Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 深红色荧光 货号15296-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 深红色荧光

Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 深红色荧光

Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 深红色荧光     货号15296 货号 15296 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 6564
Ex (nm) 593 Em (nm) 655
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒是美国AAT Bioquest研发的检测NADP/NADPH的试剂盒,细胞内二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH及其磷酸酯NADPH的检测对于疾病诊断和药物发现是重要的。通常,氧化还原偶联NAD / NADH和NADP / NADPH在能量代谢,糖酵解,三羧酸循环和线粒体呼吸中起关键作用。细胞中NAD(P)H水平升高与活性氧(ROS)和DNA损伤的异常产生有关。然而,由于缺乏敏感的NAD(P)H探针,检测细胞内NAD具有挑战性。(P)H在生物系统中。Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒提供了一种监测远光谱活细胞中细胞内NAD(P)H水平的有效方法,可与其他应用如GFP表达细胞或MitoTracker的应用相结合。JJ1902 NAD(P)H探针是一种优秀的荧光探针,用于检测和成像细胞中的NADH / NADPH。该荧光探针结合NADH / NADPH,产生高灵敏度和特异性的强荧光信号。JJ1902 NAD(P)H探针可以很容易地加载到活细胞中,并且可以使用APC通道中的流式细胞仪方便地监测其荧光信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒。 

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 640nm激光
发射: 660/20nm滤波片
通道: APC通道

产品说明书

实验样品示例

概述

1.准备细胞(0.5  –  1×106细胞/ mL)

2.将含有测试化合物和JJ1902 NAD(P)H探针的细胞在37℃孵育20-30分钟

3.将细胞洗净并保持在测定缓冲液中

4.使用APC通道用流式细胞仪分析细胞

注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分。

 

操作方法

1.对于每个样品,将细胞制备在0.5 mL无血清培养基或您选择的缓冲液中,密度为1×105至1×106个细胞/ mL。

注意1:应对每个细胞系进行单独测评,以确定最佳细胞密度。 对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并用无血清培养基洗涤细胞一次。

注意2:JJ1902 NAD(P)H探针在血清存在的情况下也兼容。

 

2.将细胞与测试化合物在37℃孵育所需的一段时间以刺激细胞内NADH / NADPH。

注意:适当的孵育时间取决于单个细胞类型和使用的测试化合物。 优化每个实验的孵育时间。

 

3.将1μL JJ1902NAD(P)H探针(组分A)加入0.5 mL细胞悬浮液中。在37℃下孵育30-60分钟。

注意对于NADH / NADPH阳性对照处理:将Jurkat细胞与100μMNADH或NADPH在无血清培养基中孵育30分钟,并与JJ1902 NAD(P)H探针工作溶液在37℃下共温育30分钟。 详细信息请参见说明书中的图1。

4.用所需的缓冲液(如HHBS或DPBS)洗涤细胞一次。将细胞保存在分析缓冲液(组分B)中。

 

5.使用流式细胞仪监测APC通道的荧光强度。

 

参考文献

Celastrol attenuates angiotensin II mediated human umbilical vein endothelial cells damage through activation of Nrf2/ERK1/2/Nox2 signal pathway
Authors: Miao Li, Xin Liu, Yongpeng He, Qingyin Zheng, Min Wang, Yu Wu, Yuanpeng Zhang, Chaoyun Wang
Journal: European Journal of Pharmacology (2017): 124–133

Cytosolic Redox Status of Wine Yeast (Saccharomyces Cerevisiae) under Hyperosmotic Stress during Icewine Fermentation
Authors: Fei Yang, Caitlin Heit, Debra L Inglis
Journal: Fermentation (2017): 61

Epigenetic regulation of Runx2 transcription and osteoblast differentiation by nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Min Ling, Peixin Huang, Shamima Islam, Daniel P Heruth, Xuanan Li, Li Qin Zhang, Ding-You Li, Zhaohui Hu, Shui Qing Ye
Journal: Cell & Bioscience (2017): 27

MCU-dependent mitochondrial Ca2+ inhibits NAD+/SIRT3/SOD2 pathway to promote ROS production and metastasis of HCC cells
Authors: T Ren, H Zhang, J Wang, J Zhu, M Jin, Y Wu, X Guo, L Ji, Q Huang, H Yang
Journal: Oncogene (2017)

Metabolic and molecular insights into an essential role of nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Li Q Zhang, Leon Van Haandel, Min Xiong, Peixin Huang, Daniel P Heruth, Charlie Bi, Roger Gaedigk, Xun Jiang, Ding-You Li, Gerald Wyckoff
Journal: Cell Death & Disease (2017): e2705

Pyrroloquinoline Quinone, a Redox-active o-Quinone, Stimulates Mitochondrial Biogenesis by Activating SIRT1/PGC-1α Signaling Pathway
Authors: Kazuhiro Saihara, Ryosuke Kamikubo, Kazuto Ikemoto, Koji Uchida, Mitsugu Akagawa
Journal: Biochemistry (2017)

Resveratrol attenuates excessive ethanol exposure induced insulin resistance in rats via improving NAD+/NADH ratio
Authors: Gang Luo, Bingqing Huang, Xiang Qiu, Lin Xiao, Ning Wang, Qin Gao, Wei Yang, Liping Hao
Journal: Molecular Nutrition & Food Research (2017)

A Snapshot of the Plant Glycated Proteome STRUCTURAL, FUNCTIONAL, AND MECHANISTIC ASPECTS
Authors: Tatiana Bilova, Elena Lukasheva, Dominic Brauch, Uta Greifenhagen, Gagan Paudel, Elena Tarakhovskaya, Nadezhda Frolova, Juliane Mittasch, Gerd Ulrich Balcke, Alain Tissier
Journal: Journal of Biological Chemistry (2016): 7621–7636

AMPK activation protects cells from oxidative stress-induced senescence via autophagic flux restoration and intracellular NAD+ elevation
Authors: Xiaojuan Han, Haoran Tai, Xiaobo Wang, Zhe Wang, Jiao Zhou, Xiawei Wei, Yi Ding, Hui Gong, Chunfen Mo, Jie Zhang
Journal: Aging cell (2016): 416–427

Cell-Line Selectivity Improves the Predictive Power of Pharmacogenomic Analyses and Helps Identify NADPH as Biomarker for Ferroptosis Sensitivity
Authors: Kenichi Shimada, Miki Hayano, Nen C Pagano, Brent R Stockwell
Journal: Cell chemical biology (2016): 225–235

 

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产品名称 货号
Cell Meter 胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 Cat#15291

说明书
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钙离子荧光探针Rhod-5N, AM 货号21070-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Rhod-5N, AM

钙离子荧光探针Rhod-5N, AM

钙离子荧光探针Rhod-5N, AM    货号21070 货号 21070 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 3264
Ex (nm) 557 Em (nm) 580
分子量 1154.92 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

钙离子荧光探针Rhod-5N, AM是美国AAT Bioquest生产的用于标记钙离子的荧光探针,钙的测量对于许多生物学研究至关重要。荧光探针显示结合Ca2+后的光谱响应,使研究人员能够通过荧光显微镜,流式细胞仪,荧光光谱和荧光酶标仪研究细胞内游离Ca2+浓度的变化。Rhod-5N对Ca2+的结合亲和力(Kd =~320μM)低于任何其他基于BAPTA的指示剂,并且适用于10μM至1mM的Ca2+测量。与Rhod-2指示剂一样,Rhod-5N在不存在二价阳离子的情况下基本上是非荧光的,并且表现出强烈的荧光增强,在结合Ca2+时没有光谱移位。Rhod-5N AM是Rhod-5N的细胞渗透型。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的钙离子荧光探针。

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钙离子篇:时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

操作说明

1.准备HHBS缓冲液,10%Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。
 

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Rhod-5N,AM原液。
2.1使用量的Rhod-5N,AM:1毫克
2.2所需浓度:2 mM
2.3在合适的容器中,将1mg Rhod-5N,AM与432.93μL无水DMSO混合。
 

3.用含有10μMRhod-5N,AM 4的HHBS制备2X工作溶液,0.08%Pluronic®F-127和2 mM丙磺舒。
3.1最终孔内浓度为Rhod-5N,AM:5μM
3.2Pluronic®F-127的最终井内浓度:0.04%
3.3最终孔内浓度的丙磺舒:1mM
3.4在合适的容器中混合16μL的Rhod-5N,AM,25.6μL的10%Pluronic F-127和256μL的25mM丙磺舒。然后添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为3.2 mL。
注意:对于大多数细胞系,我们建议最终浓度为Rhod-5N,AM为4至5μM。
注意:推荐的Pluronic F-127井浓度最终为0.02%至0.04%。
注意:推荐的最终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
 

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X,并将每种组分的最终浓度调节至以下:5μM的Rhod-5N,AM,0.04%Pluronic F-127,1mM丙磺舒。
 

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-120分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
 

6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液(或您选择的缓冲液)。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为4 mL。
 

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液,使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先,从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS(或您选择的缓冲液)。
 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 551/577 nm运行实验。

 

参考文献

Activation of mitochondrial transient receptor potential vanilloid 1 channel contributes to microglial migration
Authors: Takahito Miyake, Hisashi Shirakawa, Takayuki Nakagawa, Shuji Kaneko
Journal: Glia (2015): 1870–1882

ER stress in human hepatic cells treated with Efavirenz: mitochondria again
Authors: Nadezda Apostolova, Leysa J Gomez-Sucerquia, Fernando Alegre, Haryes A Funes, Victor M Victor, Maria D Barrachina, Ana Blas-Garcia, Juan V Esplugues
Journal: Journal of hepatology (2013): 780–789

说明书
钙离子荧光探针Rhod-5N, AM.pdf

MitoLite CMXRos线粒体红色染料 CAS 167095-09-2 货号22698-AAT Bioquest荧光染料

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MitoLite CMXRos线粒体红色染料 CAS 167095-09-2

MitoLite CMXRos线粒体红色染料 CAS 167095-09-2

MitoLite CMXRos线粒体红色染料 CAS 167095-09-2    货号22698 货号 22698 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10×50 ug 价格 1944
Ex (nm) 578 Em (nm) 598
分子量 531.52 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:22698

产品名称:MitoLite CMXRos线粒体红色染料

CAS:167095-09-2

规格:10×50 ug

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:6个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:N/A

外观:固体

溶剂:DMSO

激发波长(nm):579

发射波长(nm):599

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: TRITC滤波片组
发射: TRITC滤波片组
推荐孔板: 黑色透明

 

产品介绍

MitoLite CMXRos红色染料是美国AAT Bioquest生产的用于线粒体标记的试剂,MitoLite Red CMXRos与MitoTracker Red CMXRos(ThermoFisher)在化学结构上完全相同。MitoLite CMXRos红色染料是一种阳离子染料,可选择性地积聚在线粒体中,它的累积取决于膜电位。线粒体指示剂是一种疏水性化合物,很容易透过完整的活细胞,并在进入细胞后被线粒体捕获。这种荧光线粒体指示剂长时间保留在线粒体中,因为该指示剂带有细胞保留基团。这一关键特性显著提高了染色效率。MidoLite CMXRos红色染料在醛固定后保留良好。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MitoLite CMXRos红色染料。 

 

参考文献

Flow cytometric readout based on Mitotracker Red CMXRos staining of live asexual blood stage malarial parasites reliably assesses antibody dependent cellular inhibition
Authors: P. S. Jogdand
Journal: Malar J (2012): 235

Detection of apoptosis in live cells by MitoTracker red CMXRos and SYTO dye flow cytometry
Authors: Poot M, Gibson LL, Singer VL.
Journal: Cytometry (1997): 358

说明书
MitoLite CMXRos线粒体红色染料 CAS 167095-09-2.pdf

钙离子荧光探针Rhod-FF, 三钾盐 货号21075-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Rhod-FF, 三钾盐

钙离子荧光探针Rhod-FF, 三钾盐

钙离子荧光探针Rhod-FF, 三钾盐    货号21075 货号 21075 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 3924
Ex (nm) 553 Em (nm) 577
分子量 891.00 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

钙离子荧光探针Rhod-FF, 三钾盐是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针,钙测量对于许多生物学研究至关重要。在结合Ca2 +后显示光谱响应的荧光探针使研究人员能够使用荧光显微镜,流式细胞仪,荧光光谱和荧光酶标仪来研究细胞内游离Ca2 +浓度的变化。Rhod-FF对Ca2 +具有较低的结合亲和力,适用于10至200 uM的Ca2 +测量。像母体Rhod-2指示剂一样,Rhod-FF在不存在二价阳离子的情况下基本上是无荧光的,并且在结合Ca2+时显示出强的荧光增强,并且没有光谱偏移。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的钙离子荧光探针Rhod-FF, 三钾盐。

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钙离子篇:时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

钙指示剂AM Esters的使用

1.带有钙指示剂AM酯:

        AM酯是非极性酯,其易于穿过活细胞膜,并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是,使用AM酯时必须小心,因为它们易于水解,特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜(DMSO)。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下,AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM,Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

a)在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM,Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b)在实验当天,将Cal-520 AM,Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的缓冲液(0.04%Pluronic®F-127)中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意:非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM,Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c)如果您的细胞(如CHO细胞)含有有机阴离子转运蛋白,可将丙磺舒(1-2 mM)加入染料工作溶液中(最终浓度为0.5-1 mM)以减少渗漏去酯化指标。

d)将等体积的染料工作溶液(来自步骤b或c)加入细胞板中。

e)将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟,然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意:孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f)用HHBS或您选择的缓冲液(含有阴离子转运蛋白抑制剂,如1mM丙磺舒,如果适用)替换染料工作溶液,以去除多余的探针。

g)在Ex / Em = 490 / 525nm(对于Cal-520 AM),540 / 5000nm(对于Cal-590 AM)或600 / 640nm(对于Cal-630 AM)进行实验。

 

2.测量细胞内钙响应:

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd,使用以下等式:

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光,Fmin是不存在钙时的荧光,Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数(Kd)是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比,荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者,细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。

 

参考文献

Activation of mitochondrial transient receptor potential vanilloid 1 channel contributes to microglial migration
Authors: Takahito Miyake, Hisashi Shirakawa, Takayuki Nakagawa, Shuji Kaneko
Journal: Glia (2015): 1870–1882

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Authors: Nadezda Apostolova, Leysa J Gomez-Sucerquia, Fernando Alegre, Haryes A Funes, Victor M Victor, Maria D Barrachina, Ana Blas-Garcia, Juan V Esplugues
Journal: Journal of hepatology (2013): 780–789

 

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产品名称 货号
钙离子荧光探针Rhod-5N,三钾盐 Cat#21072
钙离子荧光探针Rhod-2,三钾盐 Cat#21067

说明书
钙离子荧光探针Rhod-FF, 三钾盐.pdf

链霉亲和素 Streptavidin 货号16885-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

链霉亲和素 Streptavidin

链霉亲和素 Streptavidin

链霉亲和素 Streptavidin    货号16885 货号 16885 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1272
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:16885

产品名称:链霉亲和素 Streptavidin

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:N/A

溶剂:水

激发波长(nm):N/A

发射波长(nm):N/A

 

产品介绍

链霉亲和素 Streptavidin是美国AAT Bioquest生产的链霉亲和素,链霉亲和素是一种在抗生物素蛋白链霉菌的培养液中发现的生物素结合蛋白。链霉亲和素以每摩尔蛋白质结合4摩尔生物素的高亲和力实际上是自然界无法比拟的。链霉亲和素缺乏存在于抗生物素蛋白上的碳水化合物侧链,并具有更接近中性的等电点,其中发生了最有用的生物学相互作用(抗生物素蛋白的pI为5-6,而pI为10)。结果,当蛋白在依赖于抗生物素蛋白/生物素复合物形成的应用中使用时,抗生物素蛋白链菌素通常表现出比抗生物素蛋白更低的非特异性结合水平。链霉亲和素容易溶于水或缓冲液。当冻干的抗生蛋白链菌素在中性或酸性pH下重新溶解于水或其他低离子强度的缓冲液中时,有聚集的趋势。在基于ELISA的诊断系统中,针对特定抗原的抗体可以共价附着于报道酶。与这些结合分子结合后,然后通过酶促测定对抗原进行定量。不幸的是,必须针对每种抗体/报告物组合分别确定完成这种共价连接的精确条件,并且通常导致报告酶的酶活性或抗体结合功能的显着丧失。链霉亲和素可在这些系统中找到用处,因为抗体分子易于通过生物素衍生物的共价连接进行修饰,而抗体分子结合其抗原的能力几乎没有或没有损失。这些生物素化的抗体可以通过它们与链霉亲和素和报道酶的缀合物的相互作用来检测。缀合链霉亲和素报告酶的相同制剂可与多种不同的生物素化抗体一起使用,从而使该系统具有高度的灵活性。报道分子可以与链霉抗生物素蛋白共价结合,或通过链霉抗生物素蛋白-生物素相互作用被生物素化并附着于链霉抗生物素蛋白。由于链霉亲和素是多价的(每个四聚体蛋白分子结合4分子生物素分子),因此可以与生物素化抗体和生物素化报道酶结合使用,以获得放大的信号。否则难以获得ELISA中的这种扩增,并且需要引入额外的抗体组分。使用链霉亲和素的ELISA系统可以容易地检测亚纳克级的抗原。链霉亲和素缀合物与生物素缀合物一起广泛用于特异性检测多种蛋白质,蛋白质基序,核酸和其他分子,因为链霉亲和素对生物素具有非常高的结合亲和力。该RPE-链霉亲和素缀合物包含链霉亲和素(作为生物素结合蛋白)和共价连接的RPE(作为荧光标记)。当与生物素化的一抗结合使用时,通常用作间接免疫荧光染色的第二步试剂。它是使用流式细胞仪,酶标仪和微阵列平台进行基于生物素-链霉亲和素的生物学测定和测试的非常有价值的工具。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的链霉亲和素 Streptavidin。 

 

参考文献

A bio-coupling approach using a dextran-binding domain to immobilize an engineered streptavidin to Sephadex for easy preparation of affinity matrix
Authors: S. C. Wu
Journal: Sci Rep (2019): 3359

Artificial Metalloenzymes Based on the Biotin-Streptavidin Technology: Enzymatic Cascades and Directed Evolution
Authors: A. D. Liang
Journal: Acc Chem Res (2019): 585-595

Asymmetric delta-Lactam Synthesis with a Monomeric Streptavidin Artificial Metalloenzyme
Authors: I. S. Hassan
Journal: J Am Chem Soc (2019): 4815-4819

Detailed characterization of the solution kinetics and thermodynamics of biotin, biocytin and HABA binding to avidin and streptavidin
Authors: R. F. Delgadillo
Journal: PLoS One (2019): e0204194

Development of a biotin-streptavidin-amplified nanobody-based ELISA for ochratoxin A in cereal
Authors: Z. Sun
Journal: Ecotoxicol Environ Saf (2019): 382-388

Erroneous thyroid and steroid hormones profile due to anti-streptavidin antibodies
Authors: J. L. Bayart
Journal: Clin Chem Lab Med (2019): se name=”16885.enl” path=”C:WebsiteReferencesEN Files16885.enl”>16885.enlEndNote2217Bayart, J. L.Favresse, J.Melnik, E.Lardinois, B.Fillee, C.Maiter, D.Gruson, P. D.Departement des laboratoires cliniques, Cliniques Universitaires St. Luc – Universite

Functional horseradish peroxidase-streptavidin chimeric proteins prepared using a silkworm-baculovirus expression system for diagnostic purposes
Authors: Patmawati
Journal: J Biotechnol (2019): 28-31

Heterogeneous and rate-dependent streptavidin-biotin unbinding revealed by high-speed force spectroscopy and atomistic simulations
Authors: F. Rico
Journal: Proc Natl Acad Sci U S A (2019): 6594-6601

Interference of High Dose Biotin Supplementation with Thyroid Parameters in Immunoassays Utilizing the Interaction between Streptavidin and Biotin: a Case Report and Review of Current Literature
Authors: I. Mrosewski
Journal: Clin Lab (2019): se name=”16885.enl” path=”C:WebsiteReferencesEN Files16885.enl”>16885.enlEndNote101017Mrosewski, I.Neumann, I.Switkowski, R.Interference of High Dose Biotin Supplementation with Thyroid Parameters in Immunoassays Utilizing the Interaction between Stre

Orientation of Biotin-Binding Sites in Streptavidin Adsorbed onto the Surface of Polythiophene Films
Authors: K. Awsiuk
Journal: Langmuir (2019): 3058-3066

说明书
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钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM 货号21105-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM

钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM

钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM     货号21105 货号 21105 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 3924
Ex (nm) 495 Em (nm) 516
分子量 1082.91 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:21105

产品名称:钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM 

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:1082.91

溶剂:DMSO

激发波长(nm):494

发射波长(nm):517

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: FITC
发射: FITC
推荐孔板: 黑色透明
荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式

 

产品介绍

钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM 是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针,钙测量对于许多生物学研究至关重要。在结合Ca2+后显示光谱响应的荧光探针使研究人员能够使用荧光显微镜,流式细胞仪,荧光光谱和荧光酶标仪来研究细胞内游离Ca2+浓度的变化。在可见光激发钙指示剂中,Fluo-3和Fluo-4最常用。但是,Fluo-3 AM和Fluo-4 AM在酯酶水解后在活细胞中仅适度发荧光,并且需要苛刻的细胞加载条件才能最大化其细胞钙反应。开发Fluo-8®染料可改善细胞负载和钙响应,同时保持便捷的Fluo-3和Fluo-4光谱波长(在〜490 nm处具有最大激发和在〜520 nm处具有最大发射)。Fluo-8®AM仅需要室温,而Fluo-3 AM和Fluo-4 AM需要37℃的细胞负载。此外,Fluo-8®的亮度是Fluo-4 AM的2倍,是Fluo-3 AM的4倍。AAT Bioquest提供了一套出色的Fluo-8®试剂,具有不同的钙结合亲和力(Fluo-8®:Kd = 389 nM; Fluo-8H:Kd = 232 nM; Fluo-8L:Kd = 1.86 µM; Fluo-8FF :Kd = 10 µM)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM 。 

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钙离子篇:时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

 

试剂应用文献

AMPA receptors in the synapse turnover by monomer diffusion
Authors: 
Morise, Jyoji and Suzuki, Kenichi GN and Kitagawa, Ayaka and Wakazono, Yoshihiko and Takamiya, Kogo and Tsunoyama, Taka A and Nemoto, Yuri L and Takematsu, Hiromu and Kusumi, Akihiro and Oka, Shogo
Journal: 
Nature communications (2019): 1–18

Cryo-EM Studies of TMEM16F Calcium-Activated Ion Channel Suggest Features Important for Lipid Scrambling
Authors: Feng, Shengjie and Dang, Shangyu and Han, Tina Wei and Ye, Wenlei and Jin, Peng and Cheng, Tong and Li, Junrui and Jan, Yuh Nung and Jan, Lily Yeh and Cheng, Yifan
Journal: Cell Reports (2019): 567–579

Discrimination of Dormant and Active Hematopoietic Stem Cells by G0 Marker Reveals Dormancy Regulation by Cytoplasmic Calcium
Authors: Fukushima, Tsuyoshi and Tanaka, Yosuke and Hamey, Fiona K and Chang, Chih-Hsiang and Oki, Toshihiko and Asada, Shuhei and Hayashi, Yasutaka and Fujino, Takeshi and Yonezawa, Taishi and Takeda, Reina and others
Journal: Cell Reports (2019): 4144–4158

Ketamine Increases Proliferation of Human iPSC-Derived Neuronal Progenitor Cells via Insulin-Like Growth Factor 2 and Independent of the NMDA Receptor
Authors: Grossert, Aless and ra and Mehrjardi, Narges Zare and Bailey, Sarah J and Lindsay, Mark A and Hescheler, Jürgen and Saric, Tomo and Teusch, Nicole
Journal: Cells (2019): 1139

MRGPRX4 is a bile acid receptor for human cholestatic itch
Authors: Yu, Huasheng and Zhao, Tianjun and Liu, Simin and Wu, Qinxue and Johnson, Omar and Wu, Zhaofa and Zhuang, Zihao and Shi, Yaocheng and Peng, Luxin and He, Renxi and others
Journal: eLife (2019): e48431

P2Y6 signaling in alveolar macrophages prevents leukotriene-dependent type 2 allergic lung inflammation
Authors: Nagai, Jun and Balestrieri, Barbara and Fanning, Laura B and Kyin, Timothy and Cirka, Haley and Lin, Junrui and Idzko, Marco and Zech, Andreas and Kim, Edy Y and Brennan, Patrick J and others
Journal: The Journal of clinical investigation (2019)

Hyperglycaemia disrupts conducted vasodilation in the resistance vasculature of db/db mice
Authors: Lemmey, Hamish AL and Ye, Xi and Ding, Hong C and Triggle, Christopher R and Garland, Christopher J and Dora, Kim A
Journal: Vascular pharmacology (2018): 29–35

Methionine and valine activate the mammalian target of rapamycin complex 1 pathway through heterodimeric amino acid taste receptor (TAS1R1/TAS1R3) and intracellular Ca2+ in bovine mammary epithelial cells
Authors: Zhou, Y and Zhou, Z and Peng, J and Loor, Juan J
Journal: Journal of dairy science (2018): 11354–11363

TRPA1-dependent reversible opening of tight junction by natural compounds with an $alpha$, $beta$-unsaturated moiety and capsaicin
Authors: Kanda, Yusuke and Yamasaki, Youhei and Sasaki-Yamaguchi, Yoshie and Ida-Koga, Noriko and Kamisuki, Shinji and Sugawara, Fumio and Nagumo, Yoko and Usui, Takeo
Journal: Scientific reports (2018): 1–13

A new electro-optical approach for conductance measurement: an assay for the study of drugs acting on ligand-gated ion channels
Authors: Menegon, A and Pitassi, S and Mazzocchi, N and Redaelli, L and Rizzetto, R and Roll and JF and Poli, C and Imberti, M and Lanati, A and Grohovaz, F
Journal: Scientific Reports (2017)

Altered spontaneous calcium signaling of in situ chondrocytes in human osteoarthritic cartilage
Authors: Gong, Xiaoyuan and Xie, Wenbin and Wang, Bin and Gu, Lingchuan and Wang, Fuyou and Ren, Xiang and Chen, Cheng and Yang, Liu
Journal: Scientific reports (2017): 17093

Bystander effects elicited by single-cell photo-oxidative blue-light stimulation in retinal pigment epithelium cell networks
Authors: Ishii, Masaaki and Rohrer, Bärbel
Journal: Cell Death Discovery (2017): 16071

Bystander effects elicited by single-cell photo-oxidative blue-light stimulation in retinal pigment epithelium cell networks
Authors: Ishii, Masaaki and Rohrer, Bärbel
Journal: Cell Death Discovery (2017): 16071

High-throughput screen detects calcium signaling dysfunction in typical sporadic autism spectrum disorder
Authors: Schmunk, Galina and Nguyen, Rachel L and Ferguson, David L and Kumar, Kenny and Parker, Ian and Gargus, J Jay
Journal: Scientific Reports (2017): 40740

 

参考文献

Passive and parallel microfluidic formation of droplet interface bilayers (DIBs) for measurement of leakage of small molecules through artificial phospholipid membranes
Authors: Magdalena A Czekalska, Tomasz S Kaminski, Karol Makuch, Piotr Garstecki
Journal: Sensors and Actuators B: Chemical (2019)

Development of micro mechanical device having two-dimensional array of micro chambers for cell stretching
Authors: K Minami, T Hayashi, K Sato, T Nakahara
Journal: Biomedical microdevices (2018): 10

Spatiotemporal magnetic fields enhance cytosolic Ca 2+ levels and induce actin polymerization via activation of voltage-gated sodium channels in skeletal muscle cells
Authors: Mónica Rubio Ayala, Tatiana Syrovets, Susanne Hafner, Vitalii Zablotskii, Alexandr Dejneka, Thomas Simmet
Journal: Biomaterials (2018)

2-OMe-lysophosphatidylcholine analogues are GPR119 ligands and activate insulin secretion from βTC-3 pancreatic cells: Evaluation of structure-dependent biological activity
Authors: Anna Drzazga, Agata Sowińska, Agnieszka Krzemińska, Andrzej Okruszek, Piotr Paneth, Maria Koziolkiewicz, Edyta Gendaszewska-Darmach
Journal: Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular and Cell Biology of Lipids (2017)

A new electro-optical approach for conductance measurement: an assay for the study of drugs acting on ligand-gated ion channels
Authors: A Menegon, S Pitassi, N Mazzocchi, L Redaelli, R Rizzetto, JF Rolland, C Poli, M Imberti, A Lanati, F Grohovaz
Journal: Scientific Reports (2017)

Altered spontaneous calcium signaling of in situ chondrocytes in human osteoarthritic cartilage
Authors: Xiaoyuan Gong, Wenbin Xie, Bin Wang, Lingchuan Gu, Fuyou Wang, Xiang Ren, Cheng Chen, Liu Yang
Journal: Scientific reports (2017): 17093

Analysis of Ca2+ response of osteocyte network by three-dimensional time-lapse imaging in living bone
Authors: Tomoyo Tanaka, Mitsuhiro Hoshijima, Junko Sunaga, Takashi Nishida, Mana Hashimoto, Naoya Odagaki, Ryuta Osumi, Taiji Aadachi, Hiroshi Kamioka
Journal: Journal of Bone and Mineral Metabolism (2017): 1–10

Aryl-and alkyl-phosphorus-containing flame retardants induced mitochondrial impairment and cell death in Chinese hamster ovary (CHO-k1) cells
Authors: Chao Huang, Na Li, Shengwu Yuan, Xiaoya Ji, Mei Ma, Kaifeng Rao, Zijian Wang
Journal: Environmental Pollution (2017): 775–786

Bystander effects elicited by single-cell photo-oxidative blue-light stimulation in retinal pigment epithelium cell networks
Authors: Masaaki Ishii, Bärbel Rohrer
Journal: Cell Death Discovery (2017): 16071

Ca 2+ signals initiate at immobile IP 3 receptors adjacent to ER-plasma membrane junctions
Authors: Nagendra Babu Thillaiappan, Alap P Chavda, Stephen C Tovey, David L Prole, Colin W Taylor
Journal: Nature Communications (2017): 1505

 

相关产品

产品名称 货号
钙离子荧光探针Cal-520 , AM Cat#21130
钙离子荧光探针Fluo-8, AM Cat#21080
新型钙离子荧光探针Calbryte 520, AM *细胞渗透性* Cat#20650

说明书
钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM .pdf

Cell Navigator NBD神经酰胺高尔基体染色试剂盒 绿色荧光 货号22750-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Navigator NBD神经酰胺高尔基体染色试剂盒 绿色荧光

Cell Navigator NBD神经酰胺高尔基体染色试剂盒 绿色荧光

Cell Navigator NBD神经酰胺高尔基体染色试剂盒 绿色荧光     货号22750 货号 22750 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 467 Em (nm) 538
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

高尔基体是大多数真核细胞胞质内囊泡和折叠膜的复合体,参与分泌和细胞内运输。它修饰内质网(ER)中内置的蛋白质和脂质,并准备将其输出到细胞外。它还在脂质在整个细胞中的运输和溶酶体的形成中起着重要作用。该Cell Navigator™NBD神经酰胺高尔基染色试剂盒提供了一种简便,快速的方法,可以选择性地对活细胞或醛固定细胞中的高尔基染色。将C6 NBD神经酰胺与牛血清白蛋白(C6-NBD-Ceramide-BSA)形成复合物给予细胞。高尔基体通过形成相应的荧光代谢产物而被染色。

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适用仪器


荧光显微镜  
激发: 488nm
发射: 525nm
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: FITC滤波片组

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 根据需要处理细胞
  2. 加入C6 NBD神经酰胺工作溶液,在室温或37°C下孵育15〜30分钟
  3. 更换染色缓冲液,在室温或37°C下孵育15〜30分钟
  4. 使用FITC滤镜套件在显微镜下观察
  5. 可选:用4%甲醛固定细胞

 

储备溶液配制

除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。
1. C6 NBD神经酰胺储备溶液(100X):
将100 µL DMSO(组分C)加入小瓶C6 NBD神经酰胺(组分A)中并充分混合。注:将未使用的C6 NBD神经酰胺原液在-20℃保存。避免冻融循环。

 

工作溶液配制

1. C6 NBD神经酰胺工作液:
将10 µL NBD神经酰胺原液(100X)添加到990 µL染色缓冲液(组分B)中,制成NBD神经酰胺工作液。
可选:将10 µL Hoechst 33342(组分D)添加到1mL NBD神经酰胺工作溶液中以进行核染色。

 

操作步骤

  1. 接种并根据需要处理细胞。
  2. 直接在细胞培养基中加入100µL C6 NBD神经酰胺工作溶液。
  3. 在室温或37°C下孵育15〜30分钟。
  4. 除去C6 NBD神经酰胺工作溶液,并用100 µL /孔的染色缓冲液(组分B)代替。
  5. 在室温或37°C下孵育10〜15分钟。
  6. 在装有FITC滤光片的荧光显微镜下观察。
  7. 从步骤4中除去染色缓冲液,然后向每个孔中添加100 µL /孔/ 96孔板的4%甲醛固定缓冲液(未提供)。 注意:对于非贴壁细胞,请添加所需量(例如2X106细胞/ mL)的4%甲醛固定液。(可选)
  8. 在室温下将平板孵育20至30分钟。 去除固定剂。 用PBS洗涤细胞2-3次,然后用100 µL /孔的染色缓冲液(组分B)替换。(可选)

 

图例

Cell Navigator NBD神经酰胺高尔基体染色试剂盒 绿色荧光     货号22750

图1. HeLa细胞中NBD神经酰胺高尔基染色的荧光图像。 细胞在37°C下用100 µL C6 NBD神经酰胺工作溶液染色20分钟,然后用Hoechst 33342染色。 高尔基体被认为是部分包围细胞核的强烈荧光线状结构。

 

参考文献

Molecular determinants of ER-Golgi contacts identified through a new FRET-FLIM system
Authors: R. Venditti
Journal: J Cell Biol (2019): 1055-1065

A Golgi Lipid Signaling Pathway Controls Apical Golgi Distribution and Cell Polarity during Neurogenesis
Authors: Z. Xie
Journal: Dev Cell (2018): 725-740 e4

A putative calcium-ATPase of the secretory pathway family may regulate calcium/manganese levels in the Golgi apparatus of Entamoeba histolytica
Authors: M. A. Rodriguez
Journal: Parasitol Res (2018): 3381-3389

Activation of neutral sphingomyelinase 2 by starvation induces cell-protective autophagy via an increase in Golgi-localized ceramide
Authors: M. J. Back
Journal: Cell Death Dis (2018): 670

Functions of neutral ceramidase in the Golgi apparatus
Authors: W. Sakamoto
Journal: J Lipid Res (2018): 2116-2125

Regulation of glucosylceramide synthesis by Golgi-localized phosphoinositide
Authors: Y. Ishibashi
Journal: Biochem Biophys Res Commun (2018): 1011-1018

Structure of the Golgi apparatus is not influenced by a GAG deletion mutation in the dystonia-associated gene Tor1a
Authors: S. B. Mitchell
Journal: PLoS One (2018): e0206123

An inducible ER-Golgi tether facilitates ceramide transport to alleviate lipotoxicity
Authors: L. K. Liu
Journal: J Cell Biol (2017): 131-147

Ceramide Transport from the Endoplasmic Reticulum to the Trans Golgi Region at Organelle Membrane Contact Sites
Authors: K. Hanada
Journal: Adv Exp Med Biol (2017): 69-81

Endoplasmic reticulum is the sorting core facility in the Golgi-lacking protozoan Giardia lamblia
Authors: N. Zamponi
Journal: Traffic (2017): 604-621

说明书
Cell Navigator NBD神经酰胺高尔基体染色试剂盒 绿色荧光 .pdf

钙离子荧光探针腔肠素 cp(停产) 货号21151-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

钙离子荧光探针腔肠素 cp(停产)

钙离子荧光探针腔肠素 cp(停产)

钙离子荧光探针腔肠素 cp(停产)    货号21151 货号 21151 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 250 ug 价格 0
Ex (nm) 430 Em (nm) 442
分子量 415.48 溶剂 Ethanol
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:21151

产品名称:钙离子荧光探针腔肠素 cp

规格:250ug

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:415.48

溶剂:乙醇

激发波长(nm):430

发射波长(nm):442

 

产品介绍

钙离子荧光探针腔肠素 cp是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针,钙测量对于许多生物学研究至关重要。水母发光蛋白复合物包含22kD的载水母发光蛋白,分子氧和发光体腔肠素。当三个Ca2 +离子与该配合物结合时,腔肠素被氧化为腔肠酰胺,并伴有二氧化碳和蓝光的释放。水母发光蛋白的生物发光对Ca2 +浓度的大约三次方依赖性,可以在〜0.1 µM至> 100 µM的宽检测范围内测量Ca2 +浓度。与荧光Ca2 +指示剂不同,可以检测Ca2 +结合的水母发光蛋白而无需照亮样品,从而消除了自发荧光的干扰。天然腔肠素及其衍生物赋予水母发光蛋白复合物不同的Ca2 +亲和力和光谱性质。据报道,用腔肠素hcp重组的重组载脂蛋白水泡蛋白总体上具有最佳的发光,同时具有高量子产率和快速响应时间。但是,腔肠素类似物在细胞内重建水母发光蛋白可能相对较慢。含有腔肠素的cp,f或h形式的水母发光蛋白显示的发光强度是用天然腔肠素重构的脱辅基水母发光蛋白的发光强度的10-20倍。腔肠素h和cp已用于GPCR的HTS筛选测定中。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的钙离子荧光探针腔肠素 cp。 

钙离子篇:时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

 

参考文献

Bioluminescence Resonance Energy Transfer (BRET) Assay for Determination of Molecular Interactions in Living Cells
Authors: Kaleeckal G Harikumar, Yan Yan, Ting-Hai Xu, Karsten Melcher, H Eric Xu, Laurence J Miller
Journal: (2017)

Intracellular Ca2+ is important for flagellin-triggered defense in Arabidopsis and involves inositol polyphosphate signaling
Authors: Yi Ma, Yichen Zhao, Gerald A Berkowitz
Journal: Journal of Experimental Botany (2017)

Orchestration of salivary secretion mediated by two different dopamine receptors in the blacklegged tick Ixodes scapularis
Authors: Donghun Kim, Ladislav Simo, Yoonseong Park
Journal: Journal of Experimental Biology (2014): 3656–3663

说明书
钙离子荧光探针腔肠素 cp(停产).pdf

ThiolTrace Violet 500*谷胱甘肽检测试剂* 货号22280-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

ThiolTrace Violet 500*谷胱甘肽检测试剂*

ThiolTrace Violet 500*谷胱甘肽检测试剂*

ThiolTrace Violet 500*谷胱甘肽检测试剂*    货号22280 货号 22280 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 415 Em (nm) 499
分子量 557.01 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

ThiolTrace Violet 500*谷胱甘肽检测试剂*是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,GSH的亚细胞检测和定位对于了解氧化还原状态的调节,药物的作用以及排毒的机制非常重要。ThiolTrace Violet 500是一种比通常使用的mBBr,mBCl或Thiotracker Violet更亮,更坚固的细胞内硫醇探针,可用于监测细胞内GSH。由于还原型谷胱甘肽代表细胞中细胞内大多数游离巯基,因此ThiolTrace 紫罗兰500可用于估算还原型谷胱甘肽的细胞水平。它比mBCL和其他细胞内常见的硫醇检测探针(例如Thiotracker紫罗兰色)至少亮10倍,并且可以通过紫外线或405 nm的大斯托克斯位移进行激发。它可以用醛固定,并通过Triton®X-100(0.5%)渗透。它可以用于包括细胞毒性研究在内的多重分析中。ThiolTrace Violet 500提供了一种简单,灵敏且可重现的工具来检测生物样品中降低的GSH含量。ThiolTrace Violet 500与硫醇反应,在普通的405 nm紫激光下激发出520-530 nm的强荧光。与ThiolTracker紫罗兰(Thermo Fisher Scientific)相比,ThiolTrace紫罗兰500在含有生长因子的细胞培养基中的强度高10-100倍。ThiolTrace Violet 500与多种稀释剂兼容,包括含血清的细胞培养基。ThiolTrace Violet 500可用于流式细胞仪,HCS成像和落射荧光显微镜。

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 405nm激光
发射: 525/50nm滤波片
通道: Pacific Orange通道
荧光显微镜  
激发: 405nm
发射: 525nm
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: TRITC滤波片组

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用5×10 5到1×10 6细胞/ mL 的密度制备含测试化合物的细胞

2.准备ThiolTrace Violet 500工作溶液并将其添加到细胞中

3.在37 o C 孵育20至30分钟

4.在Ex / Em = 405/525 nm处读取荧光强度-Pacific Orange

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
ThiolTrace 紫罗兰色500储备液(500X):
在小瓶ThiolTrace Violet 500中加入200 µL DMSO(未提供),并充分混合。 注意:分装并在-20℃下存储未使用的ThiolTrace Violet 500储备液。 避免重复冷冻/融化循环。

 

2.工作溶液配制

ThiolTrace Violet 500工作溶液(1X):
将1 µL ThiolTraceTM紫罗兰色500储备溶液加入您选择的0.5 mL缓冲液中,并充分混合。 注意:可以在含有血清的细胞培养基中制备ThiolTrace Violet 500工作溶液。

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操作步骤

1.用测试化合物处理细胞所需的时间。注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在用ThiolTrace 紫罗兰色工作溶液孵育之前,用含血清的培养基洗涤细胞一次。注意:适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。

2.将细胞以1000 rpm的速度离心4分钟,然后用1 mL所选缓冲液(可选)洗涤细胞。

3.将细胞重悬于0.5 mL ThiolTraceTM Violet 500工作溶液中,并在37oC培养箱中孵育20至30分钟。注意:对于荧光显微镜,每孔添加200 µL ThiolTraceTM Violet 500工作溶液。

4.以1000 rpm离心细胞4分钟,然后在1 mL所选缓冲液(可选)中洗涤细胞。

5.重悬于缓冲液中,使用太平洋橙滤光片组(Ex / Em = 405/525 nm),用流式细胞仪监测荧光强度。

 

参考文献

A highly sensitive two-photon fluorescent probe for glutathione with near-infrared emission at 719nm and intracellular glutathione imaging
Authors: C. Huang
Journal: Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc (2019): 68-76

Glutathione-driven Cu(i)-O2 chemistry: a new light-up fluorescent assay for intracellular glutathione
Authors: P. F. Gao
Journal: Analyst (2018): 2486-2490

Nitrogen-doped carbon quantum dots as a fluorescent probe to detect copper ions, glutathione, and intracellular pH
Authors: S. Liao
Journal: Anal Bioanal Chem (2018): 7701-7710

Graphene Quantum Dot-MnO2 Nanosheet Based Optical Sensing Platform: A Sensitive Fluorescence “Turn Off-On” Nanosensor for Glutathione Detection and Intracellular Imaging
Authors: X. Yan
Journal: ACS Appl Mater Interfaces (2016): 21990-6

A sensitive turn-on fluorescent probe for intracellular imaging of glutathione using single-layer MnO2 nanosheet-quenched fluorescent carbon quantum dots
Authors: D. He
Journal: Chem Commun (Camb) (2015): 14764-7

A fluorescent probe for intracellular cysteine overcoming the interference by glutathione
Authors: M. Tian
Journal: Org Biomol Chem (2014): 6128-33

A mitochondria-targetable fluorescent probe for dual-channel NO imaging assisted by intracellular cysteine and glutathione
Authors: Y. Q. Sun
Journal: J Am Chem Soc (2014): 12520-3

Designing an intracellular fluorescent probe for glutathione: two modulation sites for selective signal transduction
Authors: M. Isik
Journal: Org Lett (2014): 3260-3

Turn-on fluorescence sensor for intracellular imaging of glutathione using g-C(3)N(4) nanosheet-MnO(2) sandwich nanocomposite
Authors: X. L. Zhang
Journal: Anal Chem (2014): 3426-34

Detection of intracellular glutathione using ThiolTracker violet stain and fluorescence microscopy
Authors: B. S. Mandavilli
Journal: Curr Protoc Cytom (2010): Unit 9 35

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钙离子荧光探针腔肠素 h CAS 50909-86-9 货号21159-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

钙离子荧光探针腔肠素 h CAS 50909-86-9

钙离子荧光探针腔肠素 h CAS 50909-86-9

钙离子荧光探针腔肠素 h CAS 50909-86-9    货号21159 货号 21159 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1272
Ex (nm) 437 Em (nm) 466
分子量 407.46 溶剂 Ethanol
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:21159

产品名称:钙离子荧光探针腔肠素 h

CAS:50909-86-9

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:407.46

溶剂:乙醇

激发波长(nm):437

发射波长(nm):466

 

产品介绍

钙离子荧光探针腔肠素 h是美国AAT Bioquest生产的用于标记钙离子的荧光探针。钙的测量对于许多生物学研究至关重要。水母发光蛋白复合物包含22kD的apoaequorin蛋白,分子氧和发光体coelenterazine。当三个Ca2+离子与该复合物结合时,腔肠素被氧化成腔肠酰胺,伴随着二氧化碳和蓝光的释放。水母发光蛋白的生物发光对Ca2+浓度的近似三次幂依赖性允许测量Ca2+浓度,检测范围为~0.1μM至>100μM。与荧光Ca2+指示剂不同,可以在不照射样品的情况下检测Ca2+结合的水母发光蛋白,从而消除自发荧光的干扰。天然腔肠素及其衍生物赋予水母发光蛋白复合物不同的Ca2+亲和力和光谱特性。据报道,用腔肠素hcp重构的重组脱辅基水母蛋白具有最佳的总体发光,具有高量子产率和快速响应时间。然而,来自腔肠素类似物的水母发光蛋白的细胞内重建可能相对较慢。含有cp,f或h形式的腔肠素的水母发光蛋白表现出比用天然腔肠素重构的脱辅基水母发光蛋白强10-20倍的发光。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的钙离子荧光探针腔肠素 h。 

钙离子篇:时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

 

参考文献

Molecular characterization of neuropeptide elevenin and two elevenin receptors, IsElevR1 and IsElevR2, from the blacklegged tick, Ixodes scapularis
Authors: Donghun Kim, Ladislav Simo, Yoonseong Park
Journal: Insect Biochemistry and Molecular Biology (2018)

Bioluminescence Resonance Energy Transfer (BRET) Assay for Determination of Molecular Interactions in Living Cells
Authors: Kaleeckal G Harikumar, Yan Yan, Ting-Hai Xu, Karsten Melcher, H Eric Xu, Laurence J Miller
Journal: (2017)

Intracellular Ca2+ is important for flagellin-triggered defense in Arabidopsis and involves inositol polyphosphate signaling
Authors: Yi Ma, Yichen Zhao, Gerald A Berkowitz
Journal: Journal of Experimental Botany (2017)

Orchestration of salivary secretion mediated by two different dopamine receptors in the blacklegged tick Ixodes scapularis
Authors: Donghun Kim, Ladislav Simo, Yoonseong Park
Journal: Journal of Experimental Biology (2014): 3656–3663

说明书
钙离子荧光探针腔肠素 h CAS 50909-86-9.pdf