日度归档：2021年10月29日

钙离子荧光探针Rhod-2 dextran conjugate *Low affinity with MW 10,000* 货号20451-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Rhod-2 dextran conjugate *Low affinity with MW 10,000*

钙离子荧光探针Rhod-2 dextran conjugate *Low affinity with MW 10,000*

钙离子荧光探针Rhod-2 dextran conjugate *Low affinity with MW 10,000* 货号20451 货号 20451 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 5244
Ex (nm) 553 Em (nm) 577
分子量 ~11000 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：20451

产品名称：钙离子荧光探针Rhod-2 dextran conjugate

规格：1mg

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：~11000

溶剂：水

激发波长(nm)：557

发射波长(nm)：579

 

产品介绍

葡聚糖偶联的钙指示剂稳定地保留在神经元内。结果，它们非常适合在生理温度下测量突触前钙。另外，右旋糖酐指示剂可用于在体内标记神经元及其突触前的按钮。这样就可以测量无法稳定加载其他类型指示剂的投射纤维突触前囊中的钙。Stephan D. Brenowitz和Wade G. Regehr报道了一种利用Rhod 2-dextran指示剂在活体内将攀登纤维投射物装载到小脑的技术，用于在脑切片中进行突触前钙成像。该技术适用于研究许多可以制备脑切片的物种的投射纤维。

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

 

参考文献

Tuning the Color Palette of Fluorescent Copper Sensors through Systematic Heteroatom Substitution at Rhodol Cores
Authors: Shang Jia, Karla M Ramos-Torres, Safacan Kolemen, Cheri M Ackerman, Christopher J Chang
Journal: (2017)

 

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产品名称 货号
钙离子荧光探针Rhod-2 dextran conjugate Cat#20450

说明书
钙离子荧光探针Rhod-2 dextran conjugate *Low affinity with MW 10,000*.pdf

Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 红色荧光 货号22844-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 红色荧光 货号22844 货号 22844 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 50 Tests 价格 3924
Ex (nm) 549 Em (nm) 648
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest研发的用于检测细胞凋亡的试剂盒，DNA片段化代表晚期细胞凋亡的特征。凋亡细胞中的DNA断裂可通过末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）检测。 TUNEL测定法依赖于DNA中存在的缺口，该缺口可通过TdT进行鉴定，TdT是一种酶，该酶催化添加标记物的dUTP的添加。现有的所有TUNEL分析均包含剧毒的椰油酸钠，这可能会诱导细胞凋亡并降低DNA的产生和DNA链。我们的Cell Meter™TUNEL细胞凋亡测定试剂盒使用了不含甲藻酸钠的专有缓冲系统。该试剂盒基于将我们独特的专有荧光染料掺入凋亡过程中形成的DNA片段中。该测定法经过优化，可在不使用抗体的情况下直接检测分离的或附着的细胞中的细胞凋亡。该试剂盒可提供所有必需成分，并具有优化的测定方案。适用于荧光酶标仪，荧光显微镜或流式细胞仪。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的细胞凋亡检测试剂盒。

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适用仪器

流式细胞仪  
激发： 488nm激光
发射： 620/20nm滤波片
通道： PE-Cy5通道
荧光显微镜  
激发： TRITC滤波片
发射： TRITC滤波片
推荐孔板： 黑色透明
荧光酶标仪  
激发： 550nm滤波片
发射： 590-650nm滤波片
cutoff: 570nm
推荐孔板： 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用测试化合物准备细胞。
  2. 与TUNEL工作溶液在37°C下孵育30分钟至1小时。
  3. 洗涤细胞。
  4. 用4％甲醛（可选）固定细胞。
  5. 用带FITC滤光片的荧光显微镜或带FITC通道的流式细胞仪。读取Ex / Em = 490/525 nm（截止= 515 nm）处的荧光强度。

 

溶液配制 

工作溶液配制

将0.5μL的100X Tunnelyte Green（组分A）添加到50μL的反应缓冲液（组分B）中，使总体积为50.5μL的TUNEL工作溶液。 避光。 注意：应单独评估每个细胞系，以确定最佳细胞密度。

 

实验步骤

1.根据您的特定协议，将细胞培养至最佳密度以诱导凋亡。 对于在96孔板培养物中生长的贴壁细胞，我们建议大约30,000至50,000个细胞/孔，对于非贴壁细胞，建议大约1至2 x 106细胞/ mL。 同时，在每种标记条件下，用诱导群体相同的密度培养非诱导阴性对照细胞群体。 注意：我们用100 nM-1 µM星形孢菌素处理HeLa细胞4小时，以诱导细胞凋亡。

2.染色和固色：

2.1取出细胞培养基。
2.2向每个样品中添加50µL TUNEL工作溶液。
2.3在37°C下孵育30-60分钟。
2.4除去TUNEL工作溶液，并用200 µL /孔的PBS洗涤细胞1-2次。
2.5向每个样品中添加100uL反应缓冲液（组分B）。
2.6使用Ex / Em = 550/590-650 nm（Cut off= 570 nm）的荧光酶标仪，带TRITC滤光片的荧光显微镜或带FL3通道的流式细胞仪检测荧光强度。
2.7可选：从步骤5中移出反应缓冲液，并向每个孔中添加100 µL /孔/ 96孔板的4％甲醛固定缓冲液（未提供）。注意：对于非贴壁细胞，请添加所需量（例如2X106细胞/ mL）的4％甲醛固定液。
2.8在室温下将平板孵育20至30分钟。
2.9去除固定剂。
2.10用PBS洗涤细胞2-3次，并用100µL PBS /孔/ 96孔板替换。
2.11使用Ex / Em = 550/590-650nm（Cut off= 570 nm）的荧光酶标仪，带TRITC滤光片的荧光显微镜或带FL3通道的流式细胞仪检测荧光强度。
2.12可选：用1X Hoechst（组分C）在Ex / Em = 350/460 nm处染色细胞核，以进行图像分析

 

参考文献

Vaccarin alleviates hypertension and nephropathy in renovascular hypertensive rats
Authors: Cai, Weiwei and Zhang, Zhenpeng and Huang, Yiqi and Sun, Haijian and Qiu, Liying
Journal: Experimental and Therapeutic Medicine (2018): 924–932

CO-releasing molecules-2 attenuates ox-LDL-induced injury in HUVECs by ameliorating mitochondrial function and inhibiting Wnt/β-catenin pathway
Authors: Sun, Hai-Jian and Xu, Dong-Yan and Sun, Yi-Xin and Xue, Tong and Zhang, Chen-Xing and Zhang, Zhi-Xuan and Lin, Wei and Li, Ke-Xue
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017)

Salusin-β mediates high glucose-induced endothelial injury via disruption of AMPK signaling pathway
Authors: Zhu, Xuexue and Zhou, Yuetao and Cai, Weiwei and Sun, Haijian and Qiu, Liying
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017)

Vaccarin protects human microvascular endothelial cells from apoptosis via attenuation of HDAC1 and oxidative stress
Authors: Zhu, Xuexue and Lei, Yueyue and Tan, Fanggen and Gong, Leilei and Gong, Haifeng and Yang, Wei and Chen, Ting and Zhang, Zhixuan and Cai, Weiwei and Hou, Bao and others
Journal: European Journal of Pharmacology (2017)

Axl is required for TGF-β2-induced dormancy of prostate cancer cells in the bone marrow
Authors: Yumoto, Kenji and Eber, Matthew R and Wang, Jingcheng and Cackowski, Frank C and Decker, Ann M and Lee, Eunsohl and Nobre, Ana Rita and Aguirre-Ghiso, Julio A and Jung, Younghun and Taichman, Russell S
Journal: Scientific Reports (2016)

Growth Arrest-Specific 6 (GAS6) Promotes Prostate Cancer Survival by G1 Arrest/S Phase Delay and Inhibition of Apoptotic Pathway During Chemotherapy in Bone Marrow
Authors: Lee, Eunsohl and Decker, Ann M and Cackowski, Frank C and Kana, Lulia A and Yumoto, Kenji and Jung, Younghun and Wang, Jingcheng and Buttitta, Laura and Morgan, Todd M and Taichman, Russell S
Journal: Journal of cellular biochemistry (2016)

RFX1–dependent activation of SHP-1 induces autophagy by a novel obatoclax derivative in hepatocellular carcinoma cells
Authors: Su, Jung-Chen and Tseng, Ping-Hui and Hsu, Cheng-Yi and Tai, Wei-Tien and Huang, Jui-Wen and Ko, Ching-Huai and Lin, Mai-Wei and Liu, Chun-Yu and Chen, Kuen-Feng and Shiau, Chung-Wai
Journal: Oncotarget (2014): 4909

In situ detection of apoptosis by the TUNEL assay: an overview of techniques
Authors: Loo DT.
Journal: Methods Mol Biol (2011): 3

Testicular apoptosis after dietary zinc deficiency: ultrastructural and TUNEL studies
Authors: Kumari D, Nair N, Bedwal RS.
Journal: Syst Biol Reprod Med (2011): 233

In situ localization of apoptosis using TUNEL
Authors: Hewitson TD, Darby IA.
Journal: Methods Mol Biol (2010): 161

 

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说明书
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钙离子荧光探针Cal-670 , 钾盐 货号20455-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Cal-670 , 钾盐

钙离子荧光探针Cal-670 , 钾盐

货号 20455 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10×50 ug 价格 5244
Ex (nm) 667 Em (nm) 680
分子量 1587.99 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

钙离子荧光探针Cal-670 , 钾盐是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，钙的测量对于许多生物学研究至关重要。荧光探针显示结合钙的光谱响应，使研究人员能够通过荧光显微镜，流式细胞仪，荧光光谱和荧光酶标仪研究细胞内游离钙浓度的变化。Cal-670 是一种近红外（NIR）钙指示剂，最大发射波长约为675 nm。用633nm或647nm的红色激光可以很好地激发它，具有Kd~853nM的中等钙亲和力。Cal-670™是极少数可用于体内成像的钙指示剂之一，因为它具有NIR荧光。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针Cal-670 , 钾盐。 

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

使用Cal-520®AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯类

 

1.使用Cal-520®，Cal-590 或Cal-630 AM酯类：

        AM酯是非极性酯，其可以容易地穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针加载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520®AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，应根据具体实验修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520®AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b）在实验当天，将Cal-520®AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM 溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液中使用0.04％Pluronic®F-127制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520®AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM 酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，则可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（最终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后将板在室温下再孵育30分钟。

注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS（如果适用）替换染料工作溶液，选择含有阴离子转运蛋白抑制剂（如1 mM丙磺舒）的缓冲液，以去除多余的探针。

g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM ）进行实验。

 

2.测量细胞内钙响应：

钙离子荧光探针Cal-670 , 钾盐 货号20455

图1. 没有丙磺舒的CHO-M1细胞中内源性P2Y受体对ATP的反应。在96孔黑壁/透明底板中，将CHO-M1细胞以每100μL/孔40,000个细胞接种过夜。将100μl的4μMFluo -3AM，Fluo- 4AM 或Cal202®AM在HHBS中加入孔中，并将细胞在37℃下孵育2小时。用100μlHHBS替换染料加载培养基，加入50μl300μMATP，然后使用FITC通道用荧光显微镜（Olympus IX71）成像。

 

钙离子荧光探针Cal-670 , 钾盐 货号20455

图2. 用Cal-520 或Fluo-4 AM 测量的CHO-K1细胞中ATP刺激的内源性P2Y受体的钙响应。在96孔黑壁/透明底板中，将CHO-K1细胞以每100μL /孔50,000个细胞接种过夜。100μL的5 μ 中号的Fluo-4 AM或校准- 520® AM与（A）或不具有（B）2.5mM丙磺舒加入到细胞中，并将细胞在37下温育ø下进行2小时。 通过FlexStation（Molecular Devices）添加ATP（50μL/孔）以达到最终指示的浓度。

 

钙离子荧光探针Cal-670 , 钾盐 货号20455

图3. CHO-K细胞中内源性P2Y受体对ATP的反应。将CHO-K细胞以每孔100μL每孔40,000个细胞接种过夜，在96孔黑壁/透明底板中。将100μl含有1mM丙磺舒的HHBS中的4μMCal590 AM或Cal 630 AM加入孔中，并将细胞在37℃下孵育2小时。将染料上样培养基替换为100μlHHBS和1mM丙磺舒，然后在添加50μl300μMATP 之前和之后使用TRITC通道用荧光显微镜（Olympus IX71）成像。

 

参考文献

All-Optical Crosstalk-Free Manipulation and Readout of Chronos-expressing Neurons
Authors: Navjeevan Singhh Soor, Peter Quicke, Carmel L Howe, Kuin Tian Pang, Mark Neil, Simon Schultz, Amanda Joy Foust
Journal: Journal of Physics D: Applied Physics (2018)

Calreticulin regulates TGF-β1-induced epithelial mesenchymal transition through modulating Smad signaling and calcium signaling
Authors: Yanjiao Wu, Xiaoli Xu, Lunkun Ma, Qian Yi, Weichao Sun, Liling Tang
Journal: The International Journal of Biochemistry & Cell Biology (2017)

Dexmedetomidine reduces hypoxia/reoxygenation injury by regulating mitochondrial fission in rat hippocampal neurons
Authors: Jia Liu, Qing Du, He Zhu, Yu Li, Maodong Liu, Shoushui Yu, Shilei Wang
Journal: Int J Clin Exp Med (2017): 6861–6868

Monosialoganglioside 1 may alleviate neurotoxicity induced by propofol combined with remifentanil in neural stem cells
Authors: Jiang Lu, Xue-qin Yao, Xin Luo, Yu Wang, Sookja Kim Chung, He-xin Tang, Chi Wai Cheung, Xian-yu Wang, Chen Meng, Qing Li
Journal: Neural Regeneration Research (2017): 945

Obtaining spontaneously beating cardiomyocyte-like cells from adipose-derived stromal vascular fractions cultured on enzyme-crosslinked gelatin hydrogels
Authors: Gang Yang, Zhenghua Xiao, Xiaomei Ren, Haiyan Long, Kunlong Ma, Hong Qian, Yingqiang Guo
Journal: Scientific Reports (2017): 41781

Di (2-ethylhexyl) phthalate-induced apoptosis in rat INS-1 cells is dependent on activation of endoplasmic reticulum stress and suppression of antioxidant protection
Authors: Xia Sun, Yi Lin, Qiansheng Huang, Junpeng Shi, Ling Qiu, Mei Kang, Yajie Chen, Chao Fang, Ting Ye, Sijun Dong
Journal: Journal of cellular and molecular medicine (2015): 581–594

The effect of mitochondrial calcium uniporter on mitochondrial fission in hippocampus cells ischemia/reperfusion injury
Authors: Lantao Zhao, Shuhong Li, Shilei Wang, Ning Yu, Jia Liu
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2015): 537–542

Fungus induces the release of IL-8 in human corneal epithelial cells, via Dectin-1-mediated protein kinase C pathways.
Authors: Xu-Dong Peng, Gui-Qiu Zhao, Jing Lin, Nan Jiang, Qiang Xu, Cheng-Cheng Zhu, Jain-Qiu Qu, Lin Cong, Hui Li
Journal: International journal of ophthalmology (2014): 441–447

Propofol and remifentanil at moderate and high concentrations affect proliferation and differentiation of neural stem/progenitor cells
Authors: Qing Li, Jiang Lu, Xianyu Wang
Journal: Neural regeneration research (2014): 2002

Role of mitochondrial calcium uniporter in regulating mitochondrial fission in the cerebral cortexes of living rats
Authors: Nan Liang, Peng Wang, Shilei Wang, Shuhong Li, Yu Li, Jinying Wang, Min Wang
Journal: Journal of Neural Transmission (2014): 593–600

 

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产品名称 货号
钙离子荧光探针Cal-520, 钾盐 Cat#21140
钙离子荧光探针Cal-590 钾盐 Cat#20518
钙离子荧光探针Cal-630 钾盐 Cat#20538

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Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 405nm激发 货号22845-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 405nm激发

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 405nm激发

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 405nm激发 货号22845 货号 22845 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 401 Em (nm) 460
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

细胞周期具有四个连续阶段：G0 / G1，S，G2和M。在细胞通过细胞周期的过程中，其DNA在S（合成）阶段复制，并在M（有丝分裂）阶段在两个子细胞之间平均分配。这两个阶段由两个间隙阶段分开：G0 / G1和G2。这两个间隙相为细胞提供了生长时间，并使它们的蛋白质和细胞器的质量增加了一倍。在进入下一阶段的细胞周期之前，细胞还将它们用于检测内部和外部条件。细胞通过细胞周期的传递受到许多不同调节蛋白的控制。该特定试剂盒旨在通过在活细胞中使用我们专有的Nuclear Violet 检测细胞周期的进程和增殖。可以通过流式细胞术确定给定样品中处于G0 / G1，S和G2 / M期的细胞以及亚G1期处于凋亡之前的细胞的百分比。可以用流式细胞仪（PacificBlue®通道）检测用Nuclear Violet 染色的细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒。

 

适用仪器

流式细胞仪  
激发： 405 nm激光
发射： 450/40 nm滤波片
通道： Pacific Blue通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用5×105至1×106细胞/ mL的密度制备含测试化合物的细胞
  2. 在0.5 mL细胞溶液中加入1 µL 500X Nuclear Violet
  3. 在室温下孵育30-60分钟
  4. 使用405nm紫色光激发流式细胞仪进行分析

 

实验步骤

1.对于每个样品，请在0.5 mL的温暖培养基或自备缓冲液中以5×105至1×106细胞/ mL的密度制备细胞。注意：应单独评估每种细胞系，以确定诱导凋亡的最佳细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞，以诱导凋亡或其他细胞周期功能。

3.向含有生长培养基的细胞中加入1µL 500X Nuclear Violet （组分A），并在37°C，5％CO2的培养箱中孵育细胞30至60分钟。注意：对于贴壁细胞，用0.5mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在用Nuclear Violet 孵育之前用含血清的培养基洗涤一次。注意：适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。注意：DNA染色前无需固定细胞，因为Nuclear Violet 具有细胞渗透性。

4.可选：以1000 rpm离心细胞4分钟，然后将细胞重悬于0.5 mL检测缓冲液（组分B）或自备缓冲液中。

5.使用405 nm紫色激光（Ex / Em = 405/445 nm）通过流式细胞仪检测荧光强度。

 

参考文献

Cell cycle synchronization of Escherichia coli using the stringent response, with fluorescence labeling assays for DNA content and replication
Authors: Ferullo DJ, Cooper DL, Moore HR, Lovett ST.
Journal: Methods (2009): 8

DNA replication, cell cycle progression and the targeted gene repair reaction
Authors: Engstrom JU, Kmiec EB.
Journal: Cell Cycle (2008): 1402

Morin inhibits the growth of human leukemia HL-60 cells via cell cycle arrest and induction of apoptosis through mitochondria dependent pathway
Authors: Kuo HM, Chang LS, Lin YL, Lu HF, Yang JS, Lee JH, Chung JG.
Journal: Anticancer Res (2007): 395

Direct control of cell cycle gene expression by proto-oncogene product ACTR, and its autoregulation underlies its transforming activity
Authors: Louie MC, Revenko AS, Zou JX, Yao J, Chen HW.
Journal: Mol Cell Biol (2006): 3810

Cell cycle markers for live cell analyses
Authors: Easwaran HP, Leonhardt H, Cardoso MC.
Journal: Cell Cycle (2005): 453

Dynamic relocalization of hOGG1 during the cell cycle is disrupted in cells harbouring the hOGG1-Cys326 polymorphic variant
Authors: Luna L, Rolseth V, Hildrestr and GA, Otterlei M, Dantzer F, Bjoras M, Seeberg E.
Journal: Nucleic Acids Res (2005): 1813

Dynamics of relative chromosome position during the cell cycle
Authors: Essers J, van Cappellen WA, Theil AF, van Drunen E, Jaspers NG, Hoeijmakers JH, Wyman C, Vermeulen W, Kanaar R.
Journal: Mol Biol Cell (2005): 769

Cell cycle regulation of the murine 8-oxoguanine DNA glycosylase (mOGG1): mOGG1 associates with microtubules during interphase and mitosis
Authors: Conlon KA, Zharkov DO, Berrios M.
Journal: DNA Repair (Amst) (2004): 1601

Description of a flow cytometry approach based on SYBR-14 staining for the assessment of DNA content, cell cycle analysis, and sorting of living normal and neoplastic cells
Authors: Nunez R, Garay N, Villafane C, Bruno A, Lindgren V.
Journal: Exp Mol Pathol (2004): 29

Differential roles of STAT1alpha and STAT1beta in fludarabine-induced cell cycle arrest and apoptosis in human B cells
Authors: Baran-Marszak F, Feuillard J, Najjar I, Le Clorennec C, Bechet JM, Dusanter-Fourt I, Bornkamm GW, Raphael M, Fagard R.
Journal: Blood (2004): 2475

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钙离子荧光探针Cal-670-Dextran Conjugate *MW 10,000* 货号20457-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Cal-670-Dextran Conjugate *MW 10,000*

钙离子荧光探针Cal-670-Dextran Conjugate *MW 10,000*

钙离子荧光探针Cal-670-Dextran Conjugate *MW 10,000* 货号20457 货号 20457 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 6564
Ex (nm) 667 Em (nm) 680
分子量 ~12000 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

Cal-520 ，Cal-590 和Cal-630 提供最强大的均匀荧光测定工具，用于检测细胞内钙动员。它们是荧光钙敏感染料，与现有的钙指示剂（如Fluo-3 AM，Fluo-4 AM和Rhod-2 AM）相比，具有显着改善的信噪比和细胞内保留。表达通过钙发出信号的GPCR或钙通道的细胞可以预装载可以穿过细胞膜的Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM。一旦进入细胞内，Cal 520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM的亲脂性阻断基团被细胞内酯酶切割，产生带负电荷的荧光染料，留在细胞内。它们与钙结合后的荧光大大增强。当用激动剂刺激细胞时，该受体表示细胞内钙的释放，这显着增加了Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 的荧光。高灵敏度和> 100倍荧光增强的特性使Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM成为测量细胞钙的理想指标。高信噪比和更好的细胞内保留使Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 钙测定成为评估GPCR和钙通道靶标以及筛选其激动剂和拮抗剂的有力工具。

除了方便的激发波长和钙的大荧光增强外，Cal-520 ，Cal-590 和Cal-630 主要定位于细胞溶胶中，不像Rhod-2主要位于线粒体中。 此外，Cal-590 和Cal-630 的长Ex / Em波长使这些染料成为完美的钙指示剂，与绿色荧光蛋白（GFP）细胞系的多色检测兼容。 此外，Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 钙测定经过优化，可与大多数现有荧光仪器兼容。 Cal-520在488 nm处可以很好地激发，并与FITC滤光片组一起使用。 Cal-590经过优化，可在555 nm激发，并与TRITC / Cy3滤光片组配合使用。 Cal-590经过优化，可在594 nm激发，并与TexasRed®滤光片组配合使用。光谱和钙结合特性总结如下（参见说明书中的表1）。

点击查看光谱

钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

使用Cal-520 AM，Cal-570 AM或Cal-630 AM酯类

1.使用Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 AM酯：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（最终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。

 

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。

 

参考文献

Spatio-temporal modulation of light for stimulation and recording of neuronal activity
Authors: He Ma, Michael Lawrence Castanares, Vincent Daria
Journal: (2018): 1072306

A Critical Period for the Rapid Modification of Synaptic Properties at the VPm Relay Synapse
Authors: Libiao Pan, Junhua Yang, Qian Yang, Xiaomeng Wang, Liya Zhu, Yali Liu, Huifang Lou, Chou Xu, Ying Shen, Hao Wang
Journal: Frontiers in molecular neuroscience (2017)

Advances in Two-Photon Scanning and Scanless Microscopy Technologies for Functional Neural Circuit Imaging
Authors: Simon R Schultz, Caroline S Copeland, Amanda J Foust, Peter Quicke, Renaud Schuck
Journal: Proceedings of the IEEE (2017): 139–157

Bidirectional communication between sensory neurons and osteoblasts in an in vitro co-culture system
Authors: Daisuke Kodama, Takao Hirai, Hisataka Kondo, Kazunori Hamamura, Akifumi Togari
Journal: FEBS Letters (2017)

Ca 2+ signals initiate at immobile IP 3 receptors adjacent to ER-plasma membrane junctions
Authors: Nagendra Babu Thillaiappan, Alap P Chavda, Stephen C Tovey, David L Prole, Colin W Taylor
Journal: Nature Communications (2017): 1505

Calcium Imaging Across Large Areas of Intact Vascular Endothelium Reveals Stimulus-Specific Sensory Cells
Authors: Matthew D Lee, Calum Wilson, John G McCarron
Journal: The FASEB Journal (2017): 1005–8

Calcium transient assays for compound screening with human iPSC-derived cardiomyocytes: Evaluating new tools
Authors: Neil J Daily, Radleigh Santos, Joseph Vecchi, Pinar Kemanli, Tetsuro Wakatsuki
Journal: Journal of evolving stem cell research (2017): 1

Characterization of postsynaptic calcium signals in the pyramidal neurons of anterior cingulate cortex
Authors: Xu-Hui Li, Qian Song, Tao Chen, Min Zhuo
Journal: Molecular Pain (2017): 1744806917719847

Direct measurement of TRPV4 and PIEZO1 activity reveals multiple mechanotransduction pathways in chondrocytes
Authors: M Rocio Servin-Vences, Mirko Moroni, Gary R Lewin, Kate Poole
Journal: eLife (2017): e21074

Expression of the GluA2 subunit of glutamate receptors is required for the normal dendritic differentiation of cerebellar Purkinje cells
Authors: Masahiko Tanaka, Tomomi Senda, Naohide Hirashima
Journal: Neuroscience Letters (2017)

 

相关产品

产品名称 货号
钙离子荧光探针Cal-520 , AM Cat#21130
钙离子荧光探针Fluo-8, AM Cat#21080
新型钙离子荧光探针Calbryte 520, AM *细胞渗透性* Cat#20650

说明书
钙离子荧光探针Cal-670-Dextran Conjugate *MW 10,000*.pdf

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光 货号22846-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光 货号22846 货号 22846 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 6564
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具，可以使用多种参数。该特定试剂盒旨在同时检测凋亡，坏死和健康细胞。细胞凋亡是一种主动的程序化的细胞自发解体过程，可避免引起炎症。在凋亡中，磷脂酰丝氨酸（PS）被转移到质膜的外部小叶。作为细胞凋亡初始/中间阶段的通用指标，在观察形态变化之前，可以检测到磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现。 PS指示剂Annexin V-iFluor 488共轭物与膜PS结合后具有绿色荧光。膜不透性的Nuclear Blue DCS1（Ex / Em = 350/461 nm）标记细胞核的能力证明，质膜完整性的丧失代表了显示凋亡和坏死晚期的直接方法。此外，该试剂盒还提供了活细胞标记染料Cellbrite Red（Ex / Em = 613/631 nm），用于标记非凋亡健康细胞。该试剂盒经过优化，可通过荧光显微镜同时检测细胞凋亡（绿色），坏死（蓝色和/或绿色）和健康细胞（红色）。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒。

 

适用仪器

荧光显微镜  
激发： 494 nm (凋亡) / 350 nm (坏死) / 613 nm (活)
发射： 520 nm (凋亡) / 461 nm (坏死) / 631 nm (活)
推荐孔板： 黑色透明
通道： FITC滤波片 (凋亡) / DAPI滤波片(坏死) / Cy5滤波片 (活)

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用测试化合物准备细胞
  2. 加入三重荧光工作溶液（100 µL /样品）
  3. 在室温或37℃下孵育30-60分钟
  4. 用荧光显微镜在FITC通道（凋亡），DAPI通道（坏死）或Texas Red / Cy5通道（健康细胞）处进行分析

 

溶液配制

工作溶液配制

将10 µL的100X Annexin V-iFluor 488偶联物（组分A），5 µL的200X Nuclear Blue DCS1（组分C）和5 µL的200X Cellbrite Red（组分D）添加到1 mL的测定缓冲液（组分B）中 ）。 三重荧光测定溶液在室温下稳定至少1小时。 注意：由于最佳染色条件可能会因细胞类型而异，因此建议分别确定组分A，C和D的适当浓度。

 

实验步骤

1.处理后除去细胞培养基并检测化合物。

2.加入100 µL /孔（96孔板）或50 µL /孔（384孔板）的三重荧光分析溶液。 在避光条件下，于37℃孵育30至60分钟。

3.用HBSS，PBS或自备缓冲液洗涤细胞两次。

4.在带有FITC滤光片的荧光显微镜下，用Annexin V-iFluor 488偶联物分析凋亡细胞。 质膜上的绿色染色（Ex / Em = 494/520 nm）表明膜联蛋白V-iFluor 488缀合物与细胞表面的PS结合。 使用荧光显微镜用DAPI滤光片（Ex / Em = 350/461 nm）检测坏死的荧光强度，使用Texas Red或Cy5滤光片（Ex / Em = 613/631 nm）检测活细胞的荧光强度。

 

参考文献

Anthocyanin-rich blackcurrant extract inhibits proliferation of the MCF10A healthy human breast epithelial cell line through induction of G0/G1 arrest and apoptosis
Authors: Nanashima, Naoki and Horie, Kayo and Chiba, Mitsuru and Nakano, Manabu and Maeda, Hayato and Nakamura, Toshiya
Journal: Molecular Medicine Reports (2017): 6134–6141

Clusterin signals via ApoER2/VLDLR and induces meiosis of male germ cells
Authors: Riaz, Muhammad Assad and Stammler, Angelika and Borgers, Mareike and Konrad, Lutz
Journal: American Journal of Translational Research (2017): 1266

Detecting Apoptosis, Autophagy, and Necrosis
Authors: Coleman, Jack and Liu, Rui and Wang, Kathy and Kumar, Arun
Journal: Apoptosis Methods in Toxicology (2016): 77–92

A pharmaceutical preparation of Salvia miltiorrhiza protects cardiac myocytes from tumor necrosis factor-induced apoptosis and reduces angiotensin II-stimulated collagen synthesis in fibroblasts
Authors: Ling S, Luo R, Dai A, Guo Z, Guo R, Komesaroff PA.
Journal: Phytomedicine (2009): 56

Agmatine protects cultured retinal ganglion cells from tumor necrosis factor-alpha-induced apoptosis
Authors: Hong S, Kim CY, Lee JE, Seong GJ.
Journal: Life Sci (2009): 28

Concurrent induction of necrosis, apoptosis, and autophagy in ischemic preconditioned human livers formerly treated by chemotherapy
Authors: Domart MC, Esposti DD, Sebagh M, Olaya N, Harper F, Pierron G, Franc B, Tanabe KK, Debuire B, Azoulay D, Brenner C, Lemoine A.
Journal: J Hepatol (2009): 881

Down-regulation of myeloid cell leukemia 1 by epigallocatechin-3-gallate sensitizes rheumatoid arthritis synovial fibroblasts to tumor necrosis factor alpha-induced apoptosis
Authors: Ahmed S, Silverman MD, Marotte H, Kwan K, Matuszczak N, Koch AE.
Journal: Arthritis Rheum (2009): 1282

Exaggerated up-regulation of tumor necrosis factor alpha-dependent apoptosis in the older mouse liver following reperfusion injury: targeting liver protective strategies to patient age
Authors: Selzner M, Selzner N, Chen L, Borozan I, Sun J, Xue-Zhong M, Zhang J, McGilvray ID.
Journal: Liver Transpl (2009): 1594

Increased apoptosis in HepG2.2.15 cells with hepatitis B virus expression by synergistic induction of interferon-gamma and tumour necrosis factor-alpha
Authors: Shi H, Guan SH.
Journal: Liver Int (2009): 349

Outside-to-inside signaling through transmembrane tumor necrosis factor reverses pathologic interleukin-1beta production and deficient apoptosis of rheumatoid arthritis monocytes
Authors: Meusch U, Rossol M, Baerwald C, Hauschildt S, Wagner U.
Journal: Arthritis Rheum (2009): 2612

说明书
Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光 .pdf

钙离子荧光探针Cal-770, 钾盐 货号20460-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Cal-770, 钾盐

钙离子荧光探针Cal-770, 钾盐

货号 20460 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10×50 ug 价格 5244
Ex (nm) 758 Em (nm) 783
分子量 1688.58 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

Cal-520 ，Cal-590 和Cal-630 提供最强大的均匀荧光测定工具，用于检测细胞内钙动员。它们是荧光钙敏感染料，与现有的钙指示剂（如Fluo-3 AM，Fluo-4 AM和Rhod-2 AM）相比，具有显着改善的信噪比和细胞内保留。表达通过钙发出信号的GPCR或钙通道的细胞可以预装载可以穿过细胞膜的Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM。一旦进入细胞内，Cal 520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM的亲脂性阻断基团被细胞内酯酶切割，产生带负电荷的荧光染料，留在细胞内。它们与钙结合后的荧光大大增强。当用激动剂刺激细胞时，该受体表示细胞内钙的释放，这显着增加了Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 的荧光。高灵敏度和> 100倍荧光增强的特性使Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM成为测量细胞钙的理想指标。高信噪比和更好的细胞内保留使Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 钙测定成为评估GPCR和钙通道靶标以及筛选其激动剂和拮抗剂的有力工具。

除了方便的激发波长和钙的大荧光增强外，Cal-520 ，Cal-590 和Cal-630 主要定位于细胞溶胶中，不像Rhod-2主要位于线粒体中。 此外，Cal-590 和Cal-630 的长Ex / Em波长使这些染料成为完美的钙指示剂，与绿色荧光蛋白（GFP）细胞系的多色检测兼容。 此外，Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 钙测定经过优化，可与大多数现有荧光仪器兼容。 Cal-520在488 nm处可以很好地激发，并与FITC滤光片组一起使用。 Cal-590经过优化，可在555 nm激发，并与TRITC / Cy3滤光片组配合使用。 Cal-590经过优化，可在594 nm激发，并与TexasRed®滤光片组配合使用。光谱和钙结合特性总结如下（参见说明书中的表1）。

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

使用Cal-520 AM，Cal-570 AM或Cal-630 AM酯类

1.使用Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 AM酯：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（最终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。

 

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。

 

参考文献

Spatio-temporal modulation of light for stimulation and recording of neuronal activity
Authors: He Ma, Michael Lawrence Castanares, Vincent Daria
Journal: (2018): 1072306

A Critical Period for the Rapid Modification of Synaptic Properties at the VPm Relay Synapse
Authors: Libiao Pan, Junhua Yang, Qian Yang, Xiaomeng Wang, Liya Zhu, Yali Liu, Huifang Lou, Chou Xu, Ying Shen, Hao Wang
Journal: Frontiers in molecular neuroscience (2017)

Advances in Two-Photon Scanning and Scanless Microscopy Technologies for Functional Neural Circuit Imaging
Authors: Simon R Schultz, Caroline S Copeland, Amanda J Foust, Peter Quicke, Renaud Schuck
Journal: Proceedings of the IEEE (2017): 139–157

Bidirectional communication between sensory neurons and osteoblasts in an in vitro co-culture system
Authors: Daisuke Kodama, Takao Hirai, Hisataka Kondo, Kazunori Hamamura, Akifumi Togari
Journal: FEBS Letters (2017)

Ca 2+ signals initiate at immobile IP 3 receptors adjacent to ER-plasma membrane junctions
Authors: Nagendra Babu Thillaiappan, Alap P Chavda, Stephen C Tovey, David L Prole, Colin W Taylor
Journal: Nature Communications (2017): 1505

Calcium Imaging Across Large Areas of Intact Vascular Endothelium Reveals Stimulus-Specific Sensory Cells
Authors: Matthew D Lee, Calum Wilson, John G McCarron
Journal: The FASEB Journal (2017): 1005–8

Calcium transient assays for compound screening with human iPSC-derived cardiomyocytes: Evaluating new tools
Authors: Neil J Daily, Radleigh Santos, Joseph Vecchi, Pinar Kemanli, Tetsuro Wakatsuki
Journal: Journal of evolving stem cell research (2017): 1

Characterization of postsynaptic calcium signals in the pyramidal neurons of anterior cingulate cortex
Authors: Xu-Hui Li, Qian Song, Tao Chen, Min Zhuo
Journal: Molecular Pain (2017): 1744806917719847

Direct measurement of TRPV4 and PIEZO1 activity reveals multiple mechanotransduction pathways in chondrocytes
Authors: M Rocio Servin-Vences, Mirko Moroni, Gary R Lewin, Kate Poole
Journal: eLife (2017): e21074

Expression of the GluA2 subunit of glutamate receptors is required for the normal dendritic differentiation of cerebellar Purkinje cells
Authors: Masahiko Tanaka, Tomomi Senda, Naohide Hirashima
Journal: Neuroscience Letters (2017)

 

相关产品

产品名称 货号
钙离子荧光探针Cal-520 , AM Cat#21130
钙离子荧光探针Fluo-8, AM Cat#21080
新型钙离子荧光探针Calbryte 520, AM *细胞渗透性* Cat#20650

说明书
钙离子荧光探针Cal-770, 钾盐.pdf

Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 绿色荧光 货号22849-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

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Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 绿色荧光 货号22849 货号 22849 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 50 Tests 价格 3924
Ex (nm) 498 Em (nm) 522
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

DNA片段化代表晚期细胞凋亡的特征。凋亡细胞中的DNA断裂可以通过末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）检测。 TUNEL测定法依赖于DNA中存在的缺口，该缺口可通过TdT进行鉴定，TdT是一种酶，该酶催化添加标记物的dUTP。现有的所有TUNEL分析均包含剧毒的甲胂酸钠，这可能会诱导细胞凋亡并降低DNA的产生和DNA链。我们的Cell Meter TUNEL细胞凋亡测定试剂盒使用了不含甲胂酸钠的专有缓冲系统。该试剂盒基于将我们专有的荧光染料掺入凋亡过程中形成的DNA片段中。该测定法经过优化，可直接检测分离的或贴壁细胞中的细胞凋亡，而无需使用任何抗体。该试剂盒为所有必需成分提供了优化的测定方案。适用于荧光酶标仪，荧光显微镜或流式细胞仪。在流行的FITC通道上可以轻松检测到其信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒。

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适用仪器

流式细胞仪  
激发： 488nm激光
发射： 530/30nm滤波片
通道： FITC滤波片
荧光显微镜  
激发： FITC滤波片
发射： FITC滤波片
推荐孔板： 黑色透明
荧光酶标仪  
激发： 490nm
发射： 525nm
cutoff: 515nm
推荐孔板： 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用测试化合物准备细胞。
  2. 与TUNEL工作溶液在37°C下孵育30分钟至1小时。
  3. 洗涤细胞。
  4. 用4％甲醛（可选）固定细胞。
  5. 用带FITC滤光片的荧光显微镜或带FITC通道的流式细胞仪。读取Ex / Em = 490/525 nm（截止= 515 nm）处的荧光强度。

 

溶液配制 

工作溶液配制

将0.5μL的100X Tunnelyte Green（组分A）添加到50μL的反应缓冲液（组分B）中，使总体积为50.5μL的TUNEL工作溶液。 避光。 注意：应单独评估每个细胞系，以确定最佳细胞密度。

 

实验步骤

1.根据您的特定协议，将细胞培养至最佳密度以诱导凋亡。 对于在96孔板培养物中生长的贴壁细胞，我们建议大约30,000至50,000个细胞/孔，对于非贴壁细胞，建议大约1至2 x 106细胞/ mL。 同时，在每种标记条件下，用诱导群体相同的密度培养非诱导阴性对照细胞群体。 注意：我们用100 nM-1 µM星形孢菌素处理HeLa细胞4小时，以诱导细胞凋亡。

2.染色和固色：

2.1取出细胞培养基。
2.2向每个样品中添加50µL TUNEL工作溶液。
2.3在37°C下孵育30-60分钟。
2.4除去TUNEL工作溶液，并用200 µL /孔的PBS洗涤细胞1-2次。
2.5向每个样品中添加100uL反应缓冲液（组分B）。
2.6使用Ex / Em = 490/525 nm（cut off= 515 nm）的荧光酶标仪，带有FITC滤光片组的荧光显微镜或带有FITC通道的流式细胞仪检测荧光强度。
2.7可选：从步骤5中移出反应缓冲液，并向每个孔中添加100 µL /孔/ 96孔板的4％甲醛固定缓冲液（未提供）。注意：对于非贴壁细胞，请添加所需量（例如2X106细胞/ mL）的4％甲醛固定液。
2.8在室温下将平板孵育20至30分钟。
2.9去除固定剂。
2.10用PBS洗涤细胞2-3次，并用100µL PBS /孔/ 96孔板替换。
2.11使用Ex / Em = 490/525 nm（cut off= 515 nm）的荧光酶标仪，带有FITC滤光片组的荧光显微镜或带有FITC通道的流式细胞仪检测荧光强度。
2.12可选：用1X Hoechst（组分C）在Ex / Em = 350/460 nm处染色细胞核，以进行图像分析

 

参考文献

Vaccarin alleviates hypertension and nephropathy in renovascular hypertensive rats
Authors: Cai, Weiwei and Zhang, Zhenpeng and Huang, Yiqi and Sun, Haijian and Qiu, Liying
Journal: Experimental and Therapeutic Medicine (2018): 924–932

CO-releasing molecules-2 attenuates ox-LDL-induced injury in HUVECs by ameliorating mitochondrial function and inhibiting Wnt/β-catenin pathway
Authors: Sun, Hai-Jian and Xu, Dong-Yan and Sun, Yi-Xin and Xue, Tong and Zhang, Chen-Xing and Zhang, Zhi-Xuan and Lin, Wei and Li, Ke-Xue
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017)

Salusin-β mediates high glucose-induced endothelial injury via disruption of AMPK signaling pathway
Authors: Zhu, Xuexue and Zhou, Yuetao and Cai, Weiwei and Sun, Haijian and Qiu, Liying
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017)

Vaccarin protects human microvascular endothelial cells from apoptosis via attenuation of HDAC1 and oxidative stress
Authors: Zhu, Xuexue and Lei, Yueyue and Tan, Fanggen and Gong, Leilei and Gong, Haifeng and Yang, Wei and Chen, Ting and Zhang, Zhixuan and Cai, Weiwei and Hou, Bao and others
Journal: European Journal of Pharmacology (2017)

Axl is required for TGF-β2-induced dormancy of prostate cancer cells in the bone marrow
Authors: Yumoto, Kenji and Eber, Matthew R and Wang, Jingcheng and Cackowski, Frank C and Decker, Ann M and Lee, Eunsohl and Nobre, Ana Rita and Aguirre-Ghiso, Julio A and Jung, Younghun and Taichman, Russell S
Journal: Scientific Reports (2016)

Growth Arrest-Specific 6 (GAS6) Promotes Prostate Cancer Survival by G1 Arrest/S Phase Delay and Inhibition of Apoptotic Pathway During Chemotherapy in Bone Marrow
Authors: Lee, Eunsohl and Decker, Ann M and Cackowski, Frank C and Kana, Lulia A and Yumoto, Kenji and Jung, Younghun and Wang, Jingcheng and Buttitta, Laura and Morgan, Todd M and Taichman, Russell S
Journal: Journal of cellular biochemistry (2016)

RFX1–dependent activation of SHP-1 induces autophagy by a novel obatoclax derivative in hepatocellular carcinoma cells
Authors: Su, Jung-Chen and Tseng, Ping-Hui and Hsu, Cheng-Yi and Tai, Wei-Tien and Huang, Jui-Wen and Ko, Ching-Huai and Lin, Mai-Wei and Liu, Chun-Yu and Chen, Kuen-Feng and Shiau, Chung-Wai
Journal: Oncotarget (2014): 4909

In situ detection of apoptosis by the TUNEL assay: an overview of techniques
Authors: Loo DT.
Journal: Methods Mol Biol (2011): 3

Testicular apoptosis after dietary zinc deficiency: ultrastructural and TUNEL studies
Authors: Kumari D, Nair N, Bedwal RS.
Journal: Syst Biol Reprod Med (2011): 233

In situ localization of apoptosis using TUNEL
Authors: Hewitson TD, Darby IA.
Journal: Methods Mol Biol (2010): 161

说明书
Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 绿色荧光 .pdf

钙离子荧光探针Cal-770-Dextran Conjugate *MW 10,000* 货号20462-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Cal-770-Dextran Conjugate *MW 10,000*

钙离子荧光探针Cal-770-Dextran Conjugate *MW 10,000*

钙离子荧光探针Cal-770-Dextran Conjugate *MW 10,000* 货号20462 货号 20462 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 6564
Ex (nm) 758 Em (nm) 783
分子量 ~12000 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

钙测量对于许多生物学研究至关重要。显示结合钙后光谱响应的荧光探针使研究人员能够使用荧光显微镜，流式细胞仪，荧光光谱和荧光酶标仪来研究细胞内游离钙浓度的变化。可以使用贴片移液器或显微注射将这些葡聚糖偶联的钙指示剂的细胞不渗透盐形式物理加载到细胞上。使用荧光显微镜测量来自这些细胞的荧光信号。与AM酯形式相比，我们的钙指示剂的右旋糖酐形式在泄漏和区室化方面均显着降低。在荧光红钙指示剂葡聚糖结合物中，Cal-770葡聚糖偶联物可能比其他红色荧光右旋糖酐偶联物更好，因为其更长的荧光波长已针对体内成像进行了优化。Cal-770 是近红外（NIR）钙指示剂，在〜775 nm处具有最大发射。它是唯一具有超过700 nm激发和发射波长的荧光钙指示剂。Cal-770 是极少数可用于体内成像的钙指示剂之一，因为它具有NIR荧光。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针Cal-770-Dextran Conjugate。 

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

使用Cal-520 AM，Cal-570 AM或Cal-630 AM酯类

1.使用Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 AM酯：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（最终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。

 

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。

 

参考文献

Spatio-temporal modulation of light for stimulation and recording of neuronal activity
Authors: He Ma, Michael Lawrence Castanares, Vincent Daria
Journal: (2018): 1072306

A Critical Period for the Rapid Modification of Synaptic Properties at the VPm Relay Synapse
Authors: Libiao Pan, Junhua Yang, Qian Yang, Xiaomeng Wang, Liya Zhu, Yali Liu, Huifang Lou, Chou Xu, Ying Shen, Hao Wang
Journal: Frontiers in molecular neuroscience (2017)

Advances in Two-Photon Scanning and Scanless Microscopy Technologies for Functional Neural Circuit Imaging
Authors: Simon R Schultz, Caroline S Copeland, Amanda J Foust, Peter Quicke, Renaud Schuck
Journal: Proceedings of the IEEE (2017): 139–157

Bidirectional communication between sensory neurons and osteoblasts in an in vitro co-culture system
Authors: Daisuke Kodama, Takao Hirai, Hisataka Kondo, Kazunori Hamamura, Akifumi Togari
Journal: FEBS Letters (2017)

Ca 2+ signals initiate at immobile IP 3 receptors adjacent to ER-plasma membrane junctions
Authors: Nagendra Babu Thillaiappan, Alap P Chavda, Stephen C Tovey, David L Prole, Colin W Taylor
Journal: Nature Communications (2017): 1505

Calcium Imaging Across Large Areas of Intact Vascular Endothelium Reveals Stimulus-Specific Sensory Cells
Authors: Matthew D Lee, Calum Wilson, John G McCarron
Journal: The FASEB Journal (2017): 1005–8

Calcium transient assays for compound screening with human iPSC-derived cardiomyocytes: Evaluating new tools
Authors: Neil J Daily, Radleigh Santos, Joseph Vecchi, Pinar Kemanli, Tetsuro Wakatsuki
Journal: Journal of evolving stem cell research (2017): 1

Characterization of postsynaptic calcium signals in the pyramidal neurons of anterior cingulate cortex
Authors: Xu-Hui Li, Qian Song, Tao Chen, Min Zhuo
Journal: Molecular Pain (2017): 1744806917719847

Direct measurement of TRPV4 and PIEZO1 activity reveals multiple mechanotransduction pathways in chondrocytes
Authors: M Rocio Servin-Vences, Mirko Moroni, Gary R Lewin, Kate Poole
Journal: eLife (2017): e21074

Expression of the GluA2 subunit of glutamate receptors is required for the normal dendritic differentiation of cerebellar Purkinje cells
Authors: Masahiko Tanaka, Tomomi Senda, Naohide Hirashima
Journal: Neuroscience Letters (2017)

 

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说明书
钙离子荧光探针Cal-770-Dextran Conjugate *MW 10,000*.pdf

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22904-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 适合于流式细胞仪

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 适合于流式细胞仪

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22904 货号 22904 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 3924
Ex (nm) 490 Em (nm) 520
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

活性氧（ROS）是氧正常代谢的天然副产物，在细胞信号传导中起重要作用。但是，在与氧化应激相关的状态下，ROS水平会急剧增加。 ROS的积累会严重破坏细胞结构。氧化应激在心血管疾病，糖尿病，骨质疏松症，中风，炎性疾病，许多神经退行性疾病和癌症中的作用已得到公认。 ROS检测将有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒使用我们独特的Amplite ROS Green荧光定量活细胞中的ROS，Amplite ROS Green具有细胞渗透性。与ROS反应时会生成绿色荧光。 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法，可在培养一小时后检测活细胞中的细胞内ROS。该试剂盒针对流式细胞仪应用进行了优化，其信号可以通过Ex / Em = 490/520 nm（FL1通道）进行检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒。 

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器

流式细胞仪  
激发： 488nm激光
发射： 530/30nm滤波片
通道： FITC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备密度为0.5-1×106细胞/ mL的细胞
2.在0.5 mL细胞悬液中加入1 µL 500X Amplite ROS Green
3.在37℃下将细胞染色1小时
4.处理细胞以诱导ROS
5.使用带有FL1通道的流式细胞仪分析细胞（Ex / Em = 490/520 nm）

 

溶液配制

1.储备溶液配制

        除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。

Amplite ROS绿色储备溶液（500X）：将100 µL DMSO（组分C）添加到Amplite ROS Green（组分A）的小瓶中，并充分混合以制成500X Amplite ROS Green储备液。 避光。 注意：要存放，请密封管。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

 

操作步骤

1.对于每个样品，以0.5×105至1×106细胞/ mL的密度在0.5 mL测定缓冲液（组分B）或自备缓冲液中制备细胞。注意：应单独评估每个细胞系，以确定诱导ROS的最佳细胞密度。

2.将1 µL 500X Amplite ROS Green储备溶液加入0.5 mL细胞悬液中。

3.在37ºC下孵育1小时。注意：对于贴壁细胞，用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在与Amplite ROS Green孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和测试化合物，优化每个实验的孵育时间。

4.通过在所需的缓冲液（例如PBS或HBSS）中添加50 µL 11X测试化合物来处理细胞。对于对照孔（未处的细胞），添加相应量的缓冲液。

5.将细胞在37ºC下孵育，以诱导ROS（避光）。注意：我们在37℃下用100 µM TBHP（氢过氧化叔丁基）处理Jurkat细胞30分钟，以诱导ROS。有关详细信息，请参见图1。

6.使用具有FL1通道（Ex / Em = 490/520 nm）的流式细胞仪检测荧光强度。

 

图示

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22904

图1.使用Cell Meter 荧光法细胞内总ROS活性测定试剂盒在TBHP处理后检测Jurkat细胞中的细胞内ROS。 将细胞与Amplite ROS Green在37°C孵育1小时。 然后将细胞在不使用（蓝色）或（红色）100 µM TBHP的情况下在37°C下处理30分钟。 使用流式细胞仪（BD FACSCalibur）在FL1通道处检测荧光信号。

 

参考文献

Anti-proliferation effect of blue light-emitting diodes against antibiotic-resistant Helicobacter pylori
Authors: Ma, Jianwei and Hiratsuka, Takahiro and Etoh, Tsuyoshi and Akada, Junko and Fujishima, Hajime and Shiraishi, Norio and Yamaoka, Yoshio and Inomata, Masafumi
Journal: Journal of Gastroenterology and Hepatology (2017)

Notoginsenoside R1 attenuates high glucose-induced endothelial damage in rat retinal capillary endothelial cells by modulating the intracellular redox state
Authors: Fan, Chunlan and Qiao, Yuan and Tang, Minke
Journal: Drug Design, Development and Therapy (2017): 3343

Good hydration and cell-biological performances of superparamagnetic calcium phosphate cement with concentration-dependent osteogenesis and angiogenesis induced by ferric iron
Authors: Zhang, J and Shi, HS and Liu, JQ and Yu, T and Shen, ZH and Ye, JD
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2015): 8782–8795

Topiramate Protects Pericytes from Glucotoxicity: Role for Mitochondrial CA VA in Cerebromicrovascular Disease in Diabetes
Authors: Patrick, Ping and Price, Tulin O and Diogo, Ana L and Sheibani, Nader and Banks, William A and Shah, Gul N
Journal: Journal of endocrinology and diabetes (2015)

Down-regulated peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) in lung epithelial cells promotes a PPARγ agonist-reversible proinflammatory phenotype in chronic obstructive pulmonary disease (COPD)
Authors: Lakshmi, Sowmya P and Reddy, Aravind T and Zhang, Yingze and Sciurba, Frank C and Mallampalli, Rama K and Duncan, Steven R and Reddy, Raju C
Journal: Journal of Biological Chemistry (2014): 6383–6393

Superoxide dismutase as a target of clioquinol-induced neurotoxicity
Authors: Kawamura, Kazuyuki and Kuroda, Yukiko and Sogo, Masako and Fujimoto, Miki and Inui, Toshio and Mitsui, Takao
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2014): 181–185

Xanthine oxidase inhibition by febuxostat attenuates experimental atherosclerosis in mice
Authors: Nomura, Johji and Busso, Nathalie and Ives, Annette and Matsui, Chieko and Tsujimoto, Syunsuke and Shirakura, Takashi and Tamura, Mizuho and Kobayashi, Tsunefumi and So, Alex and er and Yamanaka, Yoshihiro
Journal: Scientific reports (2014): 4554

High glucose-induced mitochondrial respiration and reactive oxygen species in mouse cerebral pericytes is reversed by pharmacological inhibition of mitochondrial carbonic anhydrases: implications for cerebral microvascular disease in diabetes
Authors: Shah, Gul N and Morofuji, Yoichi and Banks, William A and Price, Tulin O
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2013): 354–358

Automatic flow injection based methodologies for determination of scavenging capacity against biologically relevant reactive species of oxygen and nitrogen
Authors: Magalhaes LM, Lucio M, Segundo MA, Reis S, Lima JL.
Journal: Talanta (2009): 1219

Diabetes and the impairment of reproductive function: possible role of mitochondria and reactive oxygen species
Authors: Amaral S, Oliveira PJ, Ramalho-Santos J.
Journal: Curr Diabetes Rev (2008): 46

 

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