钙离子荧光探针Cal-590 钾盐

	货号	20519	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	1 mg	价格	6564
	Ex (nm)	574	Em (nm)	588
	分子量	1123.03	溶剂	Water
	产品详细介绍

简要概述

钙离子荧光探针Cal-590 钾盐是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，钙的测量对于许多生物学研究至关重要。荧光探针显示结合钙的光谱响应，使研究人员能够通过荧光显微镜，流式细胞仪，荧光光谱和荧光酶标仪研究细胞内游离钙浓度的变化。 Rhod-2最常用于红色荧光钙指示剂中。然而，Rhod-2 AM在酯酶水解后仅在活细胞中发生中度荧光，并且具有非常小的细胞钙响应。 Cal-590 已被开发用于改善Rhod-2细胞负载和钙响应，同时保持Rhod-2的光谱波长，使其与TRITC /Cy3®过滤片组兼容。在CHO和HEK细胞中，Cal-590 AM具有比Rhod-2 AM更敏感的细胞钙响应。 Cal-590的光谱与FITC，AlexaFluor®488和GFP的光谱完全分离，使其成为用GFP细胞系或FITC / AlexaFluor®488标记抗体复合细胞内检测的理想钙探针。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针Cal-590 钾盐。 

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

使用Cal-520 AM，Cal-570 AM或Cal-630 AM酯类

1.使用Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 AM酯：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（最终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca²⁺缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca²⁺水平。

参考文献

Spatio-temporal modulation of light for stimulation and recording of neuronal activity
Authors: He Ma, Michael Lawrence Castanares, Vincent Daria
Journal: (2018): 1072306

A Critical Period for the Rapid Modification of Synaptic Properties at the VPm Relay Synapse
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Advances in Two-Photon Scanning and Scanless Microscopy Technologies for Functional Neural Circuit Imaging
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Calcium Imaging Across Large Areas of Intact Vascular Endothelium Reveals Stimulus-Specific Sensory Cells
Authors: Matthew D Lee, Calum Wilson, John G McCarron
Journal: The FASEB Journal (2017): 1005–8

Calcium transient assays for compound screening with human iPSC-derived cardiomyocytes: Evaluating new tools
Authors: Neil J Daily, Radleigh Santos, Joseph Vecchi, Pinar Kemanli, Tetsuro Wakatsuki
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Characterization of postsynaptic calcium signals in the pyramidal neurons of anterior cingulate cortex
Authors: Xu-Hui Li, Qian Song, Tao Chen, Min Zhuo
Journal: Molecular Pain (2017): 1744806917719847

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	货号	50020	存储条件	在零下15度以下保存
	规格	1 mg	价格	6564
	Ex (nm)		Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：50020

产品名称：氧氟沙星-BSA缀合物

规格：1mg

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品介绍

氧氟沙星-BSA缀合物用于开发抗氧氟沙星抗体，通常在ELISA分析中使用。 氧氟沙星-BSA缀合物在每个BSA上具有多个氧氟沙星分子，以最大化其免疫原性。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的氧氟沙星-BSA缀合物。

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钙离子荧光探针Fluo-5F, AM

	货号	20560	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	10×50 ug	价格	2604
	Ex (nm)	494	Em (nm)	516
	分子量	1100.91	溶剂	DMSO
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：20560

产品名称：钙离子荧光探针Fluo-5F, AM

规格：10×50 ug

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

产品物理化学光谱特性

分子量：1100.91

溶剂：DMSO

激发波长(nm)：494

发射波长(nm)：516

产品介绍

钙离子荧光探针Fluo-5F, AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，Fluo-5F是Fluo-4的类似物，具有较低的钙结合亲和力（Kd =〜2.3 uM），使其适合检测1 µM至1 mM的细胞内钙水平，该水平会饱和Fluo-4的响应。通过将溶解的指示剂直接添加到含有培养细胞的培养皿中，可以在细胞中加载Fluo-5F AM酯。它与氩离子激光源在488 nm处激发兼容，使Fluo-5F可用于共聚焦显微镜，流式细胞仪和微孔板筛选应用。它的激发和发射波长分别为494和516 nm。钙结合后，其荧光强度增加> 100倍。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针Fluo-5F, AM。 

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

参考文献

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Authors: Yanjiao Wu, Xiaoli Xu, Lunkun Ma, Qian Yi, Weichao Sun, Liling Tang
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氧氟沙星-KLH缀合物

	货号	50021	存储条件	在零下15度以下保存
	规格	1 mg	价格	6564
	Ex (nm)		Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：50021

产品名称：氧氟沙星-KLH缀合物

规格：1mg

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品介绍

氧氟沙星-KLH缀合物用于开发通常在ELISA分析中使用的抗氧氟沙星抗体。 氧氟沙星-BSA缀合物在每个KLH上具有多个氧氟沙星分子，以最大化其免疫原性。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的氧氟沙星-KLH缀合物。

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钙离子荧光探针Fluo-5N,AM

	货号	20566	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	10×50 ug	价格	2604
	Ex (nm)	494	Em (nm)	516
	分子量	1127.92	溶剂	DMSO
	产品详细介绍

简要概述

关键参数

仪器：荧光酶标仪

Ex:490

Em:525

Cutoff:515

推荐孔板：纯黑色

仪器：荧光显微镜

通道：FITC

推荐孔板：黑壁透明底

仪器：流式细胞仪

通道：FITC

产品介绍

钙离子荧光探针Fluo-5N,AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，Fluo-5N是Fluo-4的类似物，具有较低的钙结合亲和力（Kd = ~90 uM），使其适用于检测1μM至1 mM范围内的细胞内钙水平，这将使Fluo-4的反应饱和。。 通过将溶解的指示剂直接加入含有培养细胞的培养皿中，可以将Fluo-5N AM酯直接加载到活细胞中。 它与氩离子激光源在488 nm激发相容，使Fluo-5N可用于共聚焦显微镜，流式细胞仪和微孔板筛选应用。 它的激发和发射波长分别为494和516 nm。 钙结合后，其荧光强度增加> 100倍。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针。

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

操作步骤

1.准备HHBS缓冲液，10％Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Fluo-5N，AM *细胞渗透物*储备溶液。
2.1使用的Fluo-5N，AM *细胞渗透物*的量：1mg
2.2所需浓度：2 mM
2.3在合适的容器中，将1mg Fluo-5N，AM *细胞渗透物*与443.29μL无水DMSO混合。
 

3.使用10μMFluo-5N，AM *细胞渗透物* 4在HHBS中制备2X工作溶液，0.08％Pluronic®F-127和2 mM丙磺舒。
3.1最终井内浓度的Fluo-5N，AM *细胞渗透物*：5μM
3.2Pluronic®F-127的最终井内浓度：0.04％
3.3最终孔内浓度的丙磺舒：1mM
3.4在合适的容器中混合16μLFluo-5N，AM *细胞渗透物*，25.6μL10％Pluronic®F-127和256μL25mM丙磺舒。接下来，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为3.2 mL。
注意：对于大多数细胞系，我们建议最终浓度为Fluo-5N，AM *细胞渗透物*为4至5μM。
注意：推荐的Pluronic F-127井浓度最终为0.02％至0.04％。
注意：推荐的最终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
 

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X，并将每种组分的最终浓度调节至：5μMFluo-5N，AM *细胞渗透物*，0.04％Pluronic F-127,1mM丙磺舒。

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-120分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
 

6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液（或您选择的缓冲液）。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。 接下来，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为4 mL。
 

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液，使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先，从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS（或您选择的缓冲液）。
 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 494/516 nm运行实验

参考文献

Calreticulin regulates TGF-β1-induced epithelial mesenchymal transition through modulating Smad signaling and calcium signaling
Authors: Yanjiao Wu, Xiaoli Xu, Lunkun Ma, Qian Yi, Weichao Sun, Liling Tang
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Dexmedetomidine reduces hypoxia/reoxygenation injury by regulating mitochondrial fission in rat hippocampal neurons
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	货号	20601	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
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	Ex (nm)	493	Em (nm)	515
	分子量	~11000	溶剂	Water
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：20601

产品名称：钙离子荧光探针Cal-520-葡聚糖偶联物*MW10000*

规格：5mg

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

产品物理化学光谱特性

分子量：~11000

溶剂：水

激发波长(nm)：492

发射波长(nm)：514

产品介绍

钙离子荧光探针Cal-520-葡聚糖偶联物*MW10000*是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，钙的测量对于许多生物学研究至关重要。荧光探针显示结合钙的光谱响应，使研究人员能够通过荧光显微镜，流式细胞仪，荧光光谱和荧光酶标仪研究细胞内游离钙浓度的变化。使用贴片移液管或显微注射，可以使用这些葡聚糖缀合的钙指示剂的细胞不渗透盐形式物理地加载细胞。使用荧光显微镜测量来自这些细胞的荧光信号。与AM酯形式相比，我们的钙指示剂的葡聚糖形式显示出泄漏和区室化的显着减少。在荧光钙指示剂葡聚糖结合物中，Cal-520葡聚糖结合物可能是最佳选择，因为它们具有高荧光量子产率和钙的大荧光增强。与Oregon Green BAPTA-1葡聚糖相比，Cal-520葡聚糖显示出更低的背景和更大的钙诱导的荧光增强。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针Cal-520-葡聚糖偶联物*MW10000*。 

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参考文献

西诺沙星-HRP缀合物

	货号	50022	存储条件	在零下15度以下保存
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	分子量		溶剂
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货号：50022

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保质期：12个月

产品介绍

西诺沙星-HRP缀合物用于开发ELISA实验以定量西诺沙星。 西诺沙星-HRP缀合物在每个HRP上具有最少数量的西沙星分子，以使其测定灵敏度最大化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的西诺沙星-HRP缀合物。

参考文献

A high-throughput, precipitating colorimetric sandwich ELISA microarray for shiga toxins
Authors: Gehring A, He X, Fratamico P, Lee J, Bagi L, Brewster J, Paoli G, He Y, Xie Y, Skinner C, Barnett C, Harris D.
Journal: Toxins (Basel) (2014): 1855

Development of antigen capture ELISA for the quantification of EIAV p26 protein
Authors: Hu Z, Chang H, Ge M, Lin Y, Wang X, Guo W.
Journal: Appl Microbiol Biotechnol (2014): 9073

Development of atom transfer radical polymer-modified gold nanoparticle-based enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)
Authors: Chen F, Hou S, Li Q, Fan H, Fan R, Xu Z, Zhala G, Mai X, Chen X, Liu Y.
Journal: Anal Chem (2014): 10021

Development of monoclonal antibody-based sandwich ELISA for detection of dextran
Authors: Wang SY, Li Z, Wang XJ, Lv S, Yang Y, Zeng LQ, Luo FH, Yan JH, Liang DF.
Journal: Monoclon Antib Immunodiagn Immunother (2014): 334

Effect of different combinations of antibodies and enzyme labels on ELISA of progesterone
Authors: Kumari GL, P and ey PK, Nathsharma SS, Sharma SK, Kochhar G.
Journal: J Immunoassay Immunochem (2014): 157

Long-term dry storage of an enzyme-based reagent system for ELISA in point-of-care devices
Authors: Ramach and ran S, Fu E, Lutz B, Yager P.
Journal: Analyst (2014): 1456

Ultrasensitive ELISA using enzyme-loaded nanospherical brushes as labels
Authors: Qu Z, Xu H, Xu P, Chen K, Mu R, Fu J, Gu H.
Journal: Anal Chem (2014): 9367

3-(10′-Phenothiazinyl)propionic acid is a potent primary enhancer of peroxidase-induced chemiluminescence and its application in sensitive ELISA of methylglyoxal-modified low density lipoprotein
Authors: Sakharov IY, Demiyanova AS, Gribas AV, Uskova NA, Efremov EE, Vdovenko MM.
Journal: Talanta (2013): 414

Development of an ELISA for the quantification of the C-terminal decapeptide prothymosin alpha(100-109) in sera of mice infected with bacteria
Authors: Samara P, Kalbacher H, Ioannou K, Radu DL, Livaniou E, Promponas VJ, Voelter W, Tsitsilonis O.
Journal: J Immunol Methods (2013): 54

ELISA for determination of total coagulation factor XII concentration in human plasma
Authors: Madsen DE, Sidelmann JJ, Overgaard K, Koch C, Gram JB.
Journal: J Immunol Methods (2013): 32

磺胺二甲嘧啶-HRP缀合物

	货号	50025	存储条件	在零下15度以下保存
	规格	1 mg	价格	6564
	Ex (nm)		Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：50025

产品名称：磺胺二甲嘧啶-HRP缀合物

规格：1mg

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品介绍

磺胺嘧啶-HRP缀合物用于开发ELISA分析，以ELISA分析定量磺胺嘧啶。 磺胺嘧啶-HRP缀合物也可用于定量磺胺嘧啶，磺胺嘧啶，磺胺甲氧基二嗪，磺胺氯吡嗪，磺胺喹喔啉，磺胺二甲氧嘧啶，磺胺多辛，磺胺氯哒嗪和磺胺吡啶。 磺胺嘧啶-HRP共轭物在每个HRP上具有最少数目的磺胺嘧啶分子，以使其测定灵敏度最大化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的磺胺二甲嘧啶-HRP缀合物。

参考文献

A high-throughput, precipitating colorimetric sandwich ELISA microarray for shiga toxins
Authors: Gehring A, He X, Fratamico P, Lee J, Bagi L, Brewster J, Paoli G, He Y, Xie Y, Skinner C, Barnett C, Harris D.
Journal: Toxins (Basel) (2014): 1855

Development of antigen capture ELISA for the quantification of EIAV p26 protein
Authors: Hu Z, Chang H, Ge M, Lin Y, Wang X, Guo W.
Journal: Appl Microbiol Biotechnol (2014): 9073

Development of atom transfer radical polymer-modified gold nanoparticle-based enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)
Authors: Chen F, Hou S, Li Q, Fan H, Fan R, Xu Z, Zhala G, Mai X, Chen X, Liu Y.
Journal: Anal Chem (2014): 10021

Development of monoclonal antibody-based sandwich ELISA for detection of dextran
Authors: Wang SY, Li Z, Wang XJ, Lv S, Yang Y, Zeng LQ, Luo FH, Yan JH, Liang DF.
Journal: Monoclon Antib Immunodiagn Immunother (2014): 334

Effect of different combinations of antibodies and enzyme labels on ELISA of progesterone
Authors: Kumari GL, P and ey PK, Nathsharma SS, Sharma SK, Kochhar G.
Journal: J Immunoassay Immunochem (2014): 157

Long-term dry storage of an enzyme-based reagent system for ELISA in point-of-care devices
Authors: Ramach and ran S, Fu E, Lutz B, Yager P.
Journal: Analyst (2014): 1456

Ultrasensitive ELISA using enzyme-loaded nanospherical brushes as labels
Authors: Qu Z, Xu H, Xu P, Chen K, Mu R, Fu J, Gu H.
Journal: Anal Chem (2014): 9367

3-(10′-Phenothiazinyl)propionic acid is a potent primary enhancer of peroxidase-induced chemiluminescence and its application in sensitive ELISA of methylglyoxal-modified low density lipoprotein
Authors: Sakharov IY, Demiyanova AS, Gribas AV, Uskova NA, Efremov EE, Vdovenko MM.
Journal: Talanta (2013): 414

Development of an ELISA for the quantification of the C-terminal decapeptide prothymosin alpha(100-109) in sera of mice infected with bacteria
Authors: Samara P, Kalbacher H, Ioannou K, Radu DL, Livaniou E, Promponas VJ, Voelter W, Tsitsilonis O.
Journal: J Immunol Methods (2013): 54

ELISA for determination of total coagulation factor XII concentration in human plasma
Authors: Madsen DE, Sidelmann JJ, Overgaard K, Koch C, Gram JB.
Journal: J Immunol Methods (2013): 32

钙离子荧光探针Cal-520-生物素偶联物

	货号	20605	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	5×50 ug	价格	3924
	Ex (nm)	493	Em (nm)	515
	分子量	1212.40	溶剂	Water
	产品详细介绍

简要概述

生物素和生物胞素以高亲和力结合抗生物素蛋白和链霉抗生物素蛋白。 生物素和生物胞素可以与许多生物分子缀合而不会显着改变靶分子的生物活性，因为生物胞素是相对小的分子。 Cal-520-生物素和Cal-520生物胞素缀合物具有很好的钙响应。 他们的抗生物素蛋白和链霉抗生物素蛋白复合物具有敏感的钙响应。 可以想象，Cal-520-生物素和Cal-520生物胞素缀合物可以与IgG-抗生物素蛋白或IgG-链霉抗生物素蛋白缀合物结合，用于监测特定靶标的空间钙变化。

点击查看光谱

钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

使用Cal-520 AM，Cal-570 AM或Cal-630 AM酯类

1.使用Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 AM酯：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（最终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca²⁺缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca²⁺水平。

参考文献

Spatio-temporal modulation of light for stimulation and recording of neuronal activity
Authors: He Ma, Michael Lawrence Castanares, Vincent Daria
Journal: (2018): 1072306

A Critical Period for the Rapid Modification of Synaptic Properties at the VPm Relay Synapse
Authors: Libiao Pan, Junhua Yang, Qian Yang, Xiaomeng Wang, Liya Zhu, Yali Liu, Huifang Lou, Chou Xu, Ying Shen, Hao Wang
Journal: Frontiers in molecular neuroscience (2017)

Advances in Two-Photon Scanning and Scanless Microscopy Technologies for Functional Neural Circuit Imaging
Authors: Simon R Schultz, Caroline S Copeland, Amanda J Foust, Peter Quicke, Renaud Schuck
Journal: Proceedings of the IEEE (2017): 139–157

Bidirectional communication between sensory neurons and osteoblasts in an in vitro co-culture system
Authors: Daisuke Kodama, Takao Hirai, Hisataka Kondo, Kazunori Hamamura, Akifumi Togari
Journal: FEBS Letters (2017)

Ca 2+ signals initiate at immobile IP 3 receptors adjacent to ER-plasma membrane junctions
Authors: Nagendra Babu Thillaiappan, Alap P Chavda, Stephen C Tovey, David L Prole, Colin W Taylor
Journal: Nature Communications (2017): 1505

Calcium Imaging Across Large Areas of Intact Vascular Endothelium Reveals Stimulus-Specific Sensory Cells
Authors: Matthew D Lee, Calum Wilson, John G McCarron
Journal: The FASEB Journal (2017): 1005–8

Calcium transient assays for compound screening with human iPSC-derived cardiomyocytes: Evaluating new tools
Authors: Neil J Daily, Radleigh Santos, Joseph Vecchi, Pinar Kemanli, Tetsuro Wakatsuki
Journal: Journal of evolving stem cell research (2017): 1

Characterization of postsynaptic calcium signals in the pyramidal neurons of anterior cingulate cortex
Authors: Xu-Hui Li, Qian Song, Tao Chen, Min Zhuo
Journal: Molecular Pain (2017): 1744806917719847

Direct measurement of TRPV4 and PIEZO1 activity reveals multiple mechanotransduction pathways in chondrocytes
Authors: M Rocio Servin-Vences, Mirko Moroni, Gary R Lewin, Kate Poole
Journal: eLife (2017): e21074

Expression of the GluA2 subunit of glutamate receptors is required for the normal dendritic differentiation of cerebellar Purkinje cells
Authors: Masahiko Tanaka, Tomomi Senda, Naohide Hirashima
Journal: Neuroscience Letters (2017)

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钙离子荧光探针Cal-520-生物胞素偶联物

	货号	20606	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	5×50 ug	价格	3924
	Ex (nm)	493	Em (nm)	515
	分子量	1341.55	溶剂	Water
	产品详细介绍

简要概述

生物素和生物胞素与抗生物素蛋白和链霉亲和素都具有高亲和力结合。由于生物素和生物胞素是相对较小的分子，因此生物素和生物胞素可以与许多生物分子缀合而不会显着改变靶分子的生物活性。Cal-520-生物素和Cal-520生物素结合物具有很好的钙反应。他们的抗生物素蛋白和链霉亲和素复合物具有敏感的钙反应。可以想象的是，可以将Cal-520-生物素和Cal-520生物素结合物与IgG-抗生物素蛋白或IgG-链霉亲和素结合物结合，以针对特定靶标在空间上监测钙的变化。

点击查看光谱

钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

使用Cal-520 AM，Cal-570 AM或Cal-630 AM酯类

1.使用Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 AM酯：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（最终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca²⁺缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca²⁺水平。

参考文献

Spatio-temporal modulation of light for stimulation and recording of neuronal activity
Authors: He Ma, Michael Lawrence Castanares, Vincent Daria
Journal: (2018): 1072306

A Critical Period for the Rapid Modification of Synaptic Properties at the VPm Relay Synapse
Authors: Libiao Pan, Junhua Yang, Qian Yang, Xiaomeng Wang, Liya Zhu, Yali Liu, Huifang Lou, Chou Xu, Ying Shen, Hao Wang
Journal: Frontiers in molecular neuroscience (2017)

Advances in Two-Photon Scanning and Scanless Microscopy Technologies for Functional Neural Circuit Imaging
Authors: Simon R Schultz, Caroline S Copeland, Amanda J Foust, Peter Quicke, Renaud Schuck
Journal: Proceedings of the IEEE (2017): 139–157

Bidirectional communication between sensory neurons and osteoblasts in an in vitro co-culture system
Authors: Daisuke Kodama, Takao Hirai, Hisataka Kondo, Kazunori Hamamura, Akifumi Togari
Journal: FEBS Letters (2017)

Ca 2+ signals initiate at immobile IP 3 receptors adjacent to ER-plasma membrane junctions
Authors: Nagendra Babu Thillaiappan, Alap P Chavda, Stephen C Tovey, David L Prole, Colin W Taylor
Journal: Nature Communications (2017): 1505

Calcium Imaging Across Large Areas of Intact Vascular Endothelium Reveals Stimulus-Specific Sensory Cells
Authors: Matthew D Lee, Calum Wilson, John G McCarron
Journal: The FASEB Journal (2017): 1005–8

Calcium transient assays for compound screening with human iPSC-derived cardiomyocytes: Evaluating new tools
Authors: Neil J Daily, Radleigh Santos, Joseph Vecchi, Pinar Kemanli, Tetsuro Wakatsuki
Journal: Journal of evolving stem cell research (2017): 1

Characterization of postsynaptic calcium signals in the pyramidal neurons of anterior cingulate cortex
Authors: Xu-Hui Li, Qian Song, Tao Chen, Min Zhuo
Journal: Molecular Pain (2017): 1744806917719847

Direct measurement of TRPV4 and PIEZO1 activity reveals multiple mechanotransduction pathways in chondrocytes
Authors: M Rocio Servin-Vences, Mirko Moroni, Gary R Lewin, Kate Poole
Journal: eLife (2017): e21074

Expression of the GluA2 subunit of glutamate receptors is required for the normal dendritic differentiation of cerebellar Purkinje cells
Authors: Masahiko Tanaka, Tomomi Senda, Naohide Hirashima
Journal: Neuroscience Letters (2017)

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