Amplite 荧光法蛋白定量试剂盒 橙色荧光

	货号	11105	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	500 tests	价格	2604
	Ex (nm)		Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法蛋白定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。蛋白质定量是蛋白质纯化，电泳，细胞生物学，分子生物学和其他研究应用中的重要任务。通常使用Biuret，Lowry，BCA和Bradford测定来估计蛋白质浓度。但是，这些比色测定法不太灵敏，并且需要大量样品以确保准确性。我们的Amplite 荧光蛋白定量试剂盒比现有的比色蛋白测量（例如Bradford和Bicinchoninic acid（BCA）测定）敏感得多。该试剂盒中使用的Prolite 橙在水溶液中不发荧光，但能快速与蛋白质反应并产生明亮的荧光。 Amplite 荧光蛋白定量试剂盒提供了一种定量分析溶液中蛋白质浓度的简单方法。只能检测到0.1μg/ mL的BSA。该试剂盒可以用方便的96孔或384孔微量滴定板格式进行。它可以在30分钟内完成，荧光信号易于在Ex / Em = 485/590 nm处监测。该试剂盒已被用于（1）研究蛋白质/蛋白质相互作用; （2）亲和层析后测量柱级分; （3）估计细胞提取物中膜蛋白的回收率;和（4）融合蛋白的高通量筛选。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法蛋白定量试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备Prolite 橙色工作溶液（50μL）
2.添加BSA标准品和/或测试样品（50μL）
3.在室温下孵育30分钟
4.在Ex / Em = 485 / 590nm处读取荧光强度

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
Protein Enhancer原液（500X）：
将100μL蛋白质增强缓冲液（组分E）加入到蛋白质增强剂（组分C）的小瓶中。 注意：20μL蛋白质增强剂原液（500X）足以制备10 mL工作溶液。 未使用的Protein Enhancer储备液（500X）应在-20 oC下以单次使用的等分试样储存。

2.标准溶液

BSA标准
注意：标准品和测试样品应在Protein Enhancer工作溶液中制备。

3.工作溶液

1.蛋白质增强剂工作溶液：
将20μL蛋白质增强剂储备溶液（500X）加入10 mL分析缓冲液（组分D）中并充分混合。

2. Prolite 橙色工作溶液：
将10μLProliteTM Orange（组分A）加入5mL测定缓冲液（组分D）中并充分混合。 注意：5 mL Prolite Orange工作溶液足以容纳1个平板。 为每个实验准备足够的Prolite 橙色工作溶液。

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中BSA标准品和测试样品的布局。 BS = BSA标准（BS1-BS7）; BL =空白对照; TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

蛋白质分析

1.将50μLBSA标准品，空白对照和测试样品（参见表1和2）加入到实心黑色96孔板中。 注意：对于384孔板，添加20μL样品。

2.将50μL/孔的Prolite Orange工作溶液加入BSA标准品，空白对照和测试样品中，使总测定体积为100μL/孔。 注意：对于384孔板，在每个孔中加入20μLProlite Orange工作溶液。

3.将反应在37℃孵育10至30分钟，避光。

4.用Ex / Em = 485 / 590nm的荧光板读数器监测荧光增加。

参考文献

Dual Amplification Fluorescence Assay for Alpha Fetal Protein Utilizing Immunohybridization Chain Reaction and Metal-Enhanced Fluorescence of Carbon Nanodots
Authors: Xu, D. D.; Liu, C.; Li, C. Y.; Song, C. Y.; Kang, Y. F.; Qi, C. B.; Lin, Y.; Pang, D. W.; Tang, H. W.
Journal: ACS Appl Mater Interfaces (2017): 37606-37614

Quantification of Membrane Protein Self-Association with a High-Throughput Compatible Fluorescence Assay
Authors: Li, J.; Qiu, X. J.
Journal: Biochemistry (2017): 1951-1954

Use of anchor protein modules in fluorescence polarisation aptamer assay for ochratoxin A determination
Authors: Samokhvalov, A. V.; Safenkova, I. V.; Eremin, S. A.; Zherdev, A. V.; Dzantiev, B. B.
Journal: Anal Chim Acta (2017): 80-87

Tryptophan fluorescence quenching as a binding assay to monitor protein conformation changes in the membrane of intact mitochondria
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Journal: J Bioenerg Biomembr (2016): 241-7

Ag@SiO2-entrapped hydrogel microarray: a new platform for a metal-enhanced fluorescence-based protein assay
Authors: Jang, E.; Kim, M.; Koh, W. G.
Journal: Analyst (2015): 3375-83

Label-free fluorescence assay for protein kinase based on peptide biomineralized gold nanoclusters as signal sensing probe
Authors: Song, W.; Wang, Y.; Liang, R. P.; Zhang, L.; Qiu, J. D.
Journal: Biosens Bioelectron (2015): 234-40

Budded baculoviruses as a tool for a homogeneous fluorescence anisotropy-based assay of ligand binding to G protein-coupled receptors: the case of melanocortin 4 receptors
Authors: Veiksina, S.; Kopanchuk, S.; Rinken, A.
Journal: Biochim Biophys Acta (2014): 372-81

Characterization of G protein-coupled receptors by a fluorescence-based calcium mobilization assay
Authors: Caers, J.; Peymen, K.; Suetens, N.; Temmerman, L.; Janssen, T.; Schoofs, L.; Beets, I.
Journal: J Vis Exp (2014): e51516

Cleavage of pro-tumor necrosis factor alpha by ADAM metallopeptidase domain 17: a fluorescence-based protease assay cleaves its natural protein substrate
Authors: Zhang, C.; Zheng, L.; Nurnberg, J.; Vacari, B. M.; Zhou, J.; Wang, Y.
Journal: Anal Biochem (2014): 14-9

A fluorescence-based thermal shift assay identifies inhibitors of mitogen activated protein kinase kinase 4
Authors: Krishna, S. N.; Luan, C. H.; Mishra, R. K.; Xu, L.; Scheidt, K. A.; Anderson, W. F.; Bergan, R. C.
Journal: PLoS One (2013): e81504

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Cy5 炔烃

	货号	976	存储条件
	规格	25 mg	价格	8628
	Ex (nm)	651	Em (nm)	670
	分子量	807.90	溶剂
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：976

产品名称：Cy5 炔烃

规格：25mg

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：807.90

溶剂：DMSO

激发波长（nm）：650

发射波长（nm）：669

产品介绍

Cy5 炔烃是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。各种花青5（Cy5®）染料已用于标记生物分子，用于荧光成像和其他基于荧光的生化分析。它们广泛用于标记肽，蛋白质和寡核苷酸等。Cy5®染料是最常见的红色荧光团中的一种。这些多功能荧光团可以耐受3-10的pH范围，用于生物相关pH的各种应用。该染料还具有DMSO耐受性和光稳定性，能够在不损失性能的情况下从储存转移至分析。水溶性消除了在测定缓冲液中对有机溶剂的需要。我们的Cy5®Fluor经过全面QC测试，可确保高水平的发色团和活性染料含量。单活性染料适用于蛋白质和寡核苷酸的靶向，精确标记，双活性染料更适合于一般标记。建议使用NHS酯染料标记胺基，建议使用马来酰亚胺染料标记硫醇基团。该Cy5®炔烃选择性地与叠氮基团反应。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cy5 炔烃。 

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参考文献

Cube-shaped theranostic paclitaxel prodrug nanocrystals with surface functionalization of SPC and MPEG-DSPE for imaging and chemotherapy
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	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法过氧化氢检测试剂盒 红色荧光 是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化氢的试剂盒，过氧化氢（H₂O₂）是一种活性氧代谢副产物，可作为许多氧化应激相关状态的关键调节剂。它涉及许多与哮喘，动脉粥样硬化，糖尿病血管病变，骨质疏松症，一些神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物学事件。也许H₂O₂生物学最有趣的方面是最近的报告，即抗体具有将分子氧转化为过氧化氢的能力，有助于免疫系统的正常识别和破坏过程。测量这种活性物质将有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。

这种Amplite 荧光过氧化氢测定试剂盒使用我们的非荧光Amplite 红色过氧化物酶底物来量化溶液和细胞提取物中的过氧化氢。它还可用于通过酶偶联反应检测多种氧化酶活性。该试剂盒是一种优化的“混合和读数”分析，与HTS液体处理仪器兼容。它提供灵敏的一步荧光测定法，可在100μL测定体积（30 nM，图1）中检测少至3皮摩尔的H₂O₂。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且易于适应自动化。 其信号可通过Ex / Em = ~540 / 590 nm的荧光酶标仪或~570 nm的吸光度酶标仪轻松读取。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法过氧化氢检测试剂盒。 

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产品说明书

96孔板的测定方案

概述

准备H₂O₂反应混合物（50μL）

加入H₂O₂标准品或测试样品（50μL）

在室温下孵育10-30分钟在Ex / Em = 540/590 nm处监测荧光强度

注意：在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒组分。

操作方法

1.准备库存解决方案：

1.1100X Amplite 红色过氧化物酶底物原液：将250μLDMSO（组分E）加入到Amplite 红色底物（组分A）的小瓶中。 应及时使用原液; 任何剩余的溶液应等分并在-20℃重新冷冻。

注意：避免反复冻融循环并避免光照。

1.220U / mL过氧化物酶储备溶液：将1mL测定缓冲液（组分C）加入到辣根过氧化物酶（组分D）的小瓶中。

注意：未使用的HRP溶液应分成单次使用的等分试样并储存在-20 ℃。

1.320mM H₂O₂储备溶液：将22.7L的3％H₂O₂（0.88M，组分B）加入977L的测定缓冲液（组分C）中。

注意：稀释的H₂O₂溶液不稳定。 应丢弃未使用的部分。

2.准备H₂O₂反应混合物：

3.准备H₂O₂标准品（0至10μM）的连续稀释液：

注意1：在存硫醇如DTT和β-巯基乙醇的情况下，组分A不稳定。 高于10M（最终浓度）的硫醇将显着降低测定动态范围。

注意2：NADH和谷胱甘肽（还原形式：GSH）可能会干扰检测。

3.1将1μL20mM H₂O₂溶液（来自步骤1.3）加入1999μL测定缓冲液（组分C）中，得到10μMH₂O₂标准品。

3.2取200μL10μMH₂O₂标准品进行1：3连续稀释，得到3，1,0.3,0.1,0.03,0.01和0μMH₂O₂标准品系列稀释液。

3.3如说明书中表2和3中所述，将H₂O₂标准品和含H₂O₂的测试样品的系列稀释液加入到固体黑色96孔微量培养板中。

4.在上清液反应中进行H₂O₂测定：

4.1将50μLH₂O₂反应混合物（来自步骤2）加入到H₂O₂标准品，空白对照和测试样品的每个孔中（参见步骤3.3），使总H₂O₂测定体积为100μL/孔。

注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μLH₂O₂反应混合物。

4.2在室温下孵育反应15至30分钟，避光。

4.3在Ex / Em = 540±10/590±10nm（最佳Ex / Em = 540 / 590nm）下用荧光板读数器监测荧光增加。

注意：也可以将板的内容物转移到白色透明底板上，并用吸光度酶标仪在576±5nm的波长下读数。与荧光读数相比，吸收检测具有较低的灵敏度。

5.对细胞进行H₂O₂检测：

Amplite 荧光过氧化氢检测试剂盒可用于测量细胞中H₂O₂的释放。 以下是建议的协议，可以进行修改以满足特定的研究需求。

5.1 H2O2反应混合物应按步骤2制备，但分析缓冲液（组分C）应替换为细胞培养系统中使用的培养基。建议的培养基包括（a）Krebs Ringers磷酸盐缓冲液（KRPB）;（b）汉克斯平衡盐溶液（HBSS）; 或（c）无血清培养基。

5.2在96孔板（50-100μL/孔）中制备细胞，并根据需要激活细胞。

注意：包括阴性对照（单独培养基和非活化细胞）用于测量背景荧光。

5.3将50μLH₂O₂反应混合物（来自步骤5.1）加入到细胞和H₂O₂标准品的每个孔中（来自步骤3.3）

5.4在室温下孵育反应15至30分钟，避光。

5.5用Ex / Em = 540±10/590±10nm（最佳Ex / Em = 540 / 590nm）的荧光板读数器监测荧光增加。

参考文献

Bio-inspired redox-cycling antimicrobial film for sustained generation of reactive oxygen species
Authors: Huan Liu, Xue Qu, Eunkyoung Kim, Miao Lei, Kai Dai, Xiaoli Tan, Miao Xu, Jinyang Li, Yangping Liu, Xiaowen Shi
Journal: Biomaterials (2018)

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Journal: PloS one (2018): e0203466

Semaphorin 4D inhibits neutrophil activation and is involved in the pathogenesis of neutrophil-mediated autoimmune vasculitis
Authors: Masayuki Nishide, Satoshi Nojima, Daisuke Ito, Hyota Takamatsu, Shohei Koyama, Sujin Kang, Tetsuya Kimura, Keiko Morimoto, Takashi Hosokawa, Yoshitomo Hayama
Journal: Annals of the Rheumatic Diseases (2017): annrheumdis–2016

Aggravation of brain infarction through an increase in acrolein production and a decrease in glutathione with aging
Authors: Takeshi Uemura, Kenta Watanabe, Misaki Ishibashi, Ryotaro Saiki, Kyoshiro Kuni, Kazuhiro Nishimura, Toshihiko Toida, Keiko Kashiwagi, Kazuei Igarashi
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2016): 630–635

Hydrogen peroxide detection with high specificity in living cells and inflamed tissues
Authors: Lei Rong, Chi Zhang, Qi Lei, Ming-Ming Hu, Jun Feng, Hong-Bing Shu, Yi Liu, Xian-Zheng Zhang
Journal: Regenerative Biomaterials (2016): rbw022

Modification of lignin in sugarcane bagasse by a monocopper hydrogen peroxide-generating oxidase from Thermobifida fusca
Authors: Cheng-Yu Chen, Cheng-Cheng Lee, Hung-Shuan Chen, Chao-Hsun Yang, Shu-Ping Wang, Jyh-Horng Wu, Menghsiao Meng
Journal: Process Biochemistry (2016): 1486–1495

Dopamine-mediated oxidation of methionine 127 in α-synuclein causes cytotoxicity and oligomerization of α-synuclein
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Journal: PLoS One (2013): e55068

Hydrogen peroxide stimulates the epithelial sodium channel through a phosphatidylinositide 3-kinase-dependent pathway
Authors: He-Ping Ma
Journal: Journal of Biological Chemistry (2011): 32444–32453

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iFluor 555琥珀酰亚胺酯

	货号	1028	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	1 mg	价格	2604
	Ex (nm)	557	Em (nm)	570
	分子量	1125.26	溶剂	DMSO
	产品详细介绍

简要概述

iFluor 555琥珀酰亚胺酯是iFluor系列荧光标记染料之一，可以覆盖整个可见光谱。所有iFluor 染料都具有优异的水溶性，它们的亲水性使有机溶剂的使用极小化。与常规的染料(如FITC，TRITC，Texas Red ，Cy3 ，Cy5和Cy7)相比，iFluor 染料具有更好的标记性能。一些iFluor 染料在某些抗体上明显优于Alexa Fluor 标记染料。它们是用于标记蛋白质和核酸的极便宜的荧光染料（替代Alexa Fluor 染料）。每种iFluor染料的开发都与特定的Alexa Fluor 或其他标记染料（如DyLight 染料）的光谱特性相匹配。

琥珀酰亚胺基（NHS）酯被证明是用于胺修饰的极佳试剂，因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应性和选择性。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时，需要考虑的因素很少：1.溶剂：在大多数情况下，活性染料应溶于无水二甲基甲酰胺（DMF）或二甲基亚砜（DMSO）中。 2.反应pH：胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应性试剂与非质子化脂族胺基团反应，包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此，胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3.反应缓冲液：使用胺反应试剂时，必须避免使用含有游离胺（如Tris和甘氨酸）和硫醇化合物的缓冲液。广泛用于蛋白质沉淀的铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）也必须在进行染料缀合之前除去（例如通过透析）。 4.反应温度：大多数缀合在室温下进行。特定标记反应可能需要升高或降低的温度。iFluor系列染料是AF系列染料的完美替代品。

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• AAT Bioquest iFluor 染料干货锦集 你想了解的都在这里
• 锦囊：iFluor 系列染料大集合

产品说明书

染色样本分析

操作步骤

1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：

将100μL反应缓冲液（如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液，pH~9.0）与900μL目标蛋白溶液（如抗体，蛋白质浓度> 2 mg / ml，如果可能）混合至100μL，再加入1 mL蛋白质标记原液。

注1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注2：蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中，则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析，以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。

注3：不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白（BSA）抗体或明胶不会被很好的标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞，以获得极佳标记结果。

注4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率会显着降低。为获得极佳标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

 

2.准备染料储备溶液（溶液B）：

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。

注意：在开始缀合前准备染料储备溶液（溶液B），及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周，避光保存。 避免冻融循环。

 

3.确定最佳染料/蛋白质比例（可选）：

注意：每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例，这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能影响其结合亲和力，而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定最佳染料/蛋白质比率。通常，对于大多数染料 – 蛋白质缀合物，推荐使用4-6种染料/蛋白质。

3.1使用10：1摩尔比的溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）作为起始点：将5μl染料储备溶液（溶液B，假设染料储备溶液为10 mM）加入到样品瓶中。蛋白质溶液（95μl溶液A）有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD，蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。

3.2运行缀合反应（参见下面的步骤4）。

3.3重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1;分别为15：1和20：1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比（DOS）。

3.6检测上述4种结合物，确定最佳的染料/蛋白质比例，以扩大标记反应。

 

4.运行结合反应：

4.1有效加入适量的染料储备溶液（溶液B）到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中晃动。

注意：溶液B /溶液的最佳摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3，我们建议使用10：1溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

 

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物（直接从步骤4）加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS（pH 7.2-7.4）。

5.4向所需样品中加入更多PBS（pH 7.2-7.4）以完成色谱柱纯化。

注1：立即使用时，染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释，并等分多次使用。

注2：对于长期储存，染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。

 

图示

图1.将HeLa细胞与小鼠抗微管蛋白，然后分别与AAT的iFluorTM 555山羊抗小鼠IgG偶联物（红色，右侧）和山羊抗小鼠IgG与AlexaFluor®555偶联（红色，左侧）一起孵育。 细胞核用Hoechst 33342（Blue，Cat＃17530）染色。

图2. HeLa细胞用小鼠抗微管蛋白染色，然后用iFluor TM 555山羊抗小鼠IgG（H + L）（红色）染色；肌动蛋白丝用Phalloidin-iFluor TM 488偶联物（绿色）染色；细胞核用DAPI（蓝色）染色。

 

参考文献

Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769

Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018

Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436

 

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	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒，过氧化氢是一种活性氧代谢副产物，可作为许多氧化应激相关状态的关键调节剂。 它涉及许多与哮喘，动脉粥样硬化，糖尿病血管病变，骨质疏松症，许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物学事件。 这种活性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的OxiVision Blue过氧化物来定量活细胞中的过氧化氢。 OxiVision 蓝色过氧化物具有细胞渗透性，当与过氧化氢反应时会产生蓝色荧光。 该试剂盒提供了一种监测活细胞中过氧化氢水平的敏感工具，并且它被优化用于流式细胞术。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。 

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞
2.用OxiVision 蓝色过氧化物传感器染色细胞
3.用测试化合物处理细胞
4.使用流式细胞仪Pacific Blue Channel监测荧光强度（Ex / Em = 405/450 nm）

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. OxiVision 蓝色过氧化物传感器原液：
将100μLDMSO（组分B）加入到OxiVision 蓝色过氧化物传感器（组分A）的小瓶中，并充分混合。 注意：1μL重组的OxiVision 蓝色过氧化物传感器原液足以容纳0.5 mL细胞。 应立即使用原液,避光。

点击查看细胞制备指南

样品分析

1.用OxiVision 蓝色过氧化物传感器储备液在完全培养基或37°C所需缓冲液中染色细胞20-30分钟，避光。

2.用测试化合物在完全培养基或37℃的所需缓冲液中处理细胞一段所需的时间。对于对照样品（未处理的细胞），加入相应量的化合物缓冲液。注意：建议在完全培养基中处理细胞。然而，如果测试的化合物对血清敏感，则可以在治疗前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后，将细胞重悬于1X Hank盐溶液和20mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液中。或者，可以在无血清培养基中处理细胞。注意：我们用完全培养基中的100μM过氧化氢在37°C处理Jurkat细胞90分钟以诱导过氧化氢。详细信息请参见图1。

3.使用流式细胞仪监测太平洋蓝色通道（Ex / Em = 405 / 450nm）的荧光强度。

参考文献

Plasma-activated medium selectively eliminates undifferentiated human induced pluripotent stem cells
Authors: Ryo Matsumoto, Kazunori Shimizu, Takunori Nagashima, Hiromasa Tanaka, Masaaki Mizuno, Fumitaka Kikkawa, Masaru Hori, Hiroyuki Honda
Journal: Regenerative Therapy (2016): 55–63

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	货号	1055	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	1 mg	价格	2604
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	分子量	999.01	溶剂	DMSO
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简要概述

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光适用于流式细胞仪

	货号	11506	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	100 Tests	价格	3264
	Ex (nm)	498	Em (nm)	517
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒，过氧化氢是一种活性氧代谢副产物，可作为许多氧化应激相关事件的关键调节剂。 它涉及许多与哮喘，动脉粥样硬化，糖尿病血管病变，骨质疏松症，许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物学过程。 这种活性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的OxiVision Green过氧化物传感器来定量活细胞中的过氧化氢。 OxiVision 绿色过氧化物传感器具有细胞渗透性，当与过氧化氢反应时会产生绿色荧光。 该试剂盒提供了一种监测活细胞中过氧化氢水平的敏感工具，并且它被优化用于流式细胞术。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。 

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活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞
2.使用OxiVision Green过氧化物染色细胞
3.用测试化合物处理细胞
4.用流式细胞仪FITC通道监测荧光强度（Ex / Em = 490/530 nm）

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. OxiVision 绿色过氧化物传感器原液：
将100μLDMSO（组分B）加入到OxiVision 绿色过氧化物（组分A）的小瓶中，并充分混合。 注意：1μL重组的OxiVision 绿色过氧化物储备溶液适用于0.5 mL细胞。 应立即使用原液,避光。

点击查看细胞制备方案

样品分析

1.使用OxiVision 绿色过氧化物传感器储备溶液在完全培养基或37°C所需缓冲液中染色细胞30分钟，避光。

2.用测试化合物在完全培养基或37℃的所需缓冲液中处理细胞一段所需的时间。对于对照样品（未处理的细胞），加入相应量的化合物缓冲液。注意：建议在完全培养基中处理细胞。然而，如果测试的化合物对血清敏感，则可以在治疗前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后，将细胞重悬于1X Hank盐溶液和20mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液中。或者，可以在无血清培养基中处理细胞。注意：我们用完全培养基中的100μM过氧化氢在37°C处理Jurkat细胞90分钟以诱导过氧化氢。详细信息请参见图1。

3.用测试化合物在37℃处理细胞一段所需的时间。取出处理溶液，然后用OxiVision 绿色过氧化物传感器储备液在全培养基或37°C所需的缓冲液中染色细胞一段所需的时间。

4.使用流式细胞仪监测FITC通道（Ex / Em = 490 / 530nm）的荧光强度。

参考文献

Role of Polydopamine’s Redox-Activity on its Pro-oxidant, Radical-Scavenging, and Antimicrobial Activities
Authors: Huan Liu, Xue Qu, Haoqi Tan, Jialin Song, Miao Lei, Eunkyoung Kim, Gregory F Payne, Changsheng Liu
Journal: Acta Biomaterialia (2019)

Plasma-activated medium selectively eliminates undifferentiated human induced pluripotent stem cells
Authors: Ryo Matsumoto, Kazunori Shimizu, Takunori Nagashima, Hiromasa Tanaka, Masaaki Mizuno, Fumitaka Kikkawa, Masaru Hori, Hiroyuki Honda
Journal: Regenerative Therapy (2016): 55–63

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	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：11705

产品名称：葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-FITC

规格：100ug

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：1283.25

溶剂：水

激发波长(nm)：490

发射波长(nm)：514

产品介绍

葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-FITC是美国AAT Bioquest生产的荧光底物，尿苷-5′-二磷酸-1-α-D-葡萄糖（UDP-Glc）是碳水化合物代谢的关键中间体。 UDP-Glc作为糖原的前体，可以代谢成UDP-半乳糖和UDP-葡糖醛酸，然后可以将其作为半乳糖和葡糖醛酸掺入多糖中。 UDP-Glc用作蔗糖脂多糖和糖鞘脂的前体。 UDP-Glc是葡糖基转移酶使用的常见底物，包括某些细菌毒素，例如来自梭菌（Clostridium dicile）的毒素A和B. UDP-Glc的荧光类似物可用于研究葡糖基转移酶和梭菌毒素。 该荧光素UDP-Glc衍生物具有与FITC缀合物相同的光谱性质。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-FITC。 

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参考文献

cDNA cloning and characterization of UDP-glucose: anthocyanidin 3-O-glucosyltransferase in Freesia hybrida
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Downregulation of putative UDP-glucose: flavonoid 3-O-glucosyltransferase gene alters flower coloring in Phalaenopsis
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Molecular cloning and analysis of the UDP-Glucose Pyrophosphorylase in Streptococcus equi subsp. zooepidemicus
Authors: Ma Z, Fan HJ, Lu CP.
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Regulation of UDP-glucose dehydrogenase is sufficient to modulate hyaluronan production and release, control sulfated GAG synthesis, and promote chondrogenesis
Authors: Clarkin CE, Allen S, Kuiper NJ, Wheeler BT, Wheeler-Jones CP, Pitsillides AA.
Journal: J Cell Physiol (2011): 749

An enzymatic method to distinguish tetrahydrobiopterin from oxidized biopterins using UDP-glucose:tetrahydrobiopterin glucosyltransferase
Authors: Kim HL, Kim do H, Lee YK, Park SO, Lee YW, Kwon OS, Park YS.
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Functional characterization of a UDP-glucose:flavonoid 3-O-glucosyltransferase from the seed coat of black soybean (Glycine max (L.) Merr.)
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Journal: Plant Cell (2009): 892

iFluor 660 胺

	货号	1075	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	1 mg	价格	2604
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	分子量	1151.15	溶剂	DMSO
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