RatioWorks PDMPO,右旋糖酐 货号21211-AAT Bioquest荧光染料

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RatioWorks PDMPO,右旋糖酐

RatioWorks PDMPO,右旋糖酐

RatioWorks PDMPO,右旋糖酐    货号21211 货号 21211 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 333 Em (nm) 531
分子量 ~10000 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

RatioWorks PDMPO,右旋糖酐是美国AAT Bioquest生产的用于溶酶体pH检测的荧光探针,现有的pH探针不适合研究酸性细胞器,如溶酶体,内体,吞噬体,精子和顶体,因为它们的荧光在较低的pH下会显着降低。虽然比率成像在过去几十年中受到了密切关注,但比率成像的增长潜力受到缺乏适合酸性细胞器的荧光探针的限制。RatioWorks PDMPO的特点是酸性双激发和双发射pH探头。它在较低的pH下发出强烈的黄色荧光,并在较高的pH下产生强烈的蓝色荧光。这种独特的pH依赖性荧光使RatioWorks PDMPO成为酸性细胞器的理想pH探针,pKa = 4.47。另外,RatioWorks PDMPO具有极大的斯托克斯位移和出色的光稳定性,使其成为荧光成像和流式细胞仪应用的优异荧光酸性试剂。RatioWorks PDMPO独特的荧光特性可能为研究人员提供了一种新工具,可用于研究细胞内吞作用,吞噬作用和活细胞的酸性细胞器。用于流式细胞仪应用的紫外激光在405 nm处可以很好地激发RatioWorks PDMPO。这种RatioWorks PDMPO SE可以很容易地用于制造用于成像或流动应用的各种生物共轭物,从而能够通过降低信号变异性和提高准确度来特异性检测吞噬作用和胞吞作用。这些缀合物还可用于与绿色染料如GFP,Fluo-8,钙黄绿素或FITC标记的抗体多重化细胞功能分析。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的RatioWorks PDMPO,右旋糖酐。 

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适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 360nm
发射: 450,540nm
cutoff: 420,475nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式

产品说明书

操作步骤

1.根据需要准备细胞。例如,将贴壁细胞在生长培养基中以40,000至80,000细胞/孔/100μL过夜  

对于384孔板,96孔或10,000至20,000个细胞/孔/25μL。

注意:应对每个细胞系进行单独评估,以确定最佳细胞密度。

 

2.准备RatioWorks PDMPO葡聚糖

2.1在1 mL 无菌水或Hanks和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)中制备1mg / mL RatioWorks PDMPO葡聚糖原液。应立即使用原液。任何未使用的溶液需要等分并在< -20 o C重新冷冻。

注意:避免反复冻融循环,避免光照。

2.2在HHBS中制备20-100ug / mL RatioWorks PDMPO葡聚糖加载溶液。

 

3.运行内吞作用测定

3.1取出培养基,将100μL/孔(96孔板)或25μL /孔(384孔板) RatioWorks PDMPO葡聚糖加样溶液加入细胞板(步骤2.2)。

注1:如果您的化合物干扰血清,重要的是用HHBS缓冲液替换生长培养基(96孔板100μL/孔或染料加载前384孔板25μL/ 孔)。

注2:可以发生RatioWorks PDMPO葡聚糖从早期内体到晚期内体的快速运输以及随后与溶酶体的融合。为了帮助在内体中显示RatioWorks PDMPO葡聚糖,我们建议增加标记浓度并减少加载时间,并立即成像。

3.2将染料加载板在细胞培养箱中孵育5至20分钟。

3.3用HHBS或生长培养基清洗并更换染料加载溶液

3.4通过监测Ex = 360nm处的荧光和Em = 450和540nm 的比率测量来进行胞吞作用测定。

 

参考文献

iTRAQ-based proteomic analysis of the metabolism mechanism associated with silicon response in the marine diatom Thalassiosira pseudonana
Authors: Chao Du, Jun-Rong Liang, Dan-Dan Chen, Bin Xu, Wen-Hao Zhuo, Ya-Hui Gao, Chang-Ping Chen, Chris Bowler, Wen Zhang
Journal: Journal of proteome research (2014): 720–734

说明书
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Biotin-PEG-NHS 40k 生物素聚乙二醇琥珀酰酯 分子量MW 40000

上海金畔生物科技有限公司提供Biotin-PEG-NHS 40k 生物素聚乙二醇琥珀酰酯 分子量MW 40000

品牌:
货号:JPB-04887
中文名:生物素聚乙二醇琥珀酰酯 分子量MW 40000
英文名:Biotin-PEG-NHS 40k
端基取代率:》95%
纯度:》95%
分子量:40k/40000
分散度:《1.05
包装:1克/5克/10克

更多产品,更多优惠,请联系我们!
订货热线:15221999938
qq号:2743691513
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Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 货号22817-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光     货号22817 货号 22817 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 532 Em (nm) 619
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡的试剂盒,Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 *蓝色荧光* 是通过测量Caspase 9的活性而用于细胞凋亡检测的。Caspase 9是CED-3亚家族中的一员。活化的Caspase 9能切割下游caspases,例如caspase-3,-6和-7,起始Caspase级联反应。在正常发育的中枢神经系统中,活化的Caspase 9是凋亡所必需的。Caspase 9具有底物的选择性,其识别底物基序为Leu-Glu-His-Asp (LEHD)。本试剂盒利用Ac-LEHD-ProRed 作为荧光指示器来检测caspas-9的活性。通过caspas-9的切割ProRed 产生强蓝色荧光,EX/Em = 350/450 nm。这种特性使得试剂盒能适合于DAPI滤光器。本试剂盒提供所有必需组分。该实验稳定、快速且适应高通量筛选的需求。它不仅能够定量凋亡细胞中caspas-9的活性还能筛选caspas-9的抑制剂。很多实验室利用本试剂盒进行高通量抑制剂的筛选。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒。 

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适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 620nm
cutoff: 610nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 顶或底读模式

产品说明书

样本实验方案

简要概述

1.用测试化合物(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)制备细胞
2.加入等体积的Caspase 8工作溶液(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)
3.在室温下孵育1小时
4.在Ex / Em = 535/620 nm(截止= 610 nm)监测荧光强度(顶部或底部读取模式)

 

工作溶液配制

将5μL的200X Ac-LEHD-ProRed 储备溶液(组分A)加入1mL的分析缓冲液(组分B)中并充分混合以制备Caspase 9工作溶液。 避光。 注意:Caspase 9工作液不稳定,请及时使用。 1 mL Caspase 9工作溶液足以进行10次分析。有关细胞样品制备的指南,请点击查看。

 

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物(96孔板)或5μL/孔的5X测试化合物(384-板)加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在37℃,5%CO2,培养箱中孵育所需的一段时间(对于用星形孢菌素处理的Jurkat细胞3-4小时)以诱导细胞凋亡。

3.添加100μL/孔/ 96孔或25μL/孔/ 384孔板的Caspase 9工作溶液。

4.将板在室温下孵育至少1小时,避光。注意:如果需要,在室温下加入Caspase 9工作溶液10分钟前,向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-LEHD-CHO caspase 9抑制剂,以确认抑制caspase 9样活性。

5.在Ex / Em = 540 / 620nm(cutoff= 610nm)下用荧光酶标仪(顶部或底部读取模式)监测荧光强度。注意:有时,底部读数会提供更好的信号背景比。如果使用底部读取模式,则以800rpm离心细胞板(特别是对于非贴壁细胞)2分钟 。

 

数据分析

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光     货号22817

图1.使用Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒检测Jurkat细胞中的Caspase 9活性 红色荧光 。 将Jurkat细胞在同一天以300,000个细胞/90μL/孔接种在Costar黑色壁/透明底96孔板中。 用或不用1μM星形孢菌素处理细胞4小时。 加入半胱天冬酶9工作溶液(100μL/孔)并在室温下温育1小时。 使用FlexStation荧光酶标仪(Molecular Devices)在Ex / Em = 540 / 620nm(截止值= 610nm)下测量荧光强度。

 

参考文献

Angiopoietins Modulate Survival, Migration, and the Components of the Ang-Tie2 Pathway of Chronic Lymphocytic Leukaemia (CLL) Cells In Vitro
Authors: Luis Mario Aguirre Palma, Hanna Flamme, Iris Gerke, Karl-Anton Kreuzer
Journal: Cancer Microenvironment (2016): 13–26

Hypoxia regulates TRAIL sensitivity of colorectal cancer cells through mitochondrial autophagy.
Authors: Gertrud Knoll, Sebastian Bittner, Maria Kurz, Jonathan Jantsch, Martin Ehrenschwender
Journal: Oncotarget (2016)

microRNA-186 inhibits cell proliferation and induces apoptosis in human esophageal squamous cell carcinoma by targeting SKP2
Authors: Wei He, Jianfang Feng, Yan Zhang, Yuanyuan Wang, Wenqiao Zang, Guoqiang Zhao
Journal: Laboratory Investigation (2016): 317–324

Promotion of osteointegration under diabetic conditions by tantalum coating-based surface modification on 3-dimensional printed porous titanium implants
Authors: Lin Wang, Xiaofan Hu, Xiangyu Ma, Zhensheng Ma, Yang Zhang, Yizhao Lu, Xiang Li, Wei Lei, Yafei Feng
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2016): 440–452

Role of delta-like ligand-4 in chemoresistance against docetaxel in MCF-7 cells
Authors: Q Wang, Y Shi, HJ Butler, J Xue, G Wang, P Duan, H Zheng
Journal: Human & Experimental Toxicology (2016): 0960327116650006

Glucose promotes cell proliferation, glucose uptake and invasion in endometrial cancer cells via AMPK/mTOR/S6 and MAPK signaling
Authors: Jianjun Han, Lu Zhang, Hui Guo, Weiya Z Wysham, Dario R Roque, Adam K Willson, Xiugui Sheng, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Gynecologic oncology (2015): 668–675

IL-7 abrogates the immunosuppressive function of human double-negative T cells by activating Akt/mTOR signaling
Authors: Andrea Allgäuer, Elisabeth Schreiner, Fulvia Ferrazzi, Arif B Ekici, Armin Gerbitz, Andreas Mackensen, Simon Völkl
Journal: The Journal of Immunology (2015): 3139–3148

Insulin improves osteogenesis of titanium implants under diabetic conditions by inhibiting reactive oxygen species overproduction via the PI3K-Akt pathway
Authors: Lin Wang, Xiong Zhao, Bo-yuan Wei, Yi Liu, Xiang-yu Ma, Jian Wang, Peng-chong Cao, Yang Zhang, Ya-bo Yan, Wei Lei
Journal: Biochimie (2015): 85–93

LGL1 modulates proliferation, apoptosis, and migration of human fetal lung fibroblasts
Authors: Hui Zhang, Neil B Sweezey, Feige Kaplan
Journal: American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology (2015): L391–L402

t-BHQ Provides Protection against Lead Neurotoxicity via Nrf2/HO-1 Pathway
Authors: Fang Ye, Xiaoyi Li, Lili Li, Jing Yuan, Jun Chen
Journal: Oxidative medicine and cellular longevity (2015)

 

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产品名称 货号
Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 Cat#22799
Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 Cat#22813
Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 Cat#22812

说明书
Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 .pdf

线粒体膜电位荧光探针罗丹明B,乙酯,高氯酸盐 货号22211-AAT Bioquest荧光染料

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线粒体膜电位荧光探针罗丹明B,乙酯,高氯酸盐

线粒体膜电位荧光探针罗丹明B,乙酯,高氯酸盐

线粒体膜电位荧光探针罗丹明B,乙酯,高氯酸盐    货号22211 货号 22211 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10 mg 价格 1008
Ex (nm) 546 Em (nm) 568
分子量 627.17 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:22211

产品名称:罗丹明B,乙酯,高氯酸盐

规格:10mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:627.17

溶剂:DMSO

激发波长(nm):556

发射波长(nm):578

 

产品介绍

罗丹明B,乙酯,高氯酸盐是美国AAT Bioquest生产的罗丹明染料,带正电荷的罗丹明染料(如罗丹明酯和罗丹明)选择性地定位于线粒体中,因此它们广泛用于标记活细胞的线粒体。这种特殊的罗丹明酯以荧光染色线粒体橙色。其光谱特性与TRITC相似,使得罗丹明B己酯的使用非常方便。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的罗丹明B,乙酯,高氯酸盐。 

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参考文献

Mechanism of transdermal permeation promotion of lipophilic drugs by ethosomes
Authors: Li Yang, Lifang Wu, Dongze Wu, Deshun Shi, Tai Wang, Xiaoliang Zhu
Journal: International journal of nanomedicine (2017): 3357

 

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产品名称 货号
罗丹明123 CAS 62669-70-9 Cat#22210
罗丹明B CAS 81-88-9 Cat#69
罗丹明6G CAS 989-38-8 Cat#70

说明书
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Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 深红色荧光 适合流式细胞检测 货号22827-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 深红色荧光 适合流式细胞检测

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 深红色荧光 适合流式细胞检测

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 深红色荧光 适合流式细胞检测     货号22827 货号 22827 存储条件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 656 Em (nm) 670
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具,有多种参数可用于监测细胞活力。 该特定试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝氨酸(PS)的转运来检测细胞凋亡。 在细胞凋亡中,PS转移到质膜的外部小叶。 磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现是细胞凋亡初始/中间阶段的普遍指标,可以在观察形态变化之前进行检测。 该试剂盒使用与PS特异性结合的荧光膜联蛋白V。 已经证明膜联蛋白V缀合物选择性结合PS。 使用带有Cy5滤波片的流式细胞仪优化了该特定的检测试剂盒,以检测细胞凋亡。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒。

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 640nm激光
发射: 660/20nm滤波片
通道: APC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用测试化合物制备细胞(200 µL /样品)
  2. 添加膜联蛋白V-iFluor 647测定溶液
  3. 在室温下孵育30-60分钟
  4. 使用带有660/20 nm滤光片(APC通道)的流式细胞仪或带有Cy5滤光片组的荧光显微镜分析细胞

 

实验步骤

1.用膜联蛋白V-iFluor 647制备和孵育细胞:

1.1用测试化合物处理细胞一段时间(对于用星形孢菌素处理过的Jurkat细胞,需要4-6小时)以诱导细胞凋亡。

1.2离心细胞以获得1-5×105细胞/管。

1.3将细胞重悬于200 µL分析缓冲液(组分B)中。

1.4向细胞中加入2 µL Annexin V-iFluor 647(组分A)。

1.5避光保存,于室温下孵育30至60分钟。

1.6在使用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前,添加300 µL分析缓冲液(组分B)以增加体积。

1.7使用带有660/20 nm滤光片的流式细胞仪(APC通道)或带有Cy5滤光片组的荧光显微镜检测荧光强度。

2.通过使用流式细胞仪进行分析:

2.1使用带有660/20 nm滤光片(APC通道)的流式细胞仪定量膜联蛋白V-iFluor 647的结合物。

3.通过使用荧光显微镜进行分析:

3.1孵育后用移液管吸移细胞,用测定缓冲液冲洗1-2次,然后用测定缓冲液重悬细胞。

3.2将细胞添加到载玻片盖玻片的载玻片上。 注意:对于贴壁细胞,建议直接在盖玻片上生长细胞。 与Annexin V-iFluor 647一起孵育后,用测定缓冲液冲洗1-2次,然后将测定缓冲液加回到盖玻片上。 将玻片上的盖玻片倒置并可视化细胞。 与膜联蛋白V-iFluor 647孵育后,还可以将细胞固定在2%甲醛中,并在显微镜下观察。

3.3使用Cy5滤光片组,在荧光显微镜下用Annexin V-iFluor 647分析凋亡细胞。当碘化丙锭添加到细胞中时,通过使用TRITC通道测量细胞活力。质膜上的橙色染色表明膜联蛋白V-iFluor 647与细胞表面的PS结合。

 

参考文献

In situ polymerizable hydrogel incorporated with specific pathogen-free porcine platelet-rich plasma for the reconstruction of the corneal endothelium
Authors: Lin, Yung-Kai and Sharma, Ruchi and Ma, Hsu and Chen, Wen-Shyan and Yao, Chao-Ling
Journal: Journal of the Taiwan Institute of Chemical Engineers (2017)

Novel regulations of MEF2-A, MEF2-D, and CACNA1S in the functional incompetence of adipose-derived mesenchymal stem cells by induced indoxyl sulfate in chronic kidney disease
Authors: Do, Duyen Thi and Phan, Nam Nhut and Wang, Chih-Yang and Sun, Zhengda and Lin, Yen-Chang
Journal: Cytotechnology (2016): 2589–2604

Shear stress-induced alteration of epithelial organization in human renal tubular cells
Authors: Maggiorani, Damien and Dissard, Romain and Belloy, Marcy and Saulnier-Blache, Jean-Sébastien and Casemayou, Audrey and Ducasse, Laure and Grès, S and ra and Bellière, Julie and Caubet, Cécile and Basc and s, Jean-Loup and others
Journal: PloS one (2015): e0131416

Targeting a G-protein-coupled receptor overexpressed in endocrine tumors by magnetic nanoparticles to induce cell death
Authors: Sanchez, Claire and El Hajj Diab, Darine and Connord, Vincent and Clerc, Pascal and Meunier, Etienne and Pipy, Bernard and Payré, Bruno and Tan, Reasmey P and Gougeon, Michel and Carrey, Julian and others
Journal: Acs Nano (2014): 1350–1363

Glycogen synthase kinase-3 and Omi/HtrA2 induce annexin A2 cleavage followed by cell cycle inhibition and apoptosis
Authors: Wang CY, Lin YS, Su WC, Chen CL, Lin CF.
Journal: Mol Biol Cell (2009): 4153

Gold fluorescent annexin A5 as a novel apoptosis detection tool
Authors: Kurschus FC, Pal PP, Baumler P, Jenne DE, Wiltschi B, Budisa N.
Journal: Cytometry A (2009): 626

Detection of apoptosis induced by new type gosling viral enteritis virus in vitro through fluorescein annexin V-FITC/PI double labeling
Authors: Chen S, Cheng AC, Wang MS, Peng X.
Journal: World J Gastroenterol (2008): 2174

Evaluation of annexin V and Calcein-AM as markers of mononuclear cell apoptosis during human immunodeficiency virus infection
Authors: Palma PF, Baggio GL, Spada C, Silva RD, Ferreira SI, Treitinger A.
Journal: Braz J Infect Dis (2008): 108

Measurement of annexin V uptake and lactadherin labeling for the quantification of apoptosis in adherent Tca8113 and ACC-2 cells
Authors: Hu T, Shi J, Jiao X, Zhou J, Yin X.
Journal: Braz J Med Biol Res (2008): 750

Rhodamine B isothiocyanate doped silica-coated fluorescent nanoparticles (RBITC-DSFNPs)-based bioprobes conjugated to Annexin V for apoptosis detection and imaging
Authors: Shi H, He X, Wang K, Yuan Y, Deng K, Chen J, Tan W.
Journal: Nanomedicine (2007): 266

说明书
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acryloyl-PEG-NCO 2k 丙烯酰聚乙二醇异氰酸 分子量MW 2000

上海金畔生物科技有限公司提供acryloyl-PEG-NCO 2k 丙烯酰聚乙二醇异氰酸 分子量MW 2000

品牌:
货号:JPB-08393
中文名:丙烯酰聚乙二醇异氰酸 分子量MW 2000
英文名:acryloyl-PEG-NCO 2k
端基取代率:》95%
纯度:》95%
分子量:2k/2000
分散度:《1.05
包装:1克/5克/10克

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订货热线:15221999938
qq号:2743691513
金畔博客:www.jinpanbio.cn
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Portelite 荧光蛋白定量试剂盒 优化用于 CytoCite 和Qubit 荧光分析仪 货号11111-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Portelite 荧光蛋白定量试剂盒 优化用于 CytoCite 和Qubit 荧光分析仪

Portelite 荧光蛋白定量试剂盒 优化用于 CytoCite 和Qubit 荧光分析仪

Portelite 荧光蛋白定量试剂盒 优化用于 CytoCite 和Qubit 荧光分析仪    货号11111 货号 11111 存储条件 在2-8度冷藏保存
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 485 Em (nm) 590
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Portelite 荧光蛋白定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于定量蛋白的试剂盒,蛋白质定量是蛋白质纯化,电泳,细胞生物学,分子生物学和其他研究应用中的重要组成部分。 Biuret,Lowry,BCA和Bradford检测常规用于估计蛋白质浓度。然而,这些比色测定不太敏感,并且需要大的样品体积以确保准确性。我们的Portelite 荧光蛋白定量试剂盒比现有的比色蛋白测定法(例如Bradford和Bicinchoninic acid(BCA)测定法)更敏感。试剂盒中使用的Prolite 橙在水溶液中是非荧光的,但与蛋白质反应迅速并产生明亮的荧光。 Portelite 荧光蛋白定量试剂盒提供了一种简单的方法来定量溶液中的蛋白质浓度。该测定的动态范围为12.5ug / mL至5mg / mL的BSA。该试剂盒针对Cytocite 和Qubit 荧光分析仪进行了优化。它可用于(1)研究蛋白质/蛋白质相互作用; (2)亲和层析后测定柱级分; (3)估计细胞提取物中膜蛋白的回收率; (4)融合蛋白的高通量筛选。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Portelite 荧光蛋白定量试剂盒。 

 

适用仪器


Qubit 荧光计  
激发: 480nm
发射: 510-580nm
器材: 0.2 mL薄壁PCR管
CytoCite 荧光计  
激发: 480nm
发射: 510-580nm
器材: 0.2 mL薄壁PCR管

产品说明书

操作步骤

简要概述

准备并添加BSA标准品或测试样品(10μL)
在0.2 mL PCR管(Cat#CCT100)中制备并添加Prolite 橙色工作溶液(190μL)
在室温下孵育15分钟
使用CytoCite 或Qubit荧光分析仪监测荧光

 

溶液制备

Prolite 橙色工作溶液:
将5μLProlite Orange(200X)(组分A)加入995μL样品稀释缓冲液(组分E)中并充分混合。 注意:请勿将工作溶液混入玻璃容器中。

 

样品实验方案

该方案适用于Qubit®荧光分析仪。

1.运行蛋白质测定

1.1每孔加入190μL/孔的Prolite Orange工作溶液。

1.2将10μLBSA标准品(组分B,C,D)或10μL样品加入190μLProlite Orange工作溶液管中,使最终测定体积为200μL/管。

1.3在室温下孵育反应15分钟。 注意:保护样品避光,避免将样品拿在手中。

1.4将样品插入CytoCite 并用绿色荧光通道监测荧光。 按照适用于CytoCite 荧光计的步骤进行操作。具体操作点击查看。

 

2.Qubit®荧光计的简要方案

2.1按Qubit®主屏幕主屏幕上的蛋白质,然后按读取标准。

2.2将3个含有标准的试管中的每一个插入样品室。

2.3关闭盖子并按Read标准。

2.4仪器显示结果并生成校准曲线。

2.5按Run sample并选择样品量至10μL。

2.6将样品管插入样品室。

2.7盖上盖子,然后按Read tube。

2.8仪器在实验屏幕上显示结果。 最高值是原始样品浓度,最低值是稀释浓度。

 

3.标准溶液制备

        对于CytoCite 荧光计测定,您可以选择使用自己的蛋白质标准进行校准。这是一个生成定制蛋白质标准曲线的简要方案。

3.1在PBS缓冲液中制备400μg/ ml(400 ng /μL)的蛋白质溶液。

3.2用PBS缓冲液进行1:2连续稀释,得到200,100,50,25,12.5ng /μl系列标准稀释液。

3.3将190μLPolite 橙色工作溶液加入0.2 mL PCR管中。

3.4每管加入10μL标准品或10μL样品。

3.5在室温下孵育反应15分钟。

3.6将样品插入CytoCite 并用绿色荧光通道监测荧光。

 

数据分析

Portelite 荧光蛋白定量试剂盒 优化用于 CytoCite 和Qubit 荧光分析仪    货号11111

图1使用Portelite 荧光蛋白定量试剂盒*优化用于CytoCite 和Qubit 荧光分析仪*和Qubit®荧光分析仪,在Ex / Em 485 / 5000nm下测量BSA,鸡蛋卵清蛋白,猪甲状腺球蛋白的系列稀释液。 可以检测到低至50 ng / mL的蛋白质。

 

参考文献

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说明书
Portelite 荧光蛋白定量试剂盒 优化用于 CytoCite 和Qubit 荧光分析仪.pdf