表于2022年9月23日由修饰性PEG

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

CRISPR全基因组sgRNA文库系统
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	632646	Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library System	5 Screens	￥21,144
Clontech	632647	Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library NGS Analysis Kit	10 Rxns	￥7,004
Clontech	632651	Guide-it CRISPR Genome-Wide Library PCR Kit	20 Rxns	￥3,445

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Clontech 632646 Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library System 5 Screens

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注意：购买632646产品时，需要填写专利确认书

CRISPR全基因组sgRNA文库系统

· 包含超过76,000条基于Brunello文库的sgRNAs，既可以实现更高的靶向特异性和靶向活性，
   同时也可以保持很低的脱靶效应点击下载sgRNA representation data.
· 每一个人类基因对应4条高活性sgRNAs, 可以通过单一模块进行筛选
· 优化后的sgRNA scaffold有助于加强Cas9-sgRNA之间的相互作用，实现高基因编辑效率
· 慢病毒sgRNA文库已与Lenti-X Packaging Single Shots和Xfect Transfection Reagent
   配制在一起，因此只需要加入水就可以获得高效转染混合液，用于转染Lenti-X 293T cells
   制备高滴度慢病毒sgRNA文库
· 自失活慢病毒载体保证慢病毒制备和使用过程中高水平的生物安全性

Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library System可以使用CRISPR/Cas9在人细胞中轻松实现全基因组表型敲除筛选。Lenti-X Single Shots包含了全基因组sgRNA文库和Cas9表达系统，可方便制备出稳定表达Cas9和sgRNA文库的细胞系进行每一次筛选。该sgRNA文库是基于Brunello文库 (Doench et al. 2016; Doench, 2018) 所构建的，包含了超过76,000条向导RNA以及非靶向sgRNA对照，每一个人类基因对应4条高效率sgRNAs，可对大约19,000个基因进行有效筛选。文库筛选后，使用Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library NGS Analysis Kit制备NGS样品进行新一代测序分析，此试剂盒包含了以sgRNA文库转导后的细胞来制备NGS样品所必需的引物和试剂。

我们精心构建这个sgRNA文库以确保其固有的sgRNA代表性。在文库合成、扩增、病毒制备和靶细胞转导每一步操作过程中，我们都会对sgRNA代表性进行检测。Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library System包含经过验证的构建在慢病毒载体上的sgRNA文库和Lenti-X 293T cells，这个sgRNA文库以脱水形式提供。只需要添加水至冻干的文库混合物中就可以获得高效转染混合液，然后将混合物添加至293T细胞的培养液中进行转染就可以制备获得慢病毒粒子。每一批sgRNA文库都通过NGS进行了检测，确保超过90%的sgRNAs在10倍分布范围以内。我们也优化了pLVXS-sgRNA-mCherry-hyg载体中的sgRNA scaffold序列，有助于加强Cas9-sgRNA之间的相互作用，实现高基因编辑效率。本系统通过使用高滴度的慢病毒包装系统Lenti-X Packaging Single Shots，可以有效维持慢病毒sgRNA文库的代表性。

应用：

· 人细胞全基因组表型筛选
· 功能缺失型遗传筛选

注意事项：

· Guide-it CRISPR Genome-Wide Library PCR Kit (Code No. 632651) 包含了扩增sgRNA进行
   NGS分析的所有引物和试剂，起始样品为从筛选出的细胞群分离提取的基因组DNA，
   此试剂盒可用于制备10个测序文库（20 PCRs）。
· Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library NGS Analysis Kit (Code No. 632647)包含
   Guide-it CRISPR Genome-Wide Library PCR Kit和基因组DNA纯化试剂以及PCR产物纯化试剂。

参考文献：

Doench, J.G. Am I ready for CRISPR? A user’s guide to genetic screens. Nat. Rev. Genet.19, 67 80 (2018).
Doench, J.G. et al. Optimized sgRNA design to maximize activity and minimize off-target effects of CRISPR-Cas9. Nat. Biotechnol. 34, 184 191 (2016).

Technical Notes

Performing a phenotypic screen using the Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library System

CRISPR screening webinar

Lentiviral CRISPR/Cas9 knockout screening made simple

实验例：

图1 Guide-it CRISPR sgRNA文库所使用的载体和sgRNA scaffold示意图。Panel A. 从pLVXS-EF1a-Cas9-PGK-Puro和pLVXS-sgRNA-mCherry-hyg 载体图谱中我们可以观察到所使用的慢病毒载体骨架。这些慢病毒载体经过了自失活处理，以提高病毒制备和使用过程中的生物安全性。pLVXS-sgRNA-mCherry-hyg载体包含一个IRES连接的双顺反子表达框，可以同时表达mCherry红色荧光标记和潮霉素抗性筛选标记。sgRNAs由人U6启动子表达，包含经过优化的scaffold序列，可以高效招募Cas9，实现更高的基因编辑效率(Panel B)。

图2 通过mCherry红色荧光判断慢病毒sgRNA文库的转导效率。按照用户手册的指导来制备慢病毒sgRNA文库，转染48小时后收集慢病毒粒子，以不同的MOIs转导表达Cas9的A375细胞。接种培养转导后的细胞，转导48小时后通过荧光显微镜和FACS 检测转导效率。

图3 Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library System包含的sgRNA代表性分析。Panel A. 质粒文库中的sgRNA代表性分析。将基于Brunello的sgRNA文库克隆至pLVXS-sgRNA-mCherry-hyg载体并进行扩增，通过NGS验证这个质粒文库中的sgRNAs代表性。检测结果显示，这个文库中超过90%的sgRNAs在10倍分布范围以内。图表中的柱形表示具有特定读段数的sgRNA数量。Panel B. 比较质粒文库和转导细胞中的sgRNA代表性。以潮霉素为筛选标记，筛选出Cas9+/sgRNA+ A375细胞，提取基因组DNA并进行PCR扩增。测序分析PCR产物，检测PCR产物中每一个整合的sgRNA相对于起始质粒DNA文库的读数。Spearman和Pearson相关性分析结果显示这两者都具有强相关性，这说明这个系统无论是在经过转导的细胞中还是筛选后的细胞中都可以有效保持sgRNA的代表性。

图4 使用6-硫鸟嘌呤（6-TG，一种核苷酸类似物癌症治疗药物）作为筛选标记进行sgRNA文库筛选的操作流程示意图。sgRNA文库转导Cas9+ A375细胞后，进行潮霉素筛选、细胞扩培，之后将Cas9+/sgRNA+细胞传代至两个培养皿中。在其中一皿Cas9+/sgRNA+细胞培养液中添加6-TG，另外一皿细胞不添加6-TG使用常规培养条件进行培养。细胞扩培之后，使用Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library NGS Analysis Kit提取基因组DNA并制备测序样品。

图5 从6-thioguanine (6-TG)筛选出的细胞中分离提取sgRNAs进行鉴定分析。Panel A. 比较用于制备慢病毒的原始质粒文库和转导后未经筛选/筛选后细胞中的sgRNA代表性。作用于HPRT（红点）和NUDF5的4条sgRNAs（黑点）均富集在6-TG筛选过的细胞中。在质粒文库（灰色）和转导后未经筛选的细胞（橘色）中，这些sgRNAs的表征也是可以检测到的。Panel B. 在经过6-TG筛选后的细胞中，sgRNA的代表性就发生了转变（蓝色）。在这个相关性分析中，重点标注出了被富集的单个sgRNAs（红点和橘点）。插图显示了与未经筛选的细胞相比，在筛选后的细胞中作用于HPRT的4条sgRNAs的富集倍数。

■ 产品组份

Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library System（Code No. 632646）
Guide-it Cas9 Lentiviral Transfection Mix	5 vial
Guide-it Lentiviral sgRNA Library Transfection Mix	5 vial × 2
pLVXS-sgRNA-mCherry-hyg Vector (0.5 μg/μl)	10 μl
Lenti-X 293T Cell Line	1 ml
Lenti-X GoStix Plus
· Chase Buffer	3 ml
· Lenti-X GoStix Plus	3 testes
· p24 Control	5 testes

Guide-it CRISPR Genome-Wide Library PCR Kit（Code No. 632651）
LVXS P5 primer pool with index 1 (10 μM)	100 μl
LVXS P7 primer with index 2 (10 μM)	100 μl
LVXS P7 primer with index 3 (10 μM)	100 μl
LVXS P7 primer with index 4 (10 μM)	100 μl
LVXS P7 primer with index 5 (10 μM)	100 μl
TaKaRa Ex Taq （5 U/μl)	30 μl
10X Ex Taq Buffer (Mg²⁺ plus)	500 μl
dNTP Mixture (2.5 mM each)	400 μl

Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library NGS Analysis Kit（Code No. 632647）
Guide-it CRISPR Genome-Wide Library PCR Kit（Code No. 632651）
NucleoBond CB 500（Code No. 740509）
NucleoSpin Gel and PCR Clean-up (Code No. 740609.10）

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Clontech 632606 Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody 3 x 100 μl酶试剂盒

发表于2022年9月23日由修饰性PEG

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

Cas9蛋白质检测抗体
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	632606	Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody	3 x 100 μl	￥8,005
Clontech	632607	Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody	100 μl	￥2,669
Clontech	632627	Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1)	3 × 100 μg	￥6,786
Clontech	632628	Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1)	100 μg	￥2,511

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Guide – 修饰性PEG

Clontech 632606 Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody 3 x 100 μl

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Cas9蛋白质检测抗体

· 重组Cas9蛋白质检测用单克隆抗体/多克隆抗体
· 多克隆抗体可识别野生型Cas9蛋白质和切口酶突变体（单克隆抗体还未进行测验）
· 高特异性：检测哺乳动物细胞裂解液样品时背景很低
· 高灵敏度：这两种抗体均可检测低于1 ng的重组Cas9蛋白质

■ 产品说明：

Takara Bio提供的单克隆抗体和多克隆抗体可用于检测Streptococcus pyogenes来源的重组Cas9蛋白质。
Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1)是以Streptococcus pyogenes来源的全长重组Cas9蛋白质为抗原，采用杂交瘤细胞制备生产的小鼠源抗体。用于Western blot检测时，此抗体可以识别细菌和哺乳动物细胞裂解液样品中低于1 ng的重组Cas9蛋白质。
Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody是用于检测Streptococcus pyogenes来源的重组Cas9蛋白质的兔源抗体。此抗体可以识别Cas9核酸酶的3种突变体：野生型Cas9蛋白质、Cas9切口酶和Cas9核酸酶-缺陷型突变体。此抗体具备高特异性和高灵敏度，检测哺乳动物细胞样品时其背景很低，用于Western blot检测时可识别低至0.5 ng的重组Cas9蛋白质。

图1． Western blot评估Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody检测灵敏度

0.15-20.0 ng重组Cas9蛋白质（rCas9）电泳后采用Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody(1:1,000稀释)进行Western Blot检测。采用HRP-conjugated goat anti-rabbit secondary antibody（1:5,000 稀释）作为二抗，ECL作为检测试剂。HT1080、HEK293细胞裂解液作为阴性对照。

Lane 1：HT1080細胞裂解液（3.5×10⁴ cells）

Lane 6：rCas9 protein 1.25 ng

Lane 2：HEK293細胞裂解液（3.5×10⁴ cells）

Lane 7：rCas9 protein 2.5 ng

Lane 3：rCas9 protein 0.15 ng

Lane 8：rCas9 protein 5.0 ng

Lane 4：rCas9 protein 0.30 ng

Lane 9：rCas9 protein 10.0 ng

Lane 5：rCas9 protein 0.625 ng

Lane 10：rCas9 protein 20.0 ng

图2．Western blot评估Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody检测特异性

制备多种未转染细胞和表达Cas9重组蛋白质的HEK 293细胞（CMV启动子）的细胞裂解液，以细胞裂解液为样品通过Western blot方法评估Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody检测特异性。1 ng重组Cas9蛋白质（rCas9）作为阳性对照。Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody (1:1,000稀释)作为一抗，HRP-conjugated goat anti-rabbit secondary antibody（1:5,000 稀释）作为二抗，ECL作为检测试剂。

Lane 1：HepG2细胞裂解液（3.5×10⁴ cells）

Lane 8：裂解缓冲液

Lane 2：CHO-K1细胞裂解液（3.5×10⁴ cells）

Lane 9：rCas9 protein 1 ng

Lane 3：HeLa细胞裂解液（3.5×10⁴ cells）

Lane 10：Cas9表达HEK293细胞裂解液（2.0×10³ cells）

Lane 4：MCF7细胞裂解液（3.5×10⁴ cells）

Lane 11：Cas9表达HEK293细胞裂解液（5.0×10³ cells）

Lane 5：HEK293细胞裂解液（3.5×10⁴ cells）

Lane 12：Cas9表达HEK293细胞裂解液（1.0×10⁴ cells）

Lane 6：HT1080细胞裂解液（3.5×10⁴ cells）

Lane 13：Cas9表达HEK293细胞裂解液（1.5×10⁴ cells）

Lane 7：NIH3T3细胞裂解液（3.5×10⁴ cells）

图3. Western blot评估Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1) 检测灵敏度

A. 1～5 ng重组Cas9蛋白质(rCas9）电泳后采用Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1）（1：3,000稀释）进行Western Blot检测。HEK293细胞裂解液作为阴性对照。
B. 以表达Cas9重组蛋白质的HEK 293细胞的细胞裂解液为样品，采用Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1）（1：3,000稀释）进行Western Blot检测。HT1080、HEK293细胞裂解液作为阴性对照。

■ 保存

－20℃

■ 用途

Western blot（1：1,000～1：5,000稀释）

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Clontech 632644 Guide-it Long ssDNA Production System 25 Rxns酶试剂盒

发表于2022年9月23日由修饰性PEG

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

基因敲入用长单链DNA制备 v1
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	632644	Guide-it Long ssDNA Production System	25 Rxns	￥5,654
Clontech	632645	Guide-it Long ssDNA Strandase Kit	25 Rxns	￥4,159

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基因敲入用长单链DNA制备

CRISPR/Cas9和其它基因编辑工具已经被成功应用于获得基因敲除突变（knockout），但众多事实证明在基因敲入上的应用有很大的难度。基因敲入所面临的主要难题是修复模板的制备和如何与Cas9-sgRNA核糖核蛋白复合物共导入至细胞。
虽然单链DNA（ssDNA）修复模板展示出了优于双链DNA（dsDNA）模板的众多优势，但是其制备难度和制备费用都有很大的挑战性，因而限制了长单链DNA（long ssDNA）模板的应用。Guide-it Long ssDNA Strandase Kit可以很好地解决这个矛盾，可制备长达5 kb的ssDNA寡核苷酸，应用于CRISPR/Cas9或者其它基因编辑技术作为基因敲入实验修复模板。本试剂盒提供了一种简便的方法通过有选择地消化降解双链DNA PCR产物的正义链（sense strand）或者反义链（antisense strand），将其转化为单链DNA。该试剂盒提供了可以制备50条ssDNA链的足量试剂（25对正义链和反义链）。

与dsDNA相比，使用ssDNA作为模板的优势：

· 显著降低了随机整合到基因组中的概率，从而提高了基因编辑效率
· ssDNA模板导入产生的细胞毒性反应低
· 不存在随机整合或者表达，提高了基因编辑效率
· 非整合模板中不表达，更容易识别发生正确基因编辑的细胞克隆

注意：Guide-it Long ssDNA Production System包含NucleoSpin Gel 和 PCR Clean-up kit，用于在基因编辑实验之前纯化strandase反应液。

■ Overview

· 制备长达5 kb的长单链DNA（ssDNA）供体模板
· 三步操作，快速，简便易用
· 不存在随机整合或者表达，从而提高了基因编辑效率
· 单链DNA供体模板产生的细胞毒性远低于双链DNA模板

■ 应用

· 制作基因敲入实验供体模板，DNA片段> 500 bp

■ 操作流程概要

Clontech 632644 Guide-it Long ssDNA Production System 25 Rxns

图1. 同源定向修复（Homology Directed Repair）实验用长单链DNA（long ssDNA）供体模板制备步骤示意图。第一步，通过合适的方法（克隆，融合PCR等）制作dsDNA起始模板，dsDNA模板包含与目的插入位点两侧同源的同源臂，模板中间是欲knockin的外源序列。第二步，通过在第一步中产生的dsDNA的不同位置上结合磷酸化的引物，制备出两种不同的dsDNA作为Strandase反应的底物。添加Strandase Mix A，开始消化降解正义链或反义链（Strandase Mix A有选择性地降解磷酸化的DNA链）。第三步，添加Strandase Mix B完成降解反应，从而获得ssDNA。最后，纯化ssDNA产物用于knockin实验。我们建议制备ssDNA正义链和ssDNA反义链并独立用于knockin实验。

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sgRNA体外转录和筛选酶试剂盒Takara Clontech

发表于2022年8月22日由修饰性PEG

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

sgRNA体外转录和筛选
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	632635	Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit	50 Rxns	￥8,771 ￥7,017
Clontech	632636	Guide-it Complete sgRNA Screening System	50 Rxns	￥10,701 ￥8,561
Clontech	632639	Guide-it sgRNA Screening Kit	50 Rxns	￥4,810 ￥3,848
Clontech	632638	Guide-it IVT RNA Clean-Up Kit	50 Rxns	￥4,439

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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Guide – 修饰性PEG

			基因敲除
		↗		→	→
→	→
→	→		基因敲入
		↘

sgRNA的体外转录和筛选试剂盒
In Vitro Transcription and Screening Kits for sgRNA

■ 产品特点

■ 实验例

图1. Guide-it sgRNA In Vitro Transcription and Screening System试剂盒组成和操作流程

图2. 采用Guide-it试剂盒制备高产量single guide RNA (sgRNA)和重组Cas9蛋白质剪切靶位点检测sgRNA剪切效率操作步骤概要

* 比较结果来自于Takara Bio USA, Inc.

■ 产品组份

Guide-it Complete sgRNA Screening System (Code No. 632636; 50 rxns)
· Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit (Code No. 632635)
· Guide-it sgRNA Screening Kit (Code No. 632639)

■ 关联资料
点击查看Guide-it^™ sgRNA体外转录和筛选系统宣传页

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重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)酶试剂盒Takara Clontech

发表于2022年8月22日由修饰性PEG

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	632640	Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μ)	3 × 100 μg	￥6,845
Clontech	632641	Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μ)	100 μg	￥2,701

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Guide – 修饰性PEG

Guide-it Recombinant Cas9 (Electroporation Ready)（Code No. 632641/632640）产品名称变更为Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl) ，产品内容没有发生变化。（2021年5月）

			基因敲除
		↗		→	→
→	→
→	→		基因敲入
		↘

降低脱靶效应，可用于in vivo基因编辑实验

Guide-it^™ Recombinant Cas9 (3 μg/μl)

■ 产品说明：

■ 实验例：

* 比较结果来自于Takara Bio USA, Inc.

■ 浓度

3 μg/μl

■ 保存

－70℃
（注意）避免反复冻融。首次溶解之后，建议按照使用量分装保存。

■ 所需要的其它产品（主要产品）

· 电穿孔装置：
Neon Transfection System（Thermo Fisher Scientific）或者 4-D Nucleofector System（Lonza）
*各装置的导入条件请阅读使用说明书。

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■ 关联资料
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修饰性PEG

DSPE SH COOH MAL NH2 巯基羧基氨基四臂八臂PEG WAKO和光纯药

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Clontech 632640 Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl) 3 × 100 μg酶试剂盒

Clontech 632652 Guide-it SNP Screening Kit 100 Rxns酶试剂盒

Clontech 632659 Guide-it™ Knockin Screening Kit 100 Rxns酶试剂盒

Clontech 632646 Guide-it CRISPR Genome-Wide sgRNA Library System 5 Screens酶试剂盒

Clontech 632606 Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody 3 x 100 μl酶试剂盒

Clontech 632644 Guide-it Long ssDNA Production System 25 Rxns酶试剂盒

sgRNA体外转录和筛选酶试剂盒Takara Clontech

重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)酶试剂盒Takara Clontech

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